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超声背散射检测足月新生儿骨营养状况及其意义
目的 初步建立正常足月新生儿松质骨超声背散射系数(back scatter coefficient,BSC)的参考值范围,并探索采用BSC检测足月新生儿骨营养状况的意义. 方法 研究对象为2014年7月至8月出生于上海同济大学附属第一妇婴保健院的正常足月新生儿665例.分别于生后3d和生后42 d,使用频率为2.25、3.5和5 MHz的宽带非聚焦换能器,测量跟骨超声信号.用MATLAB分析软件分析和计算背散射信号.记录被测婴儿的出生胎龄、体重、日龄等资料.分析BSC值与出生胎龄和体重的相关性.采用方差分析、Tukey检验、秩和检验、Dunn检验,以及Pearson或Spearman相关分析进行统计学处理. 结果 (1)665例正常足月儿中,男婴335例;出生胎龄(38.0±1.9)周,出生体重(3 152±226)g.(2)生后3d:各出生胎龄组和出生体重组间BSC值在2.25 MHz(H值分别为9.842和17.271)和3.5 MHz(H值分别为6.275和21.450)差异均有统计学意义(P值均＜0.05).在3.5和2.25 MHz,BSC值与出生胎龄(r值分别为0.047和0.035,P值均＜ 0.05)和出生体重(r值分别为0.125和0.186,P值均＜0.05)均呈正相关.(3)生后42 d:各出生胎龄和体重组婴儿5、3.5和2.25 MHz测得的BSC值差异均有统计学意义(胎龄:H值分别为76.832、16.498和32.756,JP值均＜0.01;体重:H值分别为70.014、18.095和34.126,P值均＜0.01).在5、3.5和2.25 MHz测得的BSC值与出生胎龄和体重均呈正相关(胎龄:r值分别为0.397、0.286和0.272;体重:r值分别为0.451、0.223和0.196;P值均＜0.01). 结论 本研究初步建立了正常足月儿BSC参考值的百分位数.一定频率下,BSC与出生胎龄、体重有良好的正相关性,能较准确地反映足月儿出生时和生后的松质骨状况,可用于新生儿骨营养状况的随访检查.
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卡马西平和丙戊酸钠对癫癎患儿骨代谢的影响
目的探讨长期服用卡马西平(CBZ)或丙戊酸钠(VPA)对癫癎患儿骨代谢的影响.方法对92名单独服用CBZ或VPA 2年以上的癫癎患儿及35名年龄匹配的健康儿童的骨密度进行测量,测定骨代谢特异性生化指标,血清骨钙素(OC,骨形成指标)和尿脱氧吡啶酚(DPD,骨吸收指标),并调查每日钙摄入量.结果癫癎患儿骨密度明显低于对照组(P<0.05),服用抗癫癎药物(AEDs)的时间与骨密度呈负相关(rs=-0.21～-0.31,P<0.05).癫癎患儿中低骨密度患儿32人,占35%,明显高于对照组14%(P<0.05).低骨密度的癫癎患儿多体重指数较高(P<0.05),每日钙摄入量较少(P<0.01),服用AEDs的时间相对较长(P<0.01).癫癎患儿血清OC浓度明显低于对照组(P<0.01);而尿DPD浓度与对照组基本一致(P>0.05).结论长期服用CBZ或VPA会导致骨代谢异常,骨密度下降、骨转换降低(以骨形成减少为主);而钙摄入量不足及体重指数偏高是加剧骨骼异常的诱发因素.
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多孔结构钛种植体对周围骨组织应力分布影响的三维有限元分析
目的 分析内芯致密外层不同孔隙率结构的钛种植体周围骨组织应力分布情况,评估多孔结构钛种植体的生物力学性能.方法 建立5组直径为4.1 mm的种植体三维有限元模型:实心(A组)、外层孔隙率为30％中央实心支柱直径分别为1.5和3.1 mm(B和C组)、外层孔隙率为40％中央实心支柱直径分别为1.5和3.1 mm(D和E组);同时建立4类骨组织、上颌第一前磨牙牙冠、基台模型.将5组种植体装配于Ⅲ类骨组织中,分别施加150 N垂直和50 N侧向载荷;将5组种植体分别装配于4类骨组织中,加载极限(牙合)力载荷;分析种植体及周围骨组织von Mises应力分布.结果 各种载荷条件下B～E组多孔结构钛种植体骨界面大von Mises应力均大于A组.极限(牙合)力载荷下,随着种植体多孔层厚度和孔隙率的增加,以及骨组织质量的降低,骨组织的大von Mises应力增加.在Ⅲ类骨中垂直加载时A组大von Mises应力为17.56 MPa,B、C组种植体大von Mises应力较A组大,D、E组进一步增大,可达69.24 MPa;侧向载荷、极限(牙合)力载荷下结果相似.同组种植体周围骨应力随骨组织质量降低而增加,D组种植体周围骨组织大von Mises应力可达134.95 MPa.结论 种植体的多孔结构有利于应力向周围骨组织传导,可增加骨组织受到的力学刺激,但若(牙合)力大小、方向不当,或骨组织质量不佳,则多孔结构种植体可能产生病理性应力.
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脂肪间充质干细胞条件培养基及其外泌体促成骨作用的体外研究
目的 研究大鼠脂肪间充质干细胞(ASC)条件培养基及其外泌体的体外促成骨作用.方法 分离培养原代大鼠ASC和骨髓间充质干细胞(BMSC)并进行鉴定;超速离心法收集/去除条件培养基中的外泌体,采用透射电镜法及粒径分析法鉴定所获取的外泌体;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测其对细胞增殖的影响;Transwell检测其对细胞迁移的影响;碱性磷酸酶(ALP)活性实验和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测其对成骨的影响.SPSS 20.0软件、Bonferroni检验进行统计学分析.结果 实验所获取的原代BMSC和ASC符合间充质干细胞鉴定标准.透射电镜及粒径分析结果表明所获取的外泌体具有典型的外泌体形态特征.CCK-8实验表明培养7 d后,各处理组中A450值存在差异(F=157.74,P=0.001),BMSC增殖条件培养基组A450值(2.71 ± 0.15)高于对照组(1.95 ± 0.11);去外泌体组的A450值(2.28 ± 0.34)低于条件培养基组.Transwell实验结果表明,培养24 h后各处理组中的迁移细胞数存在差异(F=46.79,P=0.001),条件培养基组迁移细胞数(51.6 ± 1.3)高于对照组(28.6 ± 1.4),去外泌体组迁移的细胞数(37.2 ± 2.2)低于条件培养基组.ALP活性实验结果表明,培养7 d后各处理组中的ALP活性存在差异(F=78.43,P=0.001),条件培养基组ALP活性为(310 ± 11),高于对照组(200 ± 24),去外泌体组ALP活性为(240 ± 19)低于条件培养基组.实时荧光定量PCR检测成骨相关基因的表达,各处理组中的基因表达存在差异(FALP=32.30,PALP=0.001;FRUNX2=26.78,PRUNX2=0.001).结论 成骨诱导后大鼠ASC条件培养基及其中的外泌体能够有效的促进BMSC增殖、迁移和成骨向分化,具有体外促成骨作用.
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不同处理的同种异体骨对成骨细胞增殖和活性的影响
为探讨各同种异体骨对成骨细胞增殖和活性的影响,将5种同种异体兔骨分别与DMEM培养液匀浆,取各上清液与兔成骨细胞复合后体外培养,以MTT比色法检测细胞增殖活性并进行碱性磷酸酶定量测定.结果显示,冷冻骨(FB)、冻干骨(LB)对成骨细胞增殖和活性有抑制,而脱钙骨基质(DBM)、骨基质明胶(BMG)及去抗原自溶同种异体骨(AAA)则表现出促进作用.说明除FB、LB外,其余3种同种异体骨均具有良好的细胞相容性,且可提高成骨细胞的增殖能力和功能活性.
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地塞米松对大鼠腰椎骨质量的影响
目的:观察地塞米松(Dex)对大鼠腰椎骨质量的影响.方法:SPF级3月龄SD雌性大鼠,每周尾静脉注射Dex 1,2.5及5mg·kg-12次,共8周.在实验结束前第14,13天和第4,3天分别sc四环素和钙黄绿素荧光标记.实验结束时处死大鼠后取材,采用不脱钙骨切片和骨组织形态计量学方法观察和测量第4腰推骨的显微结构参数;骨密度仪测量第3腰推的骨矿密度;采用生物力学方法进行第5腰稚的压缩力学检测.结果:与正常对照组相比,所有Dex组体重明显下降,分别下降了14.8%,16.6%和18.0%(P<0.05).骨矿含量和压缩力学检测变化与正常对照组无明显统计学差异.骨小梁数量分别增加了17.2%,13.3%和9.0%,分离度分别减小了19.2%,16.7%和15.1%(P<0.05),但镜下观察看到小梁细碎,断裂点多且分布不均.动态参数荧光周长百分率明显下降,Dex 1,2.5和5mg·kg-1组分别降低49.5%,62.4%和73.2%(P<0.01);骨形成率分别降低47.0%,66.8%和76.7%(P<0.01);成骨细胞周长也分别降低了20.0%,49.3%和43.6%(P<0.05,P<0.01).结论:Dex显著抑制骨形成,骨代谢的失衡致骨的组织成分改变,三维结构变差,但腰推骨质量还没有明显下降.
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人羊膜基质细胞作为骨组织工程种子细胞的应用
目的:初步探索人羊膜基质细胞(hAMC)作为骨组织工程种子细胞的潜力.方法:分离培养hAMC,将第3代hAMC在含有地塞米松(0.1 μmol/L)、维生素C(50 mg/L)和β-磷酸甘油钠(10 mmol/L)的DMEM培养液中进行成骨诱导培养1周,行茜素红染色,计数钙化结节形成的数量,并进行免疫荧光细胞化学染色以检测Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶的表达.利用免疫组织(细胞)化学染色检测羊膜及hAMC中FasL的表达.结果:hAMC经过成骨诱导后,可见明显钙化结节形成,平均每孔18个,钙化结节处细胞Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶表达阳性.人羊膜组织中细胞及体外培养的hAMC均可检测剑FasL的阳性表达.结论:hAMC有潜力成为一种比较理想的骨组织工程的种子细胞.
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骨靶向性柔性纳米脂质体
目的:研究柔性纳米脂质体(ultradeformable nano-liposomes,UL)分别经泊洛沙姆407(poloxamer 407,P407)、乙二胺四甲叉膦酸(ethylenediaminetetramethylene phosphonic acid,EDTMP)和1,12-二胺四甲叉膦酸(1,12-dodecanediaminetetramethylene phosphonic acid,12-DTMP)修饰后,骨组织分布情况的改变.方法:以薄膜蒸发法制备了芘的普通柔性纳米脂质体(normal ultradeformable nano-liposomes,N-UL)、P407修饰的柔性纳米脂质体(the ultradeformable nano-liposomes modified by P407,P-UL)、EDTMP修饰的柔性纳米脂质体(the ultradeformable nano-liposomes modified by EDTMP,E-UL)以及12-DTMP修饰的柔性纳米脂质体(the ultradeformable nano-liposomes modified by 12-DTMP,12-UL),用荧光分析法进行检测,比较了 4种柔性纳米脂质体在小鼠体内心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪和股骨等各组织的分布情况.结果:4种柔性纳米脂质体的包封率均达到80%.P-UL,12-UL和E-UL使芘在骨内的峰浓度(peak concentration,cmax)分别为N-UL的1.51倍,1.10倍和1.66倍,药浓度-时间曲线下面积(area under curve,AUC)为N-UL的1.83倍,1.76倍和3.81倍,总靶向效率(drug targeting efficiency,DTE)提高了277.94%,203.12%和653.02%.结论:P-UL,12-UL,E-UL 3种柔性纳米脂质体均具有骨靶向作用,且E-UL的靶向性能优.
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人脂肪基质细胞在骨组织工程学中的应用
口腔颌面部及全身骨组织缺损是临床医生经常要面对的困境.造成骨缺损的原因有很多,包括先天发育异常、炎症、肿瘤、外伤等,然而治疗骨缺损的方法却十分有限,以往主要应用自体骨移植或人工骨替代材料,但是,自体骨移植取材受限并且会增加手术创伤,人工材料生物相容性差并且成骨能力有限,因此,骨组织工程技术有望在今后成为主要的骨再生技术[1 ].一个经典的组织工程化骨系统一般由3个要素构成,即:种子细胞、成骨向诱导因子和三维支架材料,而其中种子细胞是骨组织工程研究的基础和关键[2].
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骨形态发生蛋白研究进展
随着骨组织工程学的发展,使愈来愈多需要自体或异体骨移植的骨缺损、骨融合可以通过工程化体内骨诱导的形式成骨.其中骨形态发生蛋白是有应用前景,同时也是近几年国内外研究多成骨诱导因子,并且已经在临床得到初步的应用.故对其生物特性、传送方式、缓释载体等方面有一个全面的理解是必要的.
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LDRD的临床应用
国内组织工程研究现状中国科技部早在1999年,已经将组织工程的基本科学问题列入国家重点基础研究发展规划项目(973项目).还将把组织工程产品列入"十五"期间863项目,增大投入达数亿元.上海第九人民医院曹谊林教授在裸鼠体内再造出人耳廓样软骨,达到国际领先水平.另外,军事医学科学院的基础医学研究所目前已经掌握了构建人体软骨和骨组织的关键技术,在动物体内成功构建了气管软骨、关节软骨等.有望在近年内开发出组织工程产品.
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光波-微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的应用
目的 探讨光波-微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的作用.方法 用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波-微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ的条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用光波-微波-LSAB免疫组织化学染色技术检测不同脱钙条件下ANP、CD31、CD34、5-HT、S-100、NF、GFAP和Vimentin的表达.结果 8%硝酸室温脱钙时间长,光波-微波组合脱钙时间短;微波组、光波组、光波-微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显比对照组好;光波-微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显优于单纯微波、单纯光波法;光波-微波组合Ⅱ-LSAB免疫组织化学染色技术比常规免疫组织化学染色所用时间短、染色效果好.结论 光波-微波辐射脱钙及免疫组化染色所用的时间明显缩短,染色效果好.
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过量氟对大鼠骨骼Ⅰ型胶原mRNA表达及纤维性状的影响
目的观察过量氟对大鼠骨骼Ⅰ型胶原mRNA表达的影响和对大鼠骨骼中胶原纤维性状的作用.方法将雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组10只,分别为给氟0.5、1、2个月组及相应的对照组.给氟组饮用含221 mg/LNaF的含氟水,对照组饮用蒸馏水.制备α1(Ⅰ)胶原cDNA探针,采用cDNA-mRNA原位杂交方法,检测大鼠骨组织中Ⅰ型胶原mRNA的改变.采用苦味酸-天狼星红偏振光染色法对骨组织中胶原纤维进行观察.结果cDNA-mRNA原位杂交显示,大鼠给氟0.5个月后,Ⅰ型胶原mRNA水平上升,但在给氟1个月及2个月时,阳性信号减弱.苦昧酸-天狼星红偏振光观察显示在肱骨、股骨、肋骨等骨组织中,胶原纤维发生断裂、变短、变细、排列紊乱,含量下降.结论过量氟对骨Ⅰ型胶原mRNA表达有短期增强作用,继而抑制Ⅰ型胶原mRNA合成.胶原mRNA水平下降可能是氟骨症胶原蛋白水平下降的原因之一.过量氟可导致大鼠Ⅰ型胶原纤维正常结构破坏,交联下降.
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瘦素与骨质疏松研究进展
研究表明原代培养的骨髓脂肪细胞有高水平的瘦素表达;瘦素可促进人骨髓基质细胞向成骨细胞分化,抑制其向脂肪细胞分化;另外,血瘦素水平影响老年人成骨细胞活性及胎儿的骨骼发育,这些均提示瘦素影响骨代谢.成骨细胞上有瘦素及其受体表达,表明瘦素可直接作用于骨.瘦素也可通过中枢抑制骨形成.瘦素并不影响骨吸收.瘦素在绝经后骨质疏松的发生中发挥一定作用,还可能介导了糖尿病相关性骨质疏松的发生.瘦素用于治疗骨质疏松的前景值得评价.
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成纤维细胞生长因子9及其受体对骨骼的作用
成纤维细胞生长因子-9(FGF-9)初发现于人类神经胶质瘤细胞,具有三叶草核心结构,而且必须与肝素结合才能活化受体.FGF受体(FGFR)均为单链酪氨酸激酶受体,FGF-9主要与FGFR-2和FGFR-3结合.FGF-9分布广泛,具有多种生理功能.在骨组织,FGFR-2主要表达于成骨细胞系,FGFR-3主要表达于软骨细胞系,FGF-9可能通过活化FGFR-2促进膜内成骨,通过活化FGFR-3抑制软骨内成骨.
关键词： 成纤维细胞生长因子-9 成纤维细胞生长因子受体 骨和骨组织 成骨细胞 破骨细胞 -
可预防感染的组织工程骨在修复山羊大段骨缺损中的抗感染及成骨效果研究
目的 构建可预防感染的组织工程骨并评估其在修复山羊大段骨缺损中的抗感染能力及成骨效果.方法 设计可控性缓释抗生素系统“纤维蛋白凝胶修饰的藻酸盐-万古霉素缓释微球”(FG-Vanco-AB),以此为基础构建可预防感染的组织工程骨并进行检测,然后移植到山羊右侧股骨临界骨缺损的部位,对侧作为对照将组织工程骨(不含可控性缓释抗生素系统)移植到同样的临界骨缺损区.抗生素发挥抗菌作用的标准浓度为5 mg/ml,即对金黄色葡萄球菌的低杀菌浓度,术后通过高效液相色谱法检测骨缺损区局部、周围及血液中万古霉素浓度,检测其缓释剂抗感染能力;组织学、CT、ECT检测骨愈合情况,以此来评价预防感染组织工程骨的成骨效果.结果 通过扫描电镜、激光共聚焦以及体内示踪等检测,种子细胞在体内及体外的存活情况与组织工程骨组类似;山羊殷骨右侧局部、左侧局部及血液中持续超过杀菌浓度的时间分别为28 d、2d和7d.万古霉素在股骨中的浓度自移植部位向两侧逐渐递减.山羊双侧股骨术后第28天及56天ECT检查结果均提示无明显区别,CT及组织学检查证明在术后第14天、28天、112天,山羊双侧股骨缺损的修复是同步的,并且在第112天时均被新生骨组织覆盖.结论 成功构建抗感染的组织工程骨,FG-Vanco-AB在移植的部位可以发挥杀菌作用,并且不会影响组织的重建与修复.
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阿仑膦酸钠对骨小梁结构特性的作用
目的评价阿仑膦酸钠对骨小梁结构特性的作用.方法选取成年雌性Hound犬16只,随机分成两组:实验组8只,口服阿仑膦酸钠,剂量为0.5mg@kg-1@d-1;另选8只作为对照组.12周后处死16只犬并收集其L1和L2标本.直接从三维图像计算腰椎结构参数.结果实验组在服用阿仑膦酸钠后其L1和L2骨小梁体积分数各增加9.5%和7.7%,骨小梁厚度显著增加,但骨小梁间距保持恒定.与对照组相比,实验组骨小梁各向异性下降,骨表面积/体积比率显著降低,而骨表面密度增高.结论口服阿仑膦酸钠,剂量为时0.5mg@kg-1@d-1,短期内治疗能增强犬科骨小梁的结构特性.故阿仑膦酸钠短期内有增强健康骨小梁结构特性的作用.
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丙戊酸钠对儿童癫(癎)患者骨密度和骨代谢的安全性评价
目的 系统评价丙戊酸钠对儿童癫(癎)患者骨密度和骨代谢的安全性.方法 以epilepsy、bone、child等英文词汇计算机检索1980年1月1日-2018年3月1日美国国立医学图书馆生物医学信息检索系统(PubMed)、荷兰医学文摘(EMBASE/SCOPUS)、Cochrane图书馆等数据库收录的关于丙戊酸钠对儿童癫(癎)患者骨密度和骨代谢影响的队列研究,采用Newcastle-Ottawa量表(NOS)和RevMan 5.2统计软件进行文献质量评价和Meta分析.结果 共获得1455篇文献,经剔除重复和不符合纳入标准者,终纳入13项高质量(NOS评分≥6分)临床研究共计683例丙戊酸钠组患儿和436例对照组受试者.Meta分析显示,丙戊酸钠组患儿仅股骨骨密度低于对照组(MD=-0.037,95％CI:-0.069～-0.005;P=0.020),而腰椎骨密度(MD =-0.019,95％CI:-0.044 ～ 0.006;P=0.140)以及血清钙离子(SMD=-0.284,95％CI:-0.951 ～ 0.382;P=0.400)、磷离子(SMD=-0.164,95％CI:-0.457 ～ 0.129;P=0.270)、碱性磷酸酶(SMD=0.363,95％CI:-0.294 ～ 1.020;P=0.280)、甲状旁腺激素(SMD=0.102,95％CI:-0.291 ～ 0.495;P=0.610)、25-羟基维生素D(SMD=-0.104,95％CI:-0.620 ～ 0.413;P=0.690)组间差异均无统计学意义.敏感性分析显示,股骨骨密度、血清磷离子和25-羟基维生素D的Meta分析结果不稳定,解释结果时需谨慎.结论 丙戊酸钠对儿童和青少年癫(癎)患者骨密度和骨代谢的影响较小,但应注意监测股骨骨密度.
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辛伐他汀组织工程骨材料的制备及性能研究
目的:探讨制备的辛伐他汀组织工程骨复合支架材料的理化性质及力学强度.方法:将同种异体骨、Ⅰ型胶原、辛伐他汀进行系列理化处理,制备成单纯组织工程骨材料、胶原组织工程骨材料、辛伐他汀组织工程骨复合材料.制备后的材料用扫描电镜观察其形貌特征,用X线衍射分析材料成分,并对材料的力学性能进行分析测定.结果:单纯组织工程骨材料具有天然骨的网状孔隙系统；胶原组织工程骨材料具有天然骨的网状孔隙系统,微孔表面覆盖胶原膜；辛伐他汀组织工程骨复合材料具有骨组织的天然网状孔隙系统,微孔表面可见胶原膜覆盖；单纯组织工程骨材料、胶原组织工程骨材料、辛伐他汀组织工程骨复合材料主要成分均为羟基磷灰石[HA,Ca10(OH)2(PO4)6],3种材料的孔径大小、空隙率、弯曲强度和压缩强度差异无统计学意义(P＞0.05).结论:辛伐他汀组织工程骨复合材料与其他2种材料理化性质和力学强度相同,可作为一种有效的天然组织工程骨支架材料.
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血清骨钙素ELISA法测定监测甲亢病人骨转换
目的:探讨血清骨钙素水平变化对甲亢病人骨转换监测的意义.方法:应用双位点N-MIDELISA方法测定73例甲亢病人(观察组)和51例正常健康者(对照组)血清骨钙素.结果:观察组血清骨钙素为(5.90±3.07)nrnol/L高于对照组的(1.85±0.48)nmol/L(P＜0.01),并与血清甲状腺激素T3、T4、FT3、FT4水平呈相关性(r=0.40,0.48,0.43,0.43;P＜0.05;n=39).用他巴唑15～30mg/日治疗1个月后,患者血清骨钙素降低29.39%(n=28,P＜0.01),但仍高于正常对照.结论:血清骨钙素是评价甲亢病人骨代谢的敏感指标,可用于甲亢病人骨转换的临床研究和治疗监测.
