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嗅鞘细胞促使脊髓挫裂伤后神经再生和功能恢复的研究
目的:研究嗅鞘细胞在脊髓挫裂损伤后不同时期植入能否帮助轴突再生、穿过瘢痕和神经功能恢复.方法:用NYU打击器制造Log Evans Hooded大鼠的脊髓挫裂损伤模型,在伤后即刻和二周后植入嗅鞘细胞,采用BBB方法做行为学观察三个月,经运动皮层注入神经示踪剂(BDA)后行组织化学研究.结果:部分大鼠嗅鞘细胞植入后比对照组的神经功能恢复好,组织学发现这些神经功能恢复好(BBB分数>10)的大鼠,再生神经轴突能穿过损伤瘢痕区到达损伤下段.结论:嗅鞘细胞在脊髓挫裂损伤后即刻和二周后植入均能帮助轴突再生、穿过瘢痕和神经功能恢复.
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嗅鞘细胞移植治疗脊髓截瘫110例
目的用嗅鞘细胞移植法试治脊髓截瘫,探讨该方法是否有助于脊髓损伤神经功能的恢复.方法取胚胎嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后,培养2～3周,然后将其移植到脊髓损伤部位的上下处.结果嗅鞘细胞移植后6个月、1年和2年随访,75例患者的脊髓功能均有不同程度的改善,且呈现继续改善趋势.结论嗅鞘细胞移植有助于脊髓损伤患者脊髓神经功能的恢复.
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急性脊髓炎后遗截瘫行嗅鞘细胞移植术的临床效果观察
目的开展嗅鞘细胞移植治疗急性脊髓炎的临床试验研究,探讨其对急性脊髓炎脊髓神经功能的改善效果.方法取胚胎嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后,培养2～3周,然后将其移植到脊髓病变部位的上下处.术前和术后2周使用美国脊髓损伤委员会国际评价系统进行疗效评价.结果嗅鞘细胞移植后2周,患者的脊髓功能有改善.运用美国脊髓损伤委员会运动国际评价系统总分评价,病例1由术前50增加到52分,轻触觉总分由64增到76分,痛觉由64增至80分;病例2由术前40分增加到53分,轻触觉总分由38增到48分,痛觉由38增至43分.经0.5年电话随访呈继续改善趋势.结论嗅鞘细胞移植能改善急性脊髓炎患者的脊髓神经功能,长期效果有待进一步评价.
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嗅鞘细胞移植治疗多发性硬化的初步分析附1例报告
目的开展嗅鞘细胞移植治疗脊髓多发性硬化的临床试验研究,探讨其对多发性硬化脊髓神经功能的改善效果.方法取胚胎嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后,培养2周,然后将其移植到脊髓病变部位的上下处.报告1例移植患者:女,33岁,四肢及躯干进行性无力,感觉减退2年.采用上述细胞行脊髓移植.术前和术后4周使用美国脊髓损伤协会国际评价系统进行疗效评价.结果嗅鞘细胞移植后4周,患者的脊髓功能有改善,美国脊髓损伤协会评分运动总分由术前2增加到4分;轻触觉总分由4增到6分;痛觉由21增至24分.经0.5年电话随访呈继续改善趋势.结论嗅鞘细胞移植能改善多发性硬化患者的脊髓神经功能.长期效果有待进一步评价.
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神经营养因子、周围神经及嗅鞘细胞与脊髓再生
神经营养因子是一类由神经元、神经胶质细胞及神经支配靶组织产生的神经营养多肽,是维持神经元生存、促进轴突生长的重要因素.周围神经移植可促进损伤神经元轴突再生,使其成为治疗脊髓损伤及促进脊髓再生研究的候选之一.嗅鞘细胞表现出类似于星形胶质细胞和雪旺细胞的双重特性,可分泌多种神经营养因子,具有促进脊髓损伤后的髓鞘重塑、轴突再生和功能恢复的潜在作用.
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嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤临床试验的初步报告
目的开展嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床试验,探讨其对脊髓损伤晚期患者是否有帮助脊髓神经功能恢复的作用.方法取胚胎嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后,培养2～3周,然后将其移植到脊髓损伤部位的上下处.共治疗23例伤后时间为0.5～8.5年的脊髓损伤患者,其中19例为完全性脊髓损害,4例为不完全性脊髓损害.结果嗅鞘细胞移植后2周～2个月时随访,23例患者的脊髓功能均有改善,且呈继续改善趋势.结论嗅鞘细胞移植能帮助脊髓损伤晚期患者的脊髓神经功能恢复.
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脑源性神经营养因子基因转染嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的观察
目的观察BDNF基因转染的嗅鞘细胞(OECs)对脊髓损伤的修复作用.方法制作大鼠脊髓损伤模型,随机分为无OECs移植组(6只)、非转染OECs移植组(6只)和转染OECs移植组(8只),利用免疫组化、逆行示踪及顺行示踪技术对脊髓横断损伤区及其上位、下位脊髓不同平面进行观察.结果移植后12周在局部注射区仍可以见到预标记的OECs,免疫组化观察到脊髓损伤区有BDNF的表达.逆行示踪法在损伤平面头侧的脊髓、脑干和皮质中观察到示踪剂.顺行示踪法在脊髓损伤区可以见到再生的神经纤维通过.无嗅鞘细胞移植组及非转染嗅鞘细胞移植组损伤平面头侧的脊髓、脑干和皮质中未观察到示踪剂,脊髓损伤区内亦未见有再生神经纤维长入.结论移植BDNF转染的OECs可促进损伤的中枢神经轴突存活和再生,较单纯应用OECs能更好地促进脊髓损伤修复.
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年龄对嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤疗效的影响
为探讨年龄因素对嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤临床疗效的影响,用嗅鞘细胞(OECs)移植到脊髓损伤部位上下处的方法,共治疗171例脊髓损伤0.5～18年的患者.患者年龄2.5～64岁(平均34.9岁),按年龄分为5组:≤20岁9例,21～30岁54例,31～40岁60例,41～50岁34例,≥51岁14例.嗅鞘细胞移植后2～8周随访,根据美国脊髓损伤学会(ASIA)脊髓损伤神经功能分类国际标准评价.结果:171例患者的脊髓功能均有部分恢复,除51岁以上组的痛觉恢复与其他年龄组(除21～30岁组)比较有显著性差异(P＜0.05)外,各年龄组的运动和触觉改善比较均无显著性差异.结果提示:嗅鞘细胞移植能改善所有年龄段脊髓晚期损伤患者的神经功能,除老年组痛觉恢复较好外,年龄因素对运动和触觉的近期效果无明显影响,长期结果有待进一步研究.
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大鼠脑出血模型在细胞移植治疗中枢神经损伤中的应用
脑出血模型自建立至今已有近40年时间,模型制作方法及研究方向均有巨大的变化.目前,大鼠脑出血模型主要用于细胞移植治疗中枢神经损伤方面的研究.胶原酶与自体血注入大鼠尾状核建立的脑出血模型是常用的方法;胶原酶具有制作方法简单的特点,自体血模型的特点是其更接近临床过程.脑出血模型制作成功后可以从大鼠行为学和组织学变化两方面来评价细胞移植治疗大鼠脑出血的疗效.脑出血模型无论从疾病的发生率和严重性来讲,还是该模型的稳定性及重复性角度来讲,都是细胞移植治疗中枢神经损伤的重要动物模型.
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嗅鞘细胞移植术治疗陈旧性脊髓损伤术后常见并发症的防治
目的 探讨嗅鞘细胞移植术术后常见并发症的防治.方法 采用回顾性调查方法对在我院自2004年6月--2006年12月接受嗅鞘细胞移植术的患者106例术后发生脑眷液漏等并发症进行治疗分析.结果 术后并发症24例全部治愈,无引起中枢神经系统感染及脊髓损伤情况加重的病例,术后好转出院.结论 嗅鞘细胞移植术治疗陈旧性脊髓损伤虽有一定疗效,但也存在一定的风险,术后并发症容易造成中枢神经感染,如果处理不及时,对病人可能会造成严重的后果.一定要做到早预防,早治疗.
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腺苷钴胺对嗅鞘细胞治疗脑性瘫痪近期效果的影响
目的 前瞻性随机对照研究腺苷钴胺时嗅鞘细胞移植近期疗效的影响.方法 2007年1月～2008年7月间,18例脑性瘫痪患者随机分为2组(A组为腺苷钴胺+嗅鞘细胞组,B组为单独嗅鞘细胞组),每组9人.两组性别、年龄、诊断分型、病程、智力情况、初始神经功能等分布无显著性差异.对嗅鞘细胞脑内移植术前术后患者的粗大运动功能评分(GMFM一66)、脑瘫调查问卷评分(caregiver questionnaire)及脑瘫日常生活活动能力(ADL)进行评价,其中GMFM-66和ADL分数越高代表功能状态越好、caregiver questionnaire分数越低越好.结果 GMFM-66评分A组增加3.0±2.0分,B组增加2.0±2.0分(t=0.935,p =0.368),caregiver questionnaire评分A组降低3.7±5.0分,B组降低2.0±2.8分(t=0.795,p=0.442),ADL评分A组增加0.9±0.9分,B组增加0.4±0.7分(t=1.098,p:0.294).结论 对于脑性瘫痪的治疗,腺苷钴胺似能提高嗅鞘细胞移植治疗的近期临床效果,但因病例数尚少,统计学上未显示出差异的显著性,有待增加样本量,并对中长期效果探讨.
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NTFs基因修饰的人胚OECs植入促进大鼠SCI神经再生及功能恢复的研究
目的 探讨神经营养因子(NTF)基因修饰嗅鞘细胞(OECs)移植促进大鼠脊髓损伤后神经再生及功能恢复. 方法 SD大鼠制备成脊髓损伤动物模型.随机分为损伤对照组(A组)、OECs移植组(B组)和OECs神经营养因子基因修饰后移植组(C组).治疗后2、4、6周,每组动物分别进行联合行为评分(GBS)、运动诱发电位(MEP)、感觉诱发电位(SEP)检查、双下肢功能测定(爬坡试验),评价脊髓损伤功能恢复情况. 结果 随时间的延长,B组GBS、MEP、SEP及下肢功能明显改善.与其它组相比较,差异有显著性,P<0.05. 结论 NTF基因修饰后移植在脊髓损伤区,能促进神经再生及功能恢复.
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脊髓肿瘤全切联合嗅鞘细胞移植神经修复2例
1病例资料例1:卫××,女,29岁,因胸以下运动感觉障碍14年于2007年10月12日入院.患者于1993年出现双下肢乏力.1997年3月可站立,行走缓慢,不能跑步,在某省人民医院MRI检查诊断为"胸3、4脊膜瘤",4月行"肿瘤切除术",术后症状加重.入院时坐位平衡性差,胸以下感觉障碍,双下肢不能活动,大小便无感觉,不能控制.
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嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的现状及移植途径
脊髓损伤是常见的神经系统创伤性疾病，是医学界研究的热点难题之一。随着车祸、高空坠落等高能量损伤的日益增多，其发病率和致残率呈逐年增高的趋势。本文通过对嗅鞘细胞和脊髓损伤的基础、临床研究及相关文献回顾，就嗅鞘细胞的特点、治疗脊髓损伤的研究现状和移植途径作一综述。
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嗅鞘细胞联合神经干细胞对大鼠急性脊髓损伤及神经营养素-3表达的影响
目的：观察嗅鞘细胞（OECs）联合神经干细胞（NSCs）对大鼠急性脊髓损伤及神经营养素-3（NT-3）表达的影响。方法：SD大鼠80只，Allen’s法行急性脊髓损伤造模后，将大鼠按随机数字表法分为对照组（假手术组）、实验1组（NSCs移植组）、实验2组（OECs移植组）和实验3组（NSCs+OECs联合移植组）。局部注射法进行细胞移植。于术前和术后1、3、5、7、14、21、28 d，采用BBB评分法、改良的Tralov评分法和斜板实验，对大鼠后肢运动功能状况进行评分，进行运动诱发电位（MEP N1波）潜伏期的检测。后，各组随机抽取一只大鼠进行灌注、取材与固定，免疫组织化学染色的方法观察各组NT-3在局部受损脊髓组织中的表达情况。结果：（1）造模及细胞移植术后，24 h时内各组大鼠BBB评分及改良的Tralov评分均为0分；斜板实验角度下降非常明显，由实验前（82.00±3.45）°降为（12.73±1.34）°，差异有统计学意义（P<0.05）；各组MEP（N1波）潜伏期明显延长。（2）随着实验的进行，各组均表现出不同程度的恢复情况：各实验组BBB评分及改良的Tralov评分与对照组比较增高显著（P<0.05）；1周后各组各时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05），且各实验组两两比较差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）斜板实验角度也逐渐增加，1周后，实验组增幅大于对照组（P<0.05）；1周后各组各时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05），且各实验组两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。（4）各组MEP（N1波）潜伏期均逐渐缩短，3 d后，各实验组潜伏期缩短幅度均大于对照组（P<0.05）；3 d后各组各时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05），且各实验组两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。（5）各组大鼠受损脊髓组织中NT-3均有明显增高，7 d内维持在较高的水平，此后逐渐减少。其中从第5天开始，各实验组与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）；各组各时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05），且各实验组两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：（1）细胞移植治疗大鼠急性脊髓损伤时，单种细胞单独移植，OECs的治疗修复效果要强于NSCs的治疗修复效果，OECs与NSCs联合移植取得的治疗修复效果好。（2）NT-3在OECs与NSCs细胞联合移植组中表达高。
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嗅鞘细胞联合神经干细胞对大鼠急性脊髓损伤及脑源性神经营养因子表达的影响
目的：探讨嗅鞘细胞（OECs）联合神经干细胞（NSCs）对大鼠急性脊髓损伤及脑源性神经营养因子（Brain Derived Neurotrophic Factor，BDNF）表达的影响。方法：取新生3 d SD大鼠的海马和嗅球制备神经干细胞和嗅鞘细胞，对80只SD大鼠做急性脊髓损伤造模，随机分为对照组（假手术组）、NSCs移植组、OECs移植组、NSCs+OECs联合移植组（记为实验A、B、C组），细胞移植。于术前，术后1、3、7、14、21 d行BBB评分、斜板实验和运动诱发电位（MEP N1波）潜伏期检测，在各组随机抽一只SD大鼠做免疫组化，观察比较受损脊髓中BDNF的表达情况。结果：（1）BBB评分变化：除第1天外，各实验组恢复程度均明显大于对照组（P<0.05），第7天开始各实验组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）斜板试验角度变化：第1周开始，四组中任意两组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）MEP（N1波）潜伏期变化：自第3天，四组中任意两组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。（4）BDNF染色阳性细胞数变化：细胞移植后，各组大鼠受损脊髓中BDNF开始升高，第3天到高峰后减少。术后第3天开始，四组中任意两组比较均有统计学意义（P<0.05）。结论：采用细胞移植治疗大鼠急性脊髓损伤，OECs与NSCs联合移植治疗效果佳；单细胞移植时，OECs比NSCs移植治疗效果更强。联合移植组中BDNF表达高。
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多种细胞移植联合环腺苷酸和软骨素酶治疗大鼠脊髓损伤实验研究
目的 进行试验分析和研究多种细胞移植联合环腺苷酸和软骨素酶治疗大鼠脊髓损伤.方法 对60 例大鼠进行脊髓损伤模型,随机分成4 组,对其行运动功能评定、免疫荧光染色.结果 多种细胞移植联合环腺苷酸和软骨素酶组的坏死总面积和大横径均小于其他3 组.结论 多种细胞移植联合环腺苷酸和软骨素酶治疗大鼠脊髓损伤可以获得显著疗效.
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神经营养因子-3基因修饰的嗅鞘细胞移植治疗自身免疫性脑脊髓炎的实验研究
目的 研究神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的髓鞘及轴突的修复作用.方法 用逆转录病毒介导神经营养因子-3(NT-3)基因转染嗅鞘细胞(OEC),将其移植入EAE侧脑室,荧光标记后观察其在体内的迁徙、分布特点;运用皮质体感诱发电位监测(CSEP)、超微结构观察、功能评分;RT-PCR方法检测NT-3mRNA转录水平,并与对照组、OEC移植组相比较等方法对髓鞘及轴突修复进行评价.结果 (1)OEC-NT-3在EAE体内存活,可广泛迁徙至病灶远端且至少可以持续存活4周.(2)超微结构发现转基因治疗组4周后,轴索结构完整,周围髓鞘板层结构清楚,明显优于另外二组.(3)4周后,转基因组CSEP潜伏期明显缩短,波幅增加,明显优于其他二组,差异有统计学意义(P<0.05).(4)转基因组NT-3mRNA转录水平为(212.32±16.14)×10-2,明显高于OEC组(1.23±0.13)×10-2及对照组(1.98±0.19)×10-2,差异有统计学意义(P<0.01).结论 NT-3基因修饰的OEC在持续表达神经营养因子,且可促进EAE的神经修复.
