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牡丹皮中丹皮酚的抗焦虑作用
目的:探讨中药牡丹皮抗焦虑作用物质基础.方法:80只成年雄性昆明种小鼠随机分为空白组(Control),阳性药组(地西泮,BZ,1 mg·kg-1),牡丹皮水蒸气蒸馏馏分低、中、高剂量组(Px,50,100,200 mg· kg-1),牡丹皮蒸馏剩余药渣水提物低、中、高剂量组(Wx,100,200,400 mg· kg-1);实验依次进行自由探索模型实验(FEP)、旷场实验(OFT)、高架十字迷宫实验(EPM)、高架○迷宫实验(EZM)和明暗箱实验(LDB);FEP实验参数包括陌生区时间百分率(Ntime％)、陌生区水平运动百分率(Ncross％)、陌生区垂直运动百分率(Nrear％)、总水平运动(Cross)和总垂直运动(Rear);OFT实验参数包括中央区时间百分率(Ctime％)、中央区水平运动百分率(Ccross％)、总水平运动(Cross)和总垂直运动(Rear);EPM和EZM实验参数包括开臂时间百分率(Otime％)、开臂进入次数百分率(Oentries％)和两臂总进入次数(Entries);LDB实验参数包括明区停留时间百分率(Ltime％)、明区水平运动百分率(Lcross％)、明区垂直运动百分率(Lrear％)、穿梭次数(Transition)、总水平运动(Cross)和总垂直运动(Rear).结果:与Control组比较,BZ及Px低、中、高剂量可显著增加FEP_Ntime％,FEP_Ncross％,FEP_Nrear％,OFT_Ctime％,OFT_ Ccross％,EPM_Otime％,EPM_Oentries％,EZM_Otime％,EZM_Oentries％,LDB_ Ltime％,LDB_Lcross％,LDB_Lrear％(P＜0.05);Wx仅高剂量可显著增加OFT_Ccross％,EZM_Otime％,LDB_Lrear(P＜0.05);BZ及Px,Wx低、中、高剂量对FEP_Cross,FEP_Rear,OFT_Cross,OFT_Rear,EPM/EZM_Entries,LDB_Transition,LDB_Cross,LDB_Rear实验参数影响均无统计学差异.结论:牡丹皮抗焦虑作用有效部位是水蒸气蒸馏馏分(Px),即丹皮酚类成分,其可能的作用靶点是γ-氨基丁酸A受体(GABAAR).
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昆明小鼠焦虑与抑郁动物模型相关性研究:明暗箱实验与悬尾实验
目的 探讨明暗箱实验(light/dark box,LDB)和悬尾实验(tail suspension test,TST)作为动物模型评价昆明小鼠焦虑与抑郁情绪的相关性.方法 成年♂昆明小鼠先后放入明暗穿梭箱和悬尾箱,摄像系统分别记录5 min和6 min内的行为变化,实验间隔1周,实验参数如下:LDB首次由明区进入暗区潜伏期(LDB_Latence)、明区停留时间百分率(LDB_Ltime%)、明区水平运动百分率(LDB_Lcross%)、明区垂直运动百分率(LDB_Lrear%),TST首次出现不动状态潜伏期(TST_Latence)、不动状态百分率(TST_Immobility%);采用因子分析、聚类分析、相关分析、一致性检验和生存分析等多种统计方法进行数据处理.结果 ①因子分析和聚类分析提示,LDB参数反映焦虑情绪,TST参数反映抑郁情绪.②相关分析提示,LDB与TST参数组内具有较好相关性,而组间相关性较差;ICC和Kappa统计参数提示,LDB与TST评价焦虑与抑郁情绪一致性较差.③生存分析提示,LDB与TST半数生存期差异无统计学意义.结论 LDB与TST相关参数各自独立反映了焦虑与抑郁情绪,但两者评价结果的相关性和一致性较差;在解决"特质焦虑与状态焦虑动物模型相关性"及"焦虑与抑郁动物模型相关性"科学问题时,可以考虑建立新型动物模型及综合评价方法或者筛选特质种属实验动物;而在进行药物效应评价时,可以考虑将多种动物模型联合组成"行为组学",根据不同结构维度进行"模式识别"评价.
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昆明小鼠状态焦虑动物模型明暗箱实验的结构维度分析
目的 探讨明暗箱实验(Light-Dark Box,LDB)作为昆明小鼠状态焦虑动物模型的结构维度及测量有效性.方法 成年雄性昆明小鼠放入明暗箱,摄像系统记录5 min的行为变化,实验间隔1周进行2次;采用因子分析进行分析评价,实验参数如下:暗区潜伏期(Latence)、明区停留时间百分率(Ltime%)、明区水平运动百分率(Lcross%)、明区垂直运动百分率(Lrear%)、穿梭次数(Transition)、总水平运动(Cross)、总垂直运动(Rear)和粪便粒数(FB).结果 Ltime%、Lcross%、Lrear%以及Transition、Cross、Rear初测重测组内相关性均较好;Transition、Rear、FB初测重测相关性亦较好.LDB所有参数初测重测均可提取出四个公因子:Ltime%、Lcross、Lrear对焦虑因子贡献大(Loading%:39.54%、35.40%),Transition、Cross对运动因子贡献大(Loading%:23.78%、19.66%),Rear对探索因子贡献大(Loading%:13.75%、22.60%),FB对情绪凶子贡献大(Loading%:14.42%、13.02%),而Latence参数初测重测因子贡献不稳定.结论 LDB作为昆明小鼠状态焦虑动物模型具有稳定的三维结构:焦虑因子维度、LDB活性因子维度(运动因子+探索因子)和情绪因子维度.
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昆明小鼠状态焦虑动物模型明暗箱实验的重测信度及参数相关性
目的 探讨明暗箱穿梭试验(LDB)作为小鼠状态焦虑动物模型评价方法的重测信度及其参数相关性.方法 成年雄性昆明小鼠放入明暗穿梭箱,摄像系统记录5 min的行为变化,试验间隔1周进行2次;通过组内相关系数(ICC)、Kappa一致系数(Kappa)和Pearson相关系数(Pearson)进行统计分析,实验参数如下:首次进入暗箱潜伏期、明区停留时间百分率、明区水平运动百分率、总水平运动得分、明区垂直运动百分率、总垂直运动得分、总得分、穿梭次数及粪便粒数.结果 ①ICC结果表明,仅总垂直运动得分(ICC=0.5207,P＜0.01)显示LDB重测信度尚可接受,穿梭次数参数亦可考虑(ICC=0.4731,P＜0.05),而其他参数均显示LDB重测信度较差.②Kappa结果表明,所有参数均显示LDB重测信度较差,其中总垂直运动得分参数尚可考虑(Kappa=0.4286,P＜0.01).③Pearson结果表明,穿梭次数与明区停留时间百分率(Pearson=-0.4030,P＜0.05;Pearson=-0.1490,P＞0.05)、明区水平运动百分率(Pearson=-0.4331,P＞0.05;Pearson=-0.1893,P＞0.05)、明区垂直运动百分率(Pearson=-0.4485,P＜0.05;Pearson=0.02845,P＞0.05)初测重测几乎均呈弱负相关,与总水平运动得分(Pearson=0.8603,P＜0.01;Pearson=0.6341,P＜0.01)、总垂直运动得分(Pearson=0.4271,P＞0.05;Pearson=0.7245,P＜0.001)初测重测呈较好正相关.结论 总垂直运动得分可以作为昆明小鼠LDB的一个稳定参数,具有较好的重测信度;穿梭次数与明区停留时间百分率、明区水平运动百分率、明区垂直运动百分率初测重测呈弱负相关,与总水平运动得分、总垂直运动得分初测重测呈较好正相关.
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昆明小鼠状态焦虑动物模型结构维度相关性研究
目的 探讨旷场实验(open field test,OFT)和明暗箱实验(light-dark box,LDB)作为昆明小鼠状态焦虑动物模型的相关性.方法 20只成年雄性昆明小鼠先后放入旷场敞箱和明暗穿梭箱,摄像系统记录5 min的行为变化,实验间隔1周,实验参数如下:OFT中央区停留时间百分率(OFT-Ctime％)、中央区水平运动百分率( OFT-Ccross％)、总水平运动得分(OFT-Cross)、总垂直运动得分(OFT-Rear)和粪便粒数得分(OFT-FB),LDB明区停留时间百分率(LDB-Ltime％)、明区水平运动百分率(LDB-Lcross％)、明区垂直运动百分率(LDB-Lrear％)、穿梭次数得分(LDB-Transition)、总水平运动得分(LDB-Cross)、总垂直运动得分(LDB-Rear)和粪便粒数得分(LDB-FB)；采用因子分析、聚类分析和相关分析统计方法进行数据处理.结果 ①因子分析和聚类分析提示,OFT/LDB独立评价时具有相似3维结构:OFT/LDB焦虑因子、OFT/LDB活性因子和OFT/LDB情绪因子；OFT-LDB合并评价时则为五维结构:LDB焦虑因子、OFT焦虑因子、LDB活性因子、OFT-LDB情绪因子和OFT活性因子.②相关分析提示,OFT情绪因子与LDB情绪因子具有较好相关性(Pearson=0.383,P＜0.05)；LDB焦虑因子与LDB焦虑因子(Pearson=0.989,P＜0.01),OFT焦虑因子与OFT焦虑因子(Pearson=0.934,P＜0.01),LDB焦虑因子与LDB焦虑因子(Pearson=0.956,P＜0.01),OFT/LDB情绪因子与OFT-LDB情绪因子(Pearson=0.835,P＜0.01；Pearson =0.696,P＜0.01),OFT活性因子与OFT活性因子(Pearson=0.926,P＜0.01)具有较好相关性.结论 OFT/LDB独立评价时具有相似三维结构,而OFT-LDB合并评价时则为5维结构:仅OFT/LDB情绪因子可以合并.因此,在以“行为组学”联合评价时,各维度并非一一对应,应注意动物模型异质性问题.
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槐米中槲皮素对焦虑模型小鼠的保护作用研究
目的:研究槐米中槲皮素对焦虑模型小鼠的保护作用.方法:以不确定刺激复制小鼠焦虑模型.小鼠跳台实验分为空白对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、地西泮(10 mg/kg)组与槲皮素高、低剂量(60、15 mg/kg)组,灌胃给药,每天1次,在给药第6天进行跳台训练实验,第7天为正式测试实验.小鼠明暗箱实验分为空白对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、地西泮(10 mg/kg)组与槲皮素高、低剂量(60、15 mg/kg)组,灌胃给药,每天1次,末次给药后进行明暗箱实验.以高效液相-荧光检测法测定小鼠脑内γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、5-羟色胺(5-HT)的含量.结果:与模型组比较,槲皮素高剂量组小鼠穿箱次数显著增加(P＜0.05)；槲皮素高、低剂量组小鼠测试期错误反应次数显著减少(P＜0.01),小鼠脑内GABA、Glu含量显著增加(P＜0.01).结论:槲皮素具有明显的抗焦虑作用,其机制与提高小鼠脑内GABA、GLu含量有关.
