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潜阳育阴颗粒对正常麻醉犬肾脏微循环的影响及其机制
目的:观察潜阳育阴颗粒(Qianyang Yuyin granules,QYG)对正常麻醉犬肾脏微循环影响,并初步研究其作用机制.方法:应用PowerLab系统记录十二指肠给予潜阳育阴颗粒前和给药后15 ～ 180 min不同时段比格犬肾脏微循环变化;犬分为正常组,QYG高、中、低剂量组(12.30,6.15,3.08 g·kg-1),卡托普利组(30 mg·kg-1)和珍菊降压片组(0.14 g·kg-1),于给药前及给药后15,30,60,90,120,180 min通过股动脉取血,ELISA法检测血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量,化学法检测一氧化氮(NO)含量;给药3h后取肾脏组织,ELISA法检测肾脏AngⅡ含量.结果:潜阳育阴颗粒12.30 g·kg-1剂量组给药后60 ～ 180 min正常麻醉犬的肾动脉微循环血流量明显上升(P＜0.05),给药180 min后肾脏组织AngⅡ含量明显下降(P＜0.05),给药90,120,180 min后,血清中AngⅡ明显下降(P＜0.05),eNOS和NO含量明显上升(P＜0.05);潜阳育阴颗粒6.15 g·kg-1剂量组给药后90 ～ 120 min内正常麻醉犬的肾动脉微循环血流量明显上升(P＜0.05),给药90,120 min后,血清中AngⅡ明显下降(P＜0.05),eNOS和NO含量明显上升(P＜0.05);潜阳育阴颗粒低剂量组给药后180min内正常麻醉犬各项指标变化不明显.结论:潜阳育阴颗粒可改善肾脏微循环,其作用机制可能与降低循环及肾脏组织AngⅡ的含量,增加循环中eNOS及NO含量有关.
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潜阳育阴颗粒对自发性高血压大鼠肾脏氧化应激及炎症因子的影响
目的:研究潜阳育阴颗粒对自发性高血压大鼠肾脏氧化应激及炎症因子的影响,并探讨其改善自发性高血压的作用机制.方法:自发性高血压大鼠,随机分为模型组、潜阳育阴颗粒组、贝那普利组及潜阳育阴颗粒+贝那普利组,分别给予潜阳育阴颗粒混悬液(5 g·kg-1),贝那普利混悬液(1.67 mg·kg-1),潜阳育阴颗粒混悬液(5g·kg-1)+贝那普利混悬液(1.67 mg·kg-1)ig,另设正常血压(WKY)大鼠为正常组,连续给等容量药8周后处死大鼠收集肾脏组织.观察大鼠血压、微量白蛋白和肌酐的变化,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测肾脏局部NADPH氧化酶-4(NOX4)的水平,核转录因子-κB(NF-κB) p65及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达量的变化,并观察潜阳育阴颗粒对这些指标释放量的影响.结果:与正常组比较,模型组大鼠血压、微量白蛋白和肌肝明显升高,肾脏组织NOX4,NF-κB,TNF-α和IL-6蛋白表达明显升高(P＜0.01);潜阳育阴颗粒能抑制模型组肾脏NOX4的表达,降低NF-κB p65,TNF-α,IL-6蛋白表达量,降低血压、微量白蛋白和肌肝的含量(P＜0.01),而潜阳育阴颗粒和贝纳普利两药协同的效果更加明显(P＜0.05).结论:潜阳育阴颗粒改善自发性高血压大鼠肾损害机制可能与抑制氧化应激进而减少炎症因子释放相关.
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正交试验法优选潜阳育阴颗粒水提醇沉工艺
目的：优选潜阳育阴颗粒的水提醇沉工艺。方法以二苯乙烯苷含量和干膏率的综合评分为指标，采用正交试验法，考察加水量、提取次数、提取时间对水提工艺的影响，考察水提液相对密度、醇沉浓度、静置时间对醇沉工艺的影响。结果优选的水提工艺为：加12倍量水，提取2次，每次1 h；优选的醇沉工艺为：水提液浓缩至相对密度1.10（60℃），醇沉浓度60%，静置48 h。结论优选的工艺稳定可行，可用于该制剂的工业化生产。
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基于二维斑点追踪成像技术定量评价潜阳育阴颗粒改善高血压左室功能早期损害的临床研究
目的 基于二维斑点追踪成像技术(2D-STI)定量评价潜阳育阴颗粒改善高血压左室收缩功能早期损害的临床价值.方法 根据纳入标准纳入试验组32例与对照组25例.两组病人均使用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素Ⅱ受体阻断剂(ARB)作为西医基础治疗,必要时加用钙通道阻断药(CCB),使血压控制达标.试验组在此基础上口服潜阳育阴颗粒,两组均观察6个月.试验组及对照组分别完成半年随访25例及14例.治疗前后均使用常规超声心动图及2D-STI技术评估病人左室整体及局部纵向收缩功能,并对病人血压、心率及中医证候积分等临床指标进行评估.疗程结束后进行统计学处理.结果 ①2D-STI应变参数,试验组治疗后左室纵向总应变(GLS-Avg)及左室主要切面纵向应变(GLS-LAX、GLS-A2C、GLS-A4C)均明显改善(P＜0.01),对照组治疗前后均无统计学意义(P＞0.05).17个心肌节段中,对照组治疗后有1个节段的纵面应变(LS)治疗前后差异有统计学意义(P＜0.05),试验组治疗后有7个节段的LS治疗前后差异有统计学意义(P＜0.01).②常规超声心动图检测指标左室射血分数(LVEF)、舒张早期峰值血流速度/舒张晚期峰值血流速度(E/A)、平均E/e'、左室舒张末期内径(LVIDd)、左心室重量指数(LVMI)、舒张期室间隔厚度(IVSd)、左室后壁厚度(LVPWd),两组治疗前后组内比较差异均无统计学意义(P＞0.05).③血压及心率,试验组治疗后收缩压、舒张压及心率均降低(P＜0.01),对照组治疗后收缩压、舒张压降低(P＜0.05).收缩压、舒张压及心率方面改善组间差值比较无统计学意义(P＞0.01).④中医证候,试验组治疗后中医证候总积分明显减少(P＜0.01),对照组治疗后中医证候总积分有减少趋势(P＞0.05).结论 潜阳育阴颗粒在降压达标的基础上,可以进一步改善左室纵向收缩功能,缓解高血压阴虚阳亢证病人临床症状,以达到防治高血压心脏损害的目的.
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潜阳育阴颗粒对SHR大鼠肾脏CTGF的影响
目的:研究潜阳育阴颗粒对高血压肾病的治疗作用与机制.方法:随机将32只12周龄雄性SHR大鼠等分为4组:模型组(SHR)、潜阳育阴组(SHR +Q)、贝那普利组(SHR +B)、及潜阳育阴+贝那普利组(SHR+Q+B).另取8只年龄、性别配对的WKY大鼠为正常组.SHR+Q、SHR+B及SHR+Q+B组分别以潜阳育阴混悬液5 g/(kg·d)、贝那普利混悬液1.67 mg/(kg·d)及潜阳育阴混悬液5g/(kg· d)+贝那普利混悬液1.67mg/(kg·d)灌胃.正常组及模型组不给药,予等量蒸馏水灌胃,五组均正常饮食.灌胃周期共8周.实验前及实验后均采用无创伤性尾静脉测压法测量大鼠血压.实验8周后,用大鼠代谢笼按组分别装大鼠,接取各组大鼠24 h的尿液,采用全自动生化仪和放免法检测大鼠尿m-ALB及尿NAG含量;HE染色观测肾脏病变;Masson染色观察肾组织纤维化;Elisa法检测肾组织Pro、Ald、AngⅡ含量;Western Blot法检测肾组织ACE、AT1R、CTGF蛋白表达.结果:SHR组血压显著增加,尿液中m-ALB、NAG浓度增高,潜阳育阴颗粒可以降低血压与m-ALB、NAG.模型组出现AngⅡ、AT1R、CTGF活性的上调,而潜阳育阴颗粒对其有抑制作用.结论:潜阳育阴药物对高血压肾病有治疗作用,减轻高血压肾病过程中的纤维化,推测其治疗高血压肾脏病可能与其干预CTGF通路有关.
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潜阳育阴颗粒含药血清对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞损伤NADPH氧化酶、AKT、TNF-α、IL-6的影响
目的 研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、山茱萸、何首乌、玄参、川牛膝和泽泻)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞损伤NADPH氧化酶、蛋白激酶(AKT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的影响.方法 SD大鼠随机分为正常组、缬沙坦组、潜阳育阴颗粒组,制备含药血清.人脐静脉内皮细胞分为5组,除正常组外,其余组均采用10-6mol/L AngⅡ干预建立人脐静脉内皮细胞损伤模型.造模后,分别给与空白血清培养液、缬沙坦血清培养液、潜阳育阴颗粒血清培养液.TBA法检测MDA水平;ELISA法检测NADPH氧化酶、TNF-α、IL-6水平;We stern-Blot检测磷酸化AKT1与AKT1蛋白表达.结果 潜阳育阴颗粒显著降低AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞损伤后NADPH氧化酶的活性水平,降低p-AKT1蛋白表达,降低TNF-α、IL-6的释放.结论 潜阳育阴颗粒可以抑制AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞损伤后的炎症反应,推测其机制与抑制NADPH氧化酶、AKT、TNF-α、和IL-6有关.
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潜阳育阴颗粒含药血清对Ang Ⅱ诱导HUVEC损伤NO的影响
目的 探讨潜阳育阴颗粒(鬼针草、川牛膝、山萸肉、玄参、制首乌、泽泻)含药血清对血管内皮损伤的作用.方法 建立Ang Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡损伤模型,采用TBA法检测NO水平,Western blot法检测eNOS及iNOS蛋白表达,ELISA法检测NADPH氧化酶水平,用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析.结果 模型组NO及eNOS蛋白表达较正常组降低,NADPH氧化酶则明显升高;缬沙坦组及潜阳育阴颗粒高剂量组NO明显升高,且两者之间有统计学组差异,而潜阳育阴颗粒低剂量组则无显著性差异;缬沙坦组及潜阳育阴颗粒的eNOS蛋白表达显著升高,NADPH氧化酶水平明显下降;各组iNOS表达差异不明显.结论 潜阳育阴含药血清对AngⅡ诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞损伤具有类似缬沙坦样的保护作用.
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潜阳育阴颗粒含药血清对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达的影响
目的 研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、何首乌、山茱萸、玄参、泽泻、川牛膝)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达水平的影响.方法 将SD大鼠随机分为正常组、缬沙坦组、潜阳育阴颗粒组,每组4只,灌胃给药,制备含药血清.人脐静脉内皮细胞分为5组,每组3个样本.除正常组外,其余组均采用10-6 mol/L AngⅡ诱导处于对数生长期的人脐静脉内皮细胞建立细胞凋亡损伤模型.造模后,分别给予相应含药血清DMEM培养液干预:正常组(16％空白血清培养液)、模型组(16％空白血清培养液)、缬沙坦组(16％缬沙坦血清培养液)、潜阳育阴颗粒低剂量组(8％潜阳育阴颗粒血清培养液+8％空白血清培养液)、潜阳育阴颗粒高剂量组(16％潜阳育阴颗粒血清培养液).采用流式细胞术检测人脐静脉内皮细胞凋亡率,Western Blot检测fas/fasL蛋白表达.结果 与正常组比,模型组人脐静脉内皮细胞凋亡率及fas、fasL蛋白表达明显升高；与模型组比,缬沙坦组和潜阳育阴颗粒组均可显著降低人脐静脉内皮细胞凋亡率及fas、fasL蛋白表达.结论 潜阳育阴颗粒可以拮抗AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡效应,其机制可能与调节fas和fasL蛋白表达有关.
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潜阳育阴颗粒对正常麻醉犬肾动脉血流量及血压的影响
目的：观察潜阳育阴颗粒对正常麻醉犬肾动脉血流量及血压的影响，初步探讨其治疗高血压肾损害的作用机制。方法应用PowerLab系统记录给予潜阳育阴颗粒低、中、高剂量（3．08、6．15、12．30 g／kg）后0～180 min内不同时段比格犬肾动脉血流量、心输出量和血压的变化。结果潜阳育阴颗粒高剂量组给药后120、180 min动脉收缩压（SBP）显著降低（P＜0．05），给药后90、120、180 min，肾血流量显著升高（P＜0．05）；潜阳育阴颗粒中剂量组给药后120 min，SBP明显下降（P＜0．05），给药后90、120 min，肾血流量明显升高（P＜0．05）；低剂量组给药后180 min内各项指标变化不明显。潜阳育阴颗粒3个剂量组心输出量（CO）均未见明显变化。结论潜阳育阴颗粒主要通过增加肾动脉血流量，保护肾功能，从而降低血压。
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潜阳育阴颗粒对自发性高血压大鼠AngⅡ及TNF-α的影响
目的 研究潜阳育阴颗粒对SHR血液及肾脏AngⅡ含量及肾脏TNF-α表达的影响.方法 40只14周龄雄性SHR随机分为模型组(等量蒸馏水)、缬沙坦组(0.027 g/kg/d)、潜阳育阴颗粒低、中、高剂量组(2.5 g/kg/d、5 g/kg/d、10 g/kg/d),每组8只；8只同周龄雄性Wister大鼠为正常组(等量蒸馏水).灌胃给药,每日1次,连续6周.末次给药1h后,取大鼠血清及肾脏.无创性尾动脉测压法检测动脉压,全自动生化仪和放免法检测尿m-ALB、尿β 2-MG、尿NAG,ELISA法检测血液和肾脏AngⅡ,免疫组织化学法观察肾脏TNF-α表达.结果 潜阳育阴颗粒可以降低SHR动脉压、尿m-ALB、尿NAG;SHR血液及肾脏中AngⅡ含量较Wister明显升高,潜阳育阴颗粒显著降低SHR血液及肾脏AngⅡ含量；SHR肾脏TNF-α表达较Wister明显增多,潜阳育阴颗粒显著降低TNF-α的表达.结论 潜阳育阴颗粒对高血压及其早期肾脏损害具有一定的防治作用,可能与其降低AngⅡ含量及TNF-α表达有关.
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潜阳育阴颗粒对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾系膜细胞增殖的影响
目的 探讨潜阳育阴颗粒对人肾系膜细胞增殖的影响进而寻求其治疗高血压肾损害的机制.方法 采用血管紧张素Ⅱ诱导人肾系膜细胞增殖造模,MTT法研究潜阳育阴颗粒不同浓度对细胞增殖的影响,并计算抑制率.结果 潜阳育阴颗粒在一定浓度下均能抑制细胞增殖.结论 潜阳育阴颗粒对人肾系膜细胞增殖有明显的抑制作用,为其在治疗高血压肾损害中的作用提供了理论依据.
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潜阳育阴颗粒对老年高血压患者血压变异性的影响
目的 运用24小时动态血压监测技术,研究潜阳育阴颗粒对老年阴虚阳亢型高血压患者血压变异性及昼夜节律的影响.方法 老年高血压证属阴虚阳亢型患者40例,随机分为治疗组及对照组各20例.基础的西药治疗基础上治疗组再给予潜阳育阴颗粒,疗程均为8周.给药前后分别进行24h动态血压监测,统计分析两组治疗前后血压均值以及变异性的改变.结果 治疗组各时段dSBP和dDBP均显著低于对照组(P＜0.05或者P＜0.01).治疗组各时段血压变异性均系数显著低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 潜阳育阴颗粒干预老年阴虚阳亢型高血压患者,可辅助降低血压的同时,改善血压变异性,达到高质量降压的目的.
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潜阳育阴颗粒治疗高血压病(阴虚阳亢证)的临床研究
目的 观察潜阳育阴颗粒治疗高血压病(阴虚阳亢)患者的临床疗效.方法 120例高血压阴虚阳亢证患者,随机分为治疗和对照组60例,均予依那普利和(或)非洛地平治疗,治疗组加用潜阳育阴颗粒,疗程及随访均为8周.检测治疗前后24h平均动脉压、血压变异性、中医证候积分等指标.结果 治疗后两组平均动脉压、血压变异性、中医证候积分较治疗前不同程度降低或保持,而对于收缩压的相关指标治疗组较对照组下降更明显(P＜0.05).结论 潜阳育阴颗粒对患者血压可能有一定的影响,可明显改善阴虚阳亢证患者的临床症状.
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潜阳育阴颗粒定性定量研究
目的:建立潜阳育阴颗粒的质量控制方法.方法:以对照药材作为对照,通过薄层色谱法定性鉴别制剂中制何首乌、鬼针草、川牛膝、酒萸肉,用高效液相色谱法测定制剂中制何首乌中二苯乙烯苷的含量.结果:观察发现,在各定性鉴别的薄层色谱中,所鉴别药材的薄层色谱具有明显的特异性,在与对照药材相应的位置上,斑点颜色相同,阴性无干扰.二苯乙烯苷进样浓度在1.3984～179.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率98.48％,RSD为1.04％(n=6).结论:可使用上述方法控制本组制剂质量.
