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广西莪术挥发油抗肿瘤作用的谱效关系研究
目的:探讨广西莪术挥发油气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)指纹图谱所代表的“有效组分群”对药效贡献的大小,为中药的质量控制和药效评价标准的制定提供参考.方法:通过GC-MS分析技术建立广西莪术挥发油指纹图谱,并对广西莪术挥发油的抗肿瘤作用进行研究,在获得的挥发油GC-MS指纹图谱特征峰面积与对鼻咽癌细胞的增殖抑制作用的数据基础上,采用灰关联度分析技术,计算各特征峰与对肿瘤细胞的增殖抑制率的关联度和关联序.结果:依据关联度的大小,确定各成分对抗肿瘤作用贡献的大小顺序为莪术醇＞莪术二酮＞β-榄香烯＞吉马酮＞莪术酮＞ α-丁子香烯＞δ-瑟林烯＞β-石竹烯＞β-榄香烯酮＞a-蒎烯＞α-石竹烯＞桉油素＞樟脑＞2-壬醇＞异龙脑莪术烯＞δ-榄香烯＞莰烯＞D-柠檬烯＞龙脑.结论:广西莪术抗肿瘤作用是其内“有效组分群”共同作用的结果,本研究确定了广西莪术挥发油“有效组分群”指纹特征对药效贡献的大小,为中药的“谱效关联”的指纹图谱的建立、中药的质量控制和药效评价标准的制定提供了新的思路和方法.
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不同炮制方法对广西莪术姜黄素成分及镇痛抗炎的影响
目的:探讨不同炮制方法对广西莪术姜黄素含量及镇痛抗炎作用的影响.方法:HPLC测定广西莪术生品、醋煮品、醋炙品姜黄素的含量;采用小鼠耳廓肿胀法、腹腔染料渗出法研究其抗炎作用;采用热板法、扭体法观察其镇痛作用.结果:广西莪术各炮制品姜黄素的含量为生品>醋炙品>醋煮品;醋制炮制后具有较强的抗炎、镇痛作用.结论:不同炮制方法对广西莪术质量有一定的影响.
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中药莪术GC-MS指纹图谱研究
目的研究中药莪术的GC-MS指纹图谱.方法运用GC-MS分析3种基原的18个莪术样品,所得TIC图谱采用"中药色谱指纹图谱计算机相似性评价系统"软件进行模式分析及相似度计算.通过质谱数据与文献对照检识出主要特征峰成分,并根据主要特征成分对18个样品进行SPSS聚类分析.结果3种基原18个莪术样品的相似度(全谱)计算结果较低;通过聚类分析结果可将莪术分为两类,温郁金和蓬莪术各为一类,广西莪术样品则无法成类.因此基于聚类分析结果,建立了温郁金和蓬莪术的指纹图谱共有模式,并分别具有较高的相似度,而广西莪术6个样品因成分差异较大,暂未建立指纹图谱共有模式.结论共有指纹图谱是多基原中药质量控制的基础,但多基原中药莪术GC-MS指纹图谱无法建立,提示不同基原莪术化学成分差异与药理作用的关系值得研究.
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桂郁金化学成分研究Ⅰ
目的 研究中药桂郁金的化学成分.方法 通过大孔树脂、反复硅胶柱色谱、ODS柱色谱和重结晶的方法进行分离纯化,通过化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定.结果 分离得到7个化合物,分别为zedoarolide B(Ⅰ),zedoarondiol(Ⅱ),zedoalactone A(Ⅲ),alismoxide(Ⅳ),isozedoarondiol(Ⅴ),curcumenol(Ⅵ)和β-谷甾醇(Ⅷ).结论 化合物Ⅰ～Ⅵ均为首次从本植物中分离得到
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广西莪术及其茎叶多糖的体外纤溶活性研究
目的 考察广西莪术及其茎叶多糖的体外纤溶活性.方法 用分步沉淀法,分离广西莪术及其茎叶的多糖,然后用纤维蛋白琼脂平板法考察不同醇沉多糖的纤溶活性.结果 广西莪术只有10%醇浓度沉淀多糖的体外纤溶效果稳定.广西莪术茎叶10%~30%的醇浓度沉淀多糖体外纤溶作用稳定,40%~60%的醇浓度沉淀多糖在高、中浓度时作用稳定,在低浓度时作用不稳定;在有纤溶活性的分步沉淀多糖中,除了10%和30%的醇浓度沉淀多糖具有浓度依赖性之外(P < 0.05),其余纤溶活性多糖均无浓度依赖性.结论 广西莪术及其茎叶的多糖成分具有体外纤溶活性.
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广西莪术种内变异类型中不同颜色挥发油化学成分分析
目的 分析研究广西莪术种内不同颜色挥发油以及所含化学成分.方法 采用水蒸气蒸馏法提取广西莪术挥发油,毛细管柱GC法进行分离,归一化法测定其质量分数,MS法鉴定化学成分.结果 广西莪术种内各种不同颜色挥发油,既存在共有挥发油成分,又存在非共有挥发油成分,检出色谱峰个数差别也较大,总共鉴定出29个化合物.结论 挥发油的不同颜色与所含的化学成分和有效成分存在一定相关性.本研究结果可为莪术挥发油的质量控制及选育广西莪术优良新品种提供科学依据.
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广西莪术试管内诱导根状茎形成的研究
目的 提纯复壮广西莪术种质资源,提高良种组培苗移栽成活率,方便组培苗生产的贮藏和管理.方法 调节MS培养基中大量元素和蔗糖的量,使组培苗在试管内直接诱导广西莪术小根状茎的形成.结果 培养基中大量元素和蔗糖的量是试管内直接诱导广西莪术小根状茎形成的重要影响因素.以1/2 MS和6%蔗糖结根状茎率高,根状茎粗,组培苗壮且根系发育良好,直接移栽的成活率高.结论 能够在试管内诱导广西莪术形成根状茎.
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HPLC法测定姜黄、郁金、广西莪术中姜黄素的含量
目的测定不同产地姜黄、郁金、广西莪术中姜黄素的含量.方法采用超声提取法,色谱柱SupelcosilTMLC18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-异丙醇-0.5%醋酸溶液(19:25;56),流速0.6 mL/min,测定波长420 nm,柱温35 C.结果姜黄素在14～56μg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率99.82%,RSD为1.57%.结论本法准确、快速,为控制中药原料药姜黄、郁金、莪术的内在质量提供了依据.
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超临界流体萃取广西莪术挥发油中β-榄香烯
目的采用超临界流体萃取广西莪术挥发油中的β-榄香烯.方法采用正交试验设计对萃取条件进行了优化.结果确定了佳萃取条件:萃取压力为25 MPa、萃取温度60℃、CO2流量8 L/h、萃取时间90 min;并用GC/MS测定了各试验条件下β-榄香烯.结论与水蒸汽蒸馏法相比较,超临界萃取法具有萃取率高、耗时少等优点.
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广西莪术化学成分的分离与鉴定
目的 对姜科植物广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Ling)的根茎化学成分进行研究.方法 采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及HPLC进行分离和纯化,并依据理化性质和波谱数据鉴定其化学结构.结果 从广西莪术根茎的体积分数为95%的乙醇溶液提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为蓬莪术环二烯(furanodiene,1)、吉马酮(germa-crone,2)、蓬莪术环二烯酮(furanodienone,3)、蓬莪术环氧酮(zederone,4)、对羟基苯甲酸(4-hydroxybenzoic acid,5)、对羟基桂皮酸(p-hydroxycinnamic acid,6).结论 化合物1、3～6为首次从该植物中分离得到.
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广西莪术水提取物抗血栓形成作用的实验研究
目的:探讨广西莪术水提取物抗血栓形成作用.方法:采用胶原蛋白—肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成模型,角叉菜胶致小鼠尾部血栓形成模型,大鼠体内静脉血栓形成模型,观察广西莪术水提取物的抗血栓形成作用.结果:广西莪术水提取物对胶原蛋白—肾上腺素诱发的小鼠体内血栓形成有明显的保护作用;明显减少角叉菜胶所致小鼠尾部血栓黑尾动物数,减小黑尾长度;减轻大鼠体内静脉血栓湿重.结论:广西莪术水提取物具有显著的抗血栓形成作用.
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广西莪术乙酸乙酯部位的抗血栓作用
目的 探究广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)乙酸乙酯部位的抗血栓作用.方法 建立角叉菜胶诱导小鼠尾血栓模型、大鼠动静脉旁路血栓模型、FeCl3诱导大鼠体内血栓模型,观察该部位抗血栓形成的作用,ELISA法检测大鼠血清中ET-1、6-keto-PGF1α、TXB2水平,硝酸还原酶法测定NO水平.再建立大鼠急性血瘀模型,观察该部位对血液流变学的影响.结果 广西莪术乙酸乙酯部位可显著减少角叉菜胶诱导小鼠黑尾血栓数量和黑尾长度;大鼠动静脉旁路血栓模型、FeCl3诱导体内血栓模型的血栓湿重显著降低,血清中NO、6-keto-PGF1α水平增加,ET-1、TXB2水平降低;大鼠急性血瘀模型的全血黏度、血浆黏度显著降低.结论 广西莪术乙酸乙酯部位具有显著的抗血栓形成作用,其机制可能与提高NO、6-keto-PGF1α水平,减少ET-1、TXB2水平,降低全血黏度、血浆黏度有关.
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广西莪术水提物对大鼠肝脏胞浆液抗氧化酶和微粒体药物代谢酶的影响
目的 研究广西莪术水提物对大鼠肝脏胞浆液和微粒体内抗氧化酶和药物代谢酶的影响.方法 用差速离心法制备肝脏胞浆液及微粒体,测定抗氧化酶和药物代谢酶NADPH-细胞色素P-450还原酶、CYP3A、CYP2E1和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和葡萄糖醛酸-转移酶(UGT)的活性.结果 在肝胞浆液,与空白组比较,广西莪术各剂量组对超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GR)水平的影响没有明显差异(P＞0.05);中剂量显著增高过氧化氢酶(CAT)活性(P＜0.01);高剂量明显增高GSH-PX活性(P＜0.05).广西莪术各剂量组对CYP2E1和UGT的活性均没有显著的影响(P＞0.05);均明显增高GST活性(P＜0.05);低剂量显著降低NADPH-细胞色素P-450还原酶活性(P＜0.05),各剂量组明显降低CYP3A活性(P＜0.05);苯巴比妥钠组明显增高CYP3A、GST和UGT的活性(P＜0.05).结论 广西莪术可能会影响体内药物代谢,合并用药时,应考虑潜在的药物间相互作用.
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桂郁金化学成分研究
从姜科植物桂郁金即广西莪术(Curcuma kwangsiensis)的块根分离鉴定出9个化合物,分别为:汉黄芩素(1)、木犀草素(2)、姜黄素(3)、15,16-bisnorlabda-8(17),11-dien--13-one(4),桂莪术内酯(5)、尿嘧啶(6)、3,4-二羟基苯甲酸(7),对羟基苯甲醛(8)、对羟基苯甲酸(9).其中化合物1、2、4、6为首次从本属植物中分到,化合物3、7、8为首次从该植物中分到,化合物5、9首次从桂郁金中分到.
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广西莪术挥发油化学成分的分析
采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对广西莪术挥发油进行分离测定.色谱柱HP-5MS毛细管柱(30.0m×250μm×0.25μm), 进样温度250℃,不分流;程序升温:初始65℃:恒温2min,以5℃/min升至90℃恒温3 min,以20℃/min升至103℃恒温3 min,以8℃/min升至150℃恒温15 min,以20℃/min升至280℃.结合计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定,用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量.结果共分离得到52个气相色谱峰,鉴定出20种化学成分,其中β-榄香烯、莪术酮、莪术醇、莪术二酮4种主要抗肿瘤活性成分均能检测到.此方法可用于莪术原料药材和莪术挥发油制剂的检测和相对含量测定.
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广西莪术EST-SSR标记开发
目的 利用NCBI公布的姜黄EST序列,挖掘SSR位点,开发近缘种广西莪术EST-SSR标记.方法 下载NCBI公布的姜黄EST序列,利用SSR-FINDER搜索SSR位点,采用PrimerS.0设计SSR引物,挑选30个表现型差异较大的广西莪术进行有效性及多态性检测.结果 12 678条EST序列含有SSR位点1 243个,其中二核苷酸、三核苷酸重复序列多,分别占50.36％,31.54％,以AT/TA和CT/GA出现频率高.利用Primer5.0设计引物共325对,PCR检测表明,104对引物可以扩增出稳定清晰的带型;在至少30份不同种质广西莪术中检测到48对SSR引物具有多态性,占设计引物的38.09％.结论 姜黄EST资源中含有高频率的SSR位点,且EST-SSR标记开发效率较高.
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广西莪术叶与根茎、块根挥发油的比较研究
目的 对广西莪术叶中挥发油成分进行系统的分析,并与其传统的用药部位块根和根茎的挥发油成分对比,寻找广西莪术叶作为代替性药材的可能性,尽可能的扩大广西莪术的药用部位.方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,运用GC/MS方法比较叶与根茎,块根的化学成分及其各成分的相对百分含量.结果 从广西莪术叶中分离得到38个色谱峰,鉴定出24个成分,三者有10个共有成分.结论 莪术叶挥发性成分与根茎、块根的差别很大,但仍有许多活性成分,如桉精油,有一定的药用价值.
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不同醇沉浓度对广西莪术多糖含量的影响
目的 优选广西莪术多糖水提醇沉浓度,为广西莪术的开发和利用提供理论基础.方法 以广西莪术多糖作为指标性成分,采用热水浸提法提取多糖,以含醇量为65％,75％,85％,95％优选广西莪术多糖提取液的醇沉浓度,采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量.结果 葡萄糖在2.857 ～ 14.286 μg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系,r=0.9992;平均回收率为99.94％,RSD =0.20％(n=6).65％、75％、85％、95％醇沉浓度下测得的广西莪术多糖分别为6.698,8.499,6.855,6.170 μg/ml,RSD分别为3.43％,2.10％,3.55％,6.47％(n=3).结论 不同醇沉浓度对广西莪术多糖含量影响较大,广西莪术多糖佳醇沉浓度为75％.
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广西莪术中的19种无机元素的电感耦合等离子体质谱-发射光谱测定
目的 对广西莪术中的无机元素进行研究.方法 采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法同时测定广西莪术中Li,B,Mg,Al,P,Ca,Ti,V,Cr,Mu,Fe,Co,Ni,Cu,Zn,Sr,Ba,Cd,Pb;以电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)法All定Ca,Mn.结果 这19种元素的含量顺序依次为P>Mg>Ca>Mn>Al>Fe>Zn>Ti>Cu>Ba>B>Pb>Sr>Ni>V>Cr>Cd >Co>Li.结论 该法快速简便,准确率高,精密度好,可以满足广西莪术样品中无机元素测定要求.
关键词： 广西莪术 电感耦合等离子体质谱 电感耦合等离子体发射光语 -
广西莪术微波炮制品中牻牛儿酮含量的研究
目的 研究微波炮制方法和传统炮制方法对广西莪术中牻牛儿酮含量的影响.方法 采用HPLC法,色谱柱为大连依利特Hypersil ODS2 柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);柱温:35℃;流动相为乙腈-水(35∶65);紫外检测波长为210 nm.结果 牻牛儿酮在0.095～0.95 μg范围内具有良好的线性关系,r=0.999 9;加样平均回收率101.86%,RSD为2.2%(n=6);含量测定结果为0.735 6～1.166 mg/g.结论 不同的微波炮制热力学参数条件对广西莪术中牻牛儿酮含量有明显影响,选择适当的微波热力学参数的微波炮制品2号与传统炮制方法醋制品中牻牛儿酮含量基本相同,为筛选莪术微波炮制工艺提供了有一定价值的实验参考数据.
