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黄芪及其有效部位对糖尿病模型大鼠AdipoR1、AMPK mRNA表达的影响
目的:通过检测大鼠肝、骨骼肌AdipoR1及AMPK mRNA表达,探讨黄芪有效部位(黄酮、多糖、皂苷)调节糖尿病模型大鼠血糖的可能机制.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪组、黄酮组、多糖组、皂苷组,观测30d,检测血糖、血清胰岛素(ELISA),肝、骨骼肌AdipoR1、AMPK mRNA表达(realtime PCR).结果:模型组血糖水平升高,血清胰岛素水平及肝、骨骼肌组织中AdipoR1、AMPK mRNA表达显著下降(P<0.01);黄芪各有效部位均可降低血糖、升高血清胰岛素水平,以黄芪组、黄酮组作用显著(P<0.05);黄芪各有效部位可上调肝和骨骼肌组织中AdipoR1、AMPK mRNA表达,其中在肝组织中以黄芪组、黄酮组升高明显,在骨骼肌组织中以皂苷组升高明显(P<0.05).结论:黄芪有效部位可降低糖尿病模型大鼠血糖、升高血清胰岛素水平,以黄芪黄酮效果显著;其调节血糖的机制可能与肝、骨骼肌AdipoR1、AMPKmRNA表达水平变化有关.
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中药复方益糖康对糖尿病大鼠白色脂肪中脂联素、脂联素受体1基因表达的影响
目的:观察中药复方"益糖康"对糖尿病大鼠白色脂肪脂联素(Adiponectin)和脂联素受体1(adiponectin receptor1,AdipoR1)的基因表达的影响.方法:大鼠高脂饲料饲养4周后,一次性腹腔注射链尿佐菌素(STZ)造模,将造模成功的大鼠用随机数字表法将其随机分为模型组和益糖康治疗组.空白对照组和模型组以蒸馏水灌胃,治疗组的大鼠用益糖康煎剂灌胃,4周后3组大鼠睾周白色脂肪组织放入液氮中保存,用RT-PCR法检测脂肪中脂联素和脂联素受体1mRNA表达.结果:治疗组的脂肪组织脂联素mRNA含量与空白对照组比较,没有显著差异,模型组较治疗组明显降低(P＜0.01).脂联素受体1mRNA表达与空白对照组的比较没有显著差异,模型组较空白对照组明显降低(P＜0.01).结论:推测中药复方"益糖康"具有上调白色脂肪脂联素和脂联素受体1基因表达的作用,这可能是益糖康治疗糖尿病早期大血管病变的机制之一.
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脂联素受体在人肾上腺皮髓质及其肿瘤中的不同表达
目的 观察脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)在正常肾上腺皮、髓质及其肿瘤中的mRNA表达.方法 提取6例正常人肾上腺皮质和髓质、10例皮质醇分泌瘤、14例醛固酮分泌瘤和20例嗜铬细胞瘤组织的总RNA,用RT-PCR方法检测AdipoR1、AdipoR2 mRNA表达;并分析AdipoR2与Adipo1的关系.31例患者曾行3 h葡萄糖耐量试验(OGTF),比较AdipoR1/R2与患者OGTT时血糖和胰岛素曲线下面积(GLU<,AUC>、INS<,AUC>)间的关系.结果 在肾上腺皮、髓质及其肿瘤中存在AdipoR1、AdipoR2的mRNA表达.AdipoR1 mRNA在正常肾上腺皮质内的表达明显低于皮质醇分泌瘤和醛固酮分泌瘤(P<0.01),AdipoR1 mRNA在嗜铬细胞瘤内的表达明显高于正常肾上腺髓质(P<0.01).AdipoR2 mRNA在正常肾上腺皮质内的表达明显低于皮质醇分泌瘤(P<0.05).皮质醇分泌瘤内AdipoR2 mRNA表达明显高于醛固酮分泌瘤(P<0.05).在所有组织中,AdipoR2与AdipoR1 mRNA表达高度相关r=0.335,P<0.01),AdipoR2 mRNA表达与GLU<,AUC>呈正相关(r=0.633,P<0.001).结论 肾上腺皮髓质及其肿瘤广泛表达脂联素受体并存在差异,可能与不同的脂联素水平相关.
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中国3种特有小型猪品系脂联素受体1基因外显子5的多态性分析
目的 探讨我国三个特有的小型猪品系-中国农大小型猪,五指山小型猪,广西巴马小型猪脂联素受体1基因多态性分布,为这些小型猪在代谢性疾病和2型糖尿病研究中的应用提供基础资料.方法 提取三个品系小型猪血液基因组DNA,针对脂联素受体1基因外显子5-内含子5的部分序列进行PCR扩增,对产物进行鉴定和测序,分析基因多态性.结果 在所扩增的片段中共检测出5个SNPs--SNP1:G138A,发生在所有的小型猪品系中,并导致第45位的氨基酸由甘氨酸(Gly)转变为谷氨酸(Glu);SNP2:G185A,所有的纯合突变均发生在五指山小型猪品系中(4/6,66.67%),而所有的杂合突变则发生在中国农大小型猪品系中(3/10,30%);SNP3:G200A,全部发生在中国农大小型猪品系中,且均为杂合突变(3/10,30%);SNP4:C295T,发生在广西巴马小型猪品系中的突变既有杂合突变(1/6,16.67%)也有纯合突变(2/6,33.33%),发生在中国农大小型猪品系中的突变全为杂合突变(2/10,20%);SNP5:T337G,只出现在中国农大小型猪品系中,且为杂合突变(1/10,10%).结论 SNP1,在所有测定的小型猪品系中检出,这可能是所测小型猪共有的特性.SNP2,可能是小型猪品系之间的差异.SNP3和SNP4,可能是小型猪品系之间的差异,也可能是个体的差异.SNP5,可能是个体差异.
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福辛普利对慢性心力衰竭大鼠心肌脂联素受体表达的影响
目的:探讨福辛普利对慢性心力衰竭大鼠心肌脂联素受体表达的影响.方法:肾上腹主动脉缩窄法建立大鼠慢性心衰模型,随机分为假手术组、心衰模型组和福辛普利组,每组10只大鼠.观察各组大鼠左心室肌重量指数(LVMI)和血流动力学指标(LVEDP、±dp/dtmax);ELISA法测定心肌脂联素浓度;SP免疫组化染色检测心肌脂联素受体1(AdipoR1)蛋白的表达.结果:与模型组相比,福辛普利组大鼠LVEDP、LVMI、脂联素蛋白浓度均显著降低(P＜0.01),±dp/dtmax、心肌AdipoR1蛋白表达显著升高(P＜0.01).结论:福辛普利能显著改善慢性心力衰竭大鼠的心功能,机制可能与影响心肌脂联素系统有关.
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自发性高血压大鼠血清脂联素和心肌脂联素受体1的表达及胰岛素抵抗程度与心室重构的关系研究
目的 观察自发性高血压大鼠(SHR)血清脂联素(APN)、心肌脂联素受体1(AdipoR1)的表达及胰岛素抵抗(IR)程度,探讨3者与血压升高、心室重构的关系.方法 选取22周龄SHR和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠各8只(SHR组、WKY组)为研究对象,测定血清APN、血清空腹胰岛素(FINS),免疫组化法测定心肌AdipoR1的分布及蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法测定心肌AdipoR1 mRNA表达.结果 (1)与同周龄WKY组相比,SHR组体质量(BW)减低,收缩压(SBP)、全心重量(HW)、左心室重量(LVW)、心脏重量指数(HWI)、左心室重量指数(LVWI)、空腹胰岛素(FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)增高,差异均有统计学意义(P＜0.05);两组FBG差异无统计学意义(P＞0.05).(2)与WKY组相比,SHR组血清APN表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)SHR组心肌AdipoR1阳性染色减少,与WKY组比较差异有统计学意义(P＜0.05).(4)SHR组心肌AdipoR1 mRNA表达低于WKY组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).(5)Pearson直线相关显示,大鼠SBP与血清APN、AdipoR1、AdipoR1 mRNA呈负相关,与HWI、LVWI、HOMA-IR呈正相关;多元线性逐步回归分析显示,血清APN和HOMA-IR是大鼠SBP的影响因素.(6)Pearson直线相关显示,大鼠LVWI与血清APN、AdipoR1、AdipoR1 mRNA呈负相关,与SBP、HWI、HOMA-IR呈正相关;多元线性逐步回归分析显示,心肌AdipoR1、心肌AdipoR1 mRNA、HWI、SBP是大鼠LVWI的影响因素.结论 SHR存在明显的心室重构,血清APN及心肌AdipoR1表达下降、IR程度增加;SHR心室重构可能与血清APN及心肌AdipoR 1表达下降有关.
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脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达
目的 通过体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,研究脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)及T-钙黏蛋白(T-cadherin)三种脂联素受体在大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达.方法 采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,通过α-肌动蛋白免疫荧光法对原代培养的心肌细胞进行鉴定,并在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态.选用原代培养96 h的单层心肌细胞进行实验,使用RT-PCR和细胞免疫组织化学方法 检测AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白在心肌细胞中的表达情况.结果 在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均检测到了AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白表达,其中以AdipoR1和T-cadherin的mRNA和蛋白表达量高,与AdipoR2的表达量相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 脂联素受体1、脂联素受体2和T-钙黏蛋白,三种脂联素受体在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均有表达,并以脂联素受体1和T-钙黏蛋白的表达为主,脂联素受体2表达量较少.
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罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体1表达的影响
目的 观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响,探讨罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制.方法 雄性Wistar大鼠随机分为A组(健康对照组)、B组(糖尿病组)和C组(糖尿病罗格列酮治疗组).用高脂高糖饲料加小剂量链尿佐菌素制备2型糖尿病大鼠模型.造模成功后,C组给予罗格列酮(3 mg·kg-1·d-1)灌胃12周.实验结束时,用免疫组织化学法测定肾脏组织中AdipoR1和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肾脏AdipoR1 mRNA表达.结果 与A组比较,B组糖尿病大鼠血糖、血脂、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率、肾脏指数和TGF-β1表达均显著升高(P<0.05),罗格列酮干预后,C组上述指标均较B组显著降低(P<0.05).B组糖尿病大鼠肾组织AdipoR1 mRNA表达显著低于A组(P<0.01);罗格列酮干预后,C组大鼠AdipoR1 mRNA表达较B组显著升高(P<0.01).免疫组织化学结果显示,B组糖尿病大鼠肾脏AdipoR1表达较A组显著降低(P<0.01),经罗格列酮干预后,C组大鼠肾脏AdipoR1表达较B组显著升高(P<0.01).结论 2型糖尿病大鼠肾脏AdipoR1表达降低.罗格列酮通过上调肾脏AdipoR1表达,降低TGF-β1表达,减轻肾脏肥大,产生肾脏保护作用.
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2型糖尿病大鼠心肌脂联素及其受体1的表达
目的 观察2型糖尿病大鼠心肌病变中心肌脂联素(adiponectin,APN)以及心肌脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)的表达情况,探讨心肌APN、AdipoR1的表达与糖尿病心肌病变的关系.方法 23只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,n=10)和糖尿病组(B组,n=13).用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型.喂养3个月后应用免疫组织化学方法测定心肌AdipoR1的表达.用酶联免疫吸附法检测血浆和心肌APN水平.通过颈动脉插管测等容舒张期左室内压力下降大速率(-dp/dtmax)和等容收缩期左室内压上升的大速率(+dp/dtmax).结果 与A组比较,B组糖尿病大鼠3个月时出现心脏重量/体重水平升高(P<0.05),等容舒张期左室内压降低,血浆和心肌APN水平以及心肌AdipoR1表达水平降低(P<0.05). 结论 2型糖尿病大鼠心肌APN及其AdipoR1表达水平的降低可能与糖尿病心脏肥大和心功能降低有关.
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苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心肌脂联素受体1表达及心功能的影响
目的 探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心功能及心肌组织中脂联素受体1 (AdipoR1)表达的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,模型建立成功后,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷(20 mg/kg.d)灌胃治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,分别于治疗4、8周后处死大鼠各半,测定血糖、胰岛素、血脂以及心功能,HE染色检测心脏病理学,RT-PCR以及Western Blot检测心脏组织中AdipoR1 mRNA和蛋白的表达.结果 造模成功后,糖尿病组大鼠血糖、血脂(TG、TC和FFA)以及心功能指标(CK、CK-MB、LDH和HBDH)明显升高(P＜0.05),胰岛素含量明显降低(P.05),治疗4周后,除胰岛素明显升高外(P＜0.05),各生化指标均明显下降(P＜0.05),治疗8周后进一步改善;HE染色可见,糖尿病大鼠心脏有轻微的损伤,苦瓜总皂苷对其有一定的调节作用;造模成功后模型组心肌AdipoR1 mRNA水平和蛋白表达相较于正常组明显升高(P.05),苦瓜总皂苷治疗后其AdipoR1表达显著降低(P＜0.05).结论 苦瓜总皂苷可通过降低2型糖尿病大鼠心脏组织中AdipoR1的表达,调节血脂,改善心脏功能,终保护心肌细胞.
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替米沙坦对糖尿病大鼠心肌脂联素及其受体1表达的影响
目的 观察替米沙坦对糖尿病大鼠心肌脂联素及其受体1表达的影响,探讨替米沙坦对糖尿病大鼠心肌病变的保护作用及机制.方法30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组,糖尿病组和糖尿病替米沙坦治疗组(替米沙坦组).用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型.成模后,替米沙坦组予以替米沙坦(5 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃12周.实验结束时,测定心功能,用酶联免疫法检测血浆和心肌脂联素水平,用RT-PCR方法检测心肌脂联素受体1(AdipoR1)mRNA表达,用Western印迹法检测心肌脂联素受体1、磷酸化的磷酸腺苻激活的蛋白激酶-α(AMPK-α)、葡萄糖转运子4(GluT_4)蛋白表达.结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠12周时出现心重/体重增加[(4.38±0.07对2.99±0.67)g/kg,P<0.05],心功能降低,血浆和心肌脂联素水平降低[(1.09±0.03对1.87±0.05)μg/ml,(0.12±0.02对0.21±0.02)μg/mg蛋白,均P<0.05],心肌脂联索受体1 mRNA和蛋白表达降低(0.35±0.08对0.78±0.11,0.34±0.07对0.77±0.08,均P<0.05),心肌磷酸化AMPK-α和GluT_4蛋白表达降低(0.47±0.12对0.72±0.10,0.41±0.09对0.79±0.08,均P<0.05).与糖尿病组比较,替米沙坦治疗12周后心室重/体重降低[(3.49±0.39对4.38±0.07)g/kg,P<0.05],心功能改善.血浆和心肌脂联素水平升高[(1.41±0.02对1.09±0.03)μg/ml,(0.16±0.01对0.12±0.02)μg/mg蛋白,均P<0.05],心肌脂联素受体1 mRNA和蛋白表达增加(0.48±0.06对0.35±0.08,0.47±0.09对0.34±0.07,均P<0.05),心肌磷酸化AMPK-α和GluT_4表达水平均升高(0.57±0.10对0.47±0.12,0.52±0.10对0.41±0.09,均P<0.05).结论糖尿病大鼠心肌脂联素及其受体1的表达水平降低.替米沙坦上调糖尿病大鼠心肌脂联素及其受体1的表达水平,促进心肌葡萄糖氧化,从而改善心功能.
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人脂联素受体1和2的真核表达
目的 扩增和表达人脂联素受体1(AdipoR1)和人脂联素受体2(AdipoR2)基因.方法 利用RT-PCR方法扩增AdipoR1和AdipoR2全长cDNA,将AdipoR1和AdipoR2的cDNA构建到真核表达载体pcDNA3.1,重组质粒转染HEK293细胞,通过免疫荧光技术标记HEK293细胞的AdipoR1和AdipoR2融合蛋白,共聚焦显微镜观察AdipoR1和AdipoR2在细胞中的定位.结果 成功构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-adipoR1和pcDNA3.1-adipoR2,重组质粒转染HEK293细胞后,定位于HEK293细胞膜上.结论 AdipoR1和AdipoR2重组质粒的构建和在HEK293细胞中的成功表达,为进一步研究其与胰岛素抵抗的关系创造了条件.
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沉默脂联素受体1对脂多糖诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖凋亡的影响
目的:观察脂联素受体1 (adiponectin receptor1,AdipoR1)沉默对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(MH7A)增殖、凋亡的影响.方法:①利用免疫荧光、Western blot鉴定并验证shRNA技术对构建的Adi-poR1沉默MH7A(sh-AdipoR1组)细胞的干扰效率;②分别用CCK8试剂盒、流式细胞仪检测LPS(100 ng/mL)对sh-AdipoR1组及空载病毒对照(sh-NC组)细胞增殖及凋亡的影响;③利用实时定量聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,real-timePCR)检测LPS对sh-AdipoR1及sh-NC组细胞中凋亡相关基因BCL-2、BCL-XL、BAX、BAK表达的影响.同时设置无LPS刺激的sh-NC、sh-AdipoR1组作为对照.结果:①荧光显微镜下可见sh-AdipoR1组细胞荧光蛋白表达效率趋近于100％,Western blot检测结果显示:与sh-NC组相比,sh-AdipoR1组AdipoR1蛋白的表达显著下降(P＜0.05),表明AdipoR1沉默的细胞构建成功;②无LPS刺激情况下,sh-NC组与sh-AdipoR1组细胞增殖速率及凋亡细胞比例无明显差异;LPS刺激可显著增加sh-NC组和sh-AdipoR1组细胞相对增殖速率及凋亡细胞比例(P＜0.05);在LPS作用24、48 h,sh-AdipoR1组细胞增殖速率均显著低于sh-NC组(P,＜0.05),而sh-AdipoR1组细胞凋亡率显著高于sh-NC组(P＜0.05);③real-time PCR结果显示,无LPS刺激情况下,sh-NC组与sh-AdipoR1组抑制凋亡基因BCL-2、BCL-XL与促进凋亡基因BAK、BAX的相对表达量均无显著差异(P＞0.05);LPS刺激可降低抑凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达,增加促凋亡基因BAX、BAK表达(P＜0.05);在LPS诱导下与sh-NC组相比,sh-AdipoR1组抑制凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达下降,促凋亡基因BAX、BAK表达显著升高(P,＜0.05).结论:AdipoR1基因的沉默可抑制LPS诱导的MH7A细胞增殖,促进细胞凋亡,并提示AdipoR1相关信号通路可能在类风湿关节炎发生发展中起到重要作用,阻断该途径可有效阻断LPS诱导的MH7A细胞炎症反应.
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维吾尔族妇女子宫颈病变中CTGF、 IL-1β、 Agr和AdipoR1表达与HPV16感染的相关性
目的 探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、蛋白聚糖聚合物(aggrecan,Agr)和脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)在维吾尔族妇女子宫颈病变中的表达与HPV16感染、子宫颈癌分化程度的关系.方法 采用免疫组化SP法检测CTGF、IL-1β、Agr和AdipoR1在喀什维吾尔族17例子宫颈炎和46例子宫颈癌组织中的表达;采用PCR技术检测相应标本中HPV16的感染.利用图像分析软件IPP 6.0半定量检测子宫颈病变中CTGF、IL-1β、Agr和AdipoR1的累积光密度(IOD SUM)值.结果 PCR检测结果显示子宫颈癌中HPV16阳性者22例,阴性者24例;子宫颈炎中HPV16阳性者5例,阴性者12例.CTGF在子宫颈癌组中的表达低于子宫颈炎组(P＜0.01).IL-1β、Agr在子宫颈癌组的表达高于子宫颈炎组(P＜0.01).CTGF在HPV16阳性子宫颈癌组的表达高于HPV16阴性组(P＜0.05).AdipoR1在HPV16阳性子宫颈炎组的表达高于HPV16阴性组(P＜0.05).CTGF、IL-1β、Agr和AdipoR1在子宫颈癌中的表达与分化程度无相关性(P＞0.05).结论 与子宫颈炎组织相比,子宫颈癌中CTGF表达量下降,IL-1β和Agr表达量上升,在子宫颈癌的发生、发展中起一定的作用,其检测结果对维吾尔族妇女子宫颈癌诊断有一定的参考价值.
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吡格列酮对TPH-1巨噬细胞脂联素受体1表达的影响
目的 观察吡格列酮对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的TPH-1巨噬细胞脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响.方法 给予不同浓度的吡格列酮处理TPH-1源性巨噬细胞,并加入ox-LDL孵育24 h,运用荧光分光光度法测定胆固醇(TC)浓度;TBARS法检测细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA);油红O染色观察细胞内脂滴的变化,采用Western-blot检测AdipoR1蛋白表达水平.结果 TPH-1细胞先后经佛波酯(PMA)及ox-LDL共同孵育后,细胞内形成大量脂滴,胆固醇酯(CE)和MDA含量明显升高.高浓度的吡格列酮刺激负荷ox-LDL诱导的的TPH-1源性巨噬细胞24 h后,细胞质内的脂滴明显减少.5μmol/L吡格列酮组TC、CE、MDA[分别为(53.6±1.2) μg/mg、(30.2±3.6) μg/mg、(3.42±0.06)μg/mg]、50 μmol/L吡格列酮组TC、CE、MDA[分别为(25.6±1.8) μg/mg、(22.5±4.5)μμg/mg、(1.90±0.42) μg/mg]、100 μmol/L吡格列酮组TC、CE、MDA[分别为(16.8 ±2.2) μg/mg、(5.9±1.4) μg/mg、(0.65 ±0.05) μg/mg]均低于0μmol/L吡格列酮组[(98.2±3.5)μg/mg、(65.5±6.5)μg/mg、(8.50±1.21) μg/mg](均P＜0.05);Western-blot检测吡格列酮呈浓度依赖性上调ox-LDL所诱导的TPH-1源性巨噬细胞中AdipoR1蛋白表达.5μmol/L吡格列酮组AdipoR1蛋白表达高于0μmol/L吡格列酮组(t=4.022,P＜0.05),以此类推,50 μmol/L吡格列酮组AdipoR1蛋白表达高于5μmol/L吡格列酮组(t=4.072,P＜0.05);100 μmol/L吡格列酮组AdipoR1蛋白表达高于50 μmol/L吡格列酮组(t=5.008,P＜0.05).结论 吡格列酮可引起ox-LDL诱导的TPH-1源性巨噬细胞中AdipoR1的表达上调.
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脂联素受体1基因在大鼠脂肪组织中的表达及其与肥胖易感性的关系
目的探讨高脂高能量饮食(HFHCD)诱导下肥胖易感(OP)大鼠与肥胖抗性(OR)大鼠腹膜后脂肪组织脂联素受体1(AdipoR1)基因mRNA表达的差异及其与肥胖易感性的关系.方法雄性SD大鼠18只,以高脂高能量鼠料饲养2周后,按体质量增值大小分组,增重多的6只为OP组,增重少的6只为OR组.OP、OR大鼠继续饲以4周后,观察各大鼠体质量变化和腹膜后脂肪组织湿重,采用RT-PCR技术检测脂肪组织AdipoR1基因mRNA表达水平.结果1.HFHCD诱导下,OP组大鼠体质量、腹膜后脂肪组织湿重均明显高于OR组(t'=4.48 P＜0.01);2.OP组大鼠腹膜后脂肪组织中AdipoR1 mRNA表达水平低于OR组,但两者差异无统计学意义(t=2.23 P＞0.05);3大鼠腹膜后脂肪组织湿重与AdipoR1 mRNA的表达水平存在显著负相关(r=0.735 P＜0.05).结论AdipoR1表达于脂肪组织.相同饮食条件下,个体发生肥胖的易感性是影响AdipoR1水平的重要因素.
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血管紧张素Ⅱ1型受体表达对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响
目的 探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)在高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞损伤中的作用及分子机制.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞,分为正常对照组、高糖组、高糖+血管紧张素Ⅱ1型受体小干扰RNA组、高糖+小干扰RNA阴性对照组.采用免疫印迹法检测受体AT1R、脂联素受体1(AdipoR1),炎性因子核转录因子(NF-κB)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)、巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1)及纤维化标记物α-肌动蛋白(α-SMA)、纤维结合蛋白(FN)的表达;采用免疫沉淀法检测AT1 R-AdipoR1二聚化在肾小管上皮细胞中的形成,共聚焦显微镜下观察AT1R、AdipoR1在肾小管上皮细胞中的共定位关系.结果 研究发现,在高糖刺激下,大鼠肾小管上皮细胞中AdipoR1表达无改变,AT1R表达明显增加(P＜0.05);炎性因子NF-κB、MCP-1、MIP-1α表达显著上调(均P＜0.05);纤维化标记物α-SMA、FN表达显著升高(均P＜ 0.01).研究还发现,大鼠正常肾小管上皮细胞中存在AdipoR1-AT1R二聚化,且在高糖刺激下AdipoR1-AT1R二聚体表达较正常对照组明显升高.在转染血管紧张素Ⅱ1型受体小干扰RNA后,AT1R-AdipoR1二聚化明显减少,且明显抑制AT1R表达(P＜0.05),并使肾小管上皮细胞炎性因子NF-κB、MCP-1、MIP-1α表达显著下调(均P＜0.05),使纤维化标记物α-SMA、FN表达明显降低(均P＜0.05).结论 高糖刺激下,AT1R通过促进AT1R-AdipoR1二聚化,介导肾小管上皮细胞炎性损伤及诱导肾小管上皮细胞凋亡,促进其纤维化的发生发展.
关键词： 血管紧张素Ⅱ1型受体 脂联素受体1 二聚化 肾小管上皮细胞 炎症 -
脂联素水平对心肌脂联素受体1表达的影响及其机制研究
目的:观察脂联素(adiponectin,APN)水平对心肌脂联素受体1(adiponectin receptors 1,AdipoR1)表达的影响;探讨胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是否是APN影响心肌AdipoR1表达的机制之一.方法:观察对象分为5组,其中野生型C57BL小鼠分为:对照组(CON组)和IR组,APN/-小鼠分为:APN-/-组(KO组),APN/-+IR组(KIR组)和APN-/-+IR+ APN干预组(APN组).IR组、KIR组、APN组小鼠给予高脂饲料诱导IR模型,其中APN组小鼠还给予重组APN腹腔注射.干预12周后取血,用血糖仪检测小鼠空腹血糖(fastingplasma glucose,FPG)、ELISA法检测血清空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)及APN水平,并计算IR指数(HO-MA-IR).取小鼠心肌组织,采用免疫组织化学法、Western blot法、PCR法检测心肌AdipoR1的表达水平.结果:与CON组比较,KO组和IR组血清APN水平降低、心肌AdipoR1蛋白表达降低,IR组HOMA-IR水平升高.与KIR组比较,APN组血清APN水平升高、心肌AdipoR1蛋白升高、HOMA-IR水平降低.小鼠心肌Adi-poR1与血清APN呈正相关,与FINS、HOMA-IR呈负相关.结论:APN可上调心肌AdipoR1的表达.IR可导致心肌AdipoR1表达下调.APN可通过改善IR起到上调心肌AdipoR1表达的作用.
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福辛普利对自发性高血压大鼠心室重构及血清脂联素、心肌脂联素受体1表达的影响
目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)心室重构情况及血清脂联素(APN)、心肌脂联素受体1(Adi-poR1)的表达,以及福辛普利干预后的变化,并探讨其意义.方法:以8只WKY大鼠和24只SHR大鼠为观察对象.将SHR大鼠随机分成SHR组、Fos10组、Fos20组,每组8只.从14周龄起,WKY组和SHR组给予蒸馏水灌胃,Fos10组和Fos20组分别给予福辛普利10mg· kg-1·d-1和20 mg·kg-1·d-1灌胃干预.8周后,测定各组大鼠收缩压(SBP)、左心室重量指数(LVWI)、血清APN,荧光定量PCR和Western Blot法观察心肌AdipoR1的mRNA和蛋白的表达.结果:与WKY组相比,SHR组SBP升高、LVWI增加,血清APN、心肌AdipoR1表达下降(P＜0.05);与SHR组相比,Fos10组和Fos20组SBP、LVWI下降,血清APN、心肌AdipoR1表达上调,且Fos20组效果明显(P＜0.05).结论:SHR发生心室重构,存在低APN血症并伴随心肌AdipoR1表达下降;福辛普利可能通过升高血清APN、上调心肌AdipoR1表达,来降低SHR的SBP水平,改善心室重构.
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吡格列酮对2型糖尿病大鼠骨骼肌脂联素受体1表达的影响
目的 观察吡格列酮对2型糖尿病大鼠血清脂联素以及骨骼肌脂联素受体1( AdipoR1)表达的影响,探讨吡格列酮对2型糖尿病胰岛素抵抗的改善作用及机制.方法 40只8周龄健康雌性SD大鼠,随机分为正常对照组(n=10)、糖尿病组(n=15)及吡格列酮组(n=15).用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,成模后吡格列酮组给予10 mg/(kg·d)吡格列酮灌胃,正常对照组和糖尿病组给予同体积生理盐水灌胃,共12周.3个月后股静脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清脂联素水平,留取大鼠骨骼肌,光、电镜观察骨骼肌结构,免疫组织化学染色法测定骨骼肌AdipoR1蛋白的表达.结果 与正常对照组(1.73±0.32 mg/L)比较,糖尿病组血清脂联素(1.01±0.27 mg/L)水平显著降低,而吡格列酮组(1.34±0.43 mg/L)较糖尿病组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).骨骼肌AdipoR1免疫组织化学染色正常对照组着色深且广泛,糖尿病组较正常对照组染色浅,吡格列酮组较糖尿病组染色深,但较正常时照组浅.光镜及电镜结果显示大鼠骨骼肌结构未见明显异常.结论 2型糖尿病大鼠血清脂联素水平及骨骼肌AdipoR1表达降低并导致糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗.吡格列酮可上调血清脂联素及骨骼肌AdipoR1的表达,从而调节糖脂代谢,改善胰岛素抵抗.
