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止消通脉宁对糖尿病肾病小鼠肾间质纤维化作用机制的研究
目的:探讨止消通脉宁干预糖尿病肾病小鼠肾间质纤维化作用机制.方法:50只12周龄KKAy小鼠成模后随机分为模型组、厄贝沙坦组、止消通脉宁(ZXTMN)高、中、低剂量组,另设10只C57BL/6为正常组.实验期间,记录小鼠一般状态,血糖,24h尿蛋白定量,血清肌酐(Scr),肾组织Masson染色.Western Blot检测肾α-SMA,TGF-β1,BMP-7和VEGF蛋白表达,实时荧光定量PCR检测肾TGF-β1 mRNA,TGF-β R1 mRNA和Smad2 mRNA表达.结果:与模型组相比较,第4周时,ZXTMN治疗组和厄贝沙坦组小鼠体质量、血糖和24h尿蛋白定量显著性减小(P＜0.05),肾间质纤维化评分显著性减低(P＜0.05).ZXTMN高、中组和厄贝沙坦组α-SMA和TGF-β1蛋白表达显著性减少(P＜0.01),BMP-7和VEGF蛋白表达显著性增加(P＜0.01);ZXTMN各治疗组TGF-β1 mRNA和Smad2 mRNA显著性减少(P＜0.01).结论:调节TGF-β1/Smad抑制肾小管上皮细胞转分化可能是止消通脉宁治疗糖尿病肾病肾间质纤维化的分子机制之一.
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巨噬细胞极化在肺纤维化中的作用及信号通路研究
巨噬细胞是一类具有多能性和可塑性的免疫细胞群体,在体内外不同的微环境作用下,可分化成不同的表型.在IPF发展过程中主要有AM与IM 2类,二者在不同发病阶段向不同细胞表型极化,其极化表型包括M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞.在肺纤维化炎症早期,M1型比例的升高有利于清除病原微生物,推进炎症的进展;在纤维化后期,M2型巨噬细胞数量的增加可以抑制炎性反应,同时可以促进纤维化的降解.在IPF中,M1,M2极化机制与TGF-β1/Smad关系密切,其中极化通路TGF-β1/Smad在肝纤维化、肾纤维化、心肌纤维化、瘢痕、肿瘤等多种疾病中均具有重要的调控作用.阻断Smad3,4对TGF-β1的信号传导有利于抑制AM的极化,进而有助于抑制IPF进展.
关键词： 巨噬细胞极化 M1型巨噬细胞 M2型巨噬细胞 肺纤维化 TGF-β1/Smad -
香青兰总黄酮对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变中TGF-β1/Smad信号通路及基质金属蛋白酶表达的影响
研究香青兰总黄酮(TFDM)对高脂饮食诱导载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其相关机制.采用40只SPF级8周龄雄性ApoE-/-小鼠予高脂饲料喂养,随机分为5组:香青兰总黄酮低、中、高剂量组分别给予21,42,84 mg·kg-1·d-1灌胃;辛伐他汀组灌服辛伐他汀3.5 mg·kg-1·d-1;模型组灌服等剂量生理盐水.另设8只相同基因背景和周龄的雄性C57BL/6J小鼠为对照组予普通饲料喂养.各组均灌胃干预12周,采用HE染色观察主动脉病理形态学变化;qRT-PCR法检测组织中TGF-β1,Smad2,Smad3,MMP-2和MMP-9基因的水平.实验结果显示:与模型组比较,HE染色观察TFDM给药组表现主动脉粥样硬化组织损伤明显减轻;TFDM不同剂量组可在一定程度上抑制高脂饲料诱导的ApoE-/-小鼠主动脉TGF-β1,Smad2,Smad3,MMP-2,MMP-9 mRNA的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势.提示TFDM具有减缓小鼠动脉粥样硬化形成的作用,其作用机制可能与干预TGF-β1/Smad信号转导有关.
关键词： 动脉粥样硬化 香青兰总黄酮 TGF-β1/Smad MMPs -
黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7d及TGF-β/smad信号干预作用
目的:研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用.方法:C57 BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组.模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素(10 mg/kg),假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮(43 mg/kg)灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃.第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达.结果:BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响.结论:黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用.
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依那西普对博来霉素致大鼠肺间质性病变的影响
目的 观察依那西普对博来霉素诱导的大鼠肺间质性病变的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和治疗组(依那西普),每组12只.采用博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型,治疗组予依那西普干预.观察比较造模后第14、21天各组大鼠肺组织病理及羟脯氨酸的变化,免疫组织化学染色方法检测转化生长因子β1 (TGF-β1)、Smad2/3的表达.结果 模型组及治疗组病理检查可见明显肺泡炎症改变、胶原沉积和纤维化形成,且治疗组各时期肺泡炎症和肺纤维化程度均较模型组减轻(P＜0.05).治疗组各时期羟脯氨酸的表达较模型组均减少(P＜0.05).免疫组织化学染色结果显示,与对照组相比,模型组和治疗组大鼠肺组织中的TGF-β1、Smad2/3表达均明显增加(P＜0.05),但治疗组表达较模型组减少(P＜0.05).结论 依那西普可改善博来霉素致大鼠肺间质性病变的程度,其作用机制可能与下调TGF-β1和Smad2/3水平有关.
关键词： 依那西普 大鼠 肺间质性病变 博来霉素 TGF-β1/Smad -
芩丹胶囊对高血压血管外膜重构及TGF-β1/Smad信号转导通路的影响
目的 观察芩丹胶囊(QD)的降压作用以及对血管外膜TGF-βl/Smad信号转导通路的影响,探讨QD改善高血压血管外膜重构的作用机制.方法 将老年自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组(SHR组)、QD大剂量组(SHR+QDH组)、QD小剂量组(SHR+QDL组)、氯沙坦组(SHR+Los组),另设老年Wistar-Kyoto(WKY)大鼠空白对照组(WKY组)及正常用药组(WKY+QDH组).给药组分别灌胃给予相应药物,SHR组和WKY组灌胃给予等量生理盐水.测量各组大鼠收缩压;免疫组化法观察TGF-β1和Smad7在胸主动脉外膜的蛋白表达;苦味酸-天狼猩红染色,偏振光显微镜下观察Ⅰ、Ⅲ胶原在胸主动脉外膜的表达;Image Pro Plus图像分析系统进行定量分析.结果 与SHR组相比,SHR+QDH组、SHR+QDL组和SHR+Los组收缩压均下降(P＜0.05);TGF-β1表达降低,Smad7表达增高(P均＜0.05);外膜Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达下降(P＜0.05).SHR+QDH组比SHR+QDL组效果更好(P＜0.05).结论 QD不仅能够有效降低SHR血压,而且能够干扰TGF-β1/Smad信号转导通路,从而抑制动脉血管外膜Ⅰ、Ⅲ胶原的表达,改善和逆转血管外膜重构.
关键词： 芩丹胶囊 血管外膜重构 TGF-β1/Smad Ⅰ、Ⅲ胶原 -
中医药调控 TGF-β1/Smad 信号通路干预肾间质纤维化机制
TGF-β1/ Smad 信号传导通路是肾间质纤维化发生发展重要的通路之一。随着分子生物学、中药药理学等研究的不断深入，无论中药单方及其有效成份或复方中药，通过调控 TGF-β/ Smad 信号通路拮抗肾间质纤维化已显现出广泛的药理作用：如直接抑制 TGF-β1的产生，或抑制 TGF-β1刺激的下游因子 CTGF 等，或抑制 Smads 磷酸化，或调节 TβR、Smad 的表达等，显示出多途径、多层次、多靶点对 TGF-β1/ Smads 通路及信号蛋白的调控效应。但由于复方中药成分复杂，应更深入全面地阐明其对 TGF-β/ Smad 信号通路的各个环节、不同靶点及与其他信号通路相互作用的调控机制，并通过拆方研究、有效部位筛选、有效组分分析等，明确各药物之间的协调作用，以筛选出临床疗效可靠、无不良反应的基础方药及其药物佳配伍剂量或形式，此为复方中药研究应寻找的佳突破点之一。
关键词： TGF-β1/Smad 信号通路 肾间质纤维化 中药单方 复方中药 -
芪归方通过抑制miR-21而干预TGF-β1/Smad通路并减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化
目的 观察芪归方对博莱霉素所致特发性肺纤维化(IPF)大鼠微小RNA-21(miR-21)表达以及转化生长因子β1(TGF-β1) /Smad通路的影响.方法 博莱霉素一次性气管内注射复制大鼠特发性肺纤维化模型,随机分为芪归方低、中、高剂量组及模型组;正常对照组大鼠气管内注射生理盐水.用药7d、28 d后,Masson染色观察各组大鼠肺组织形态学的变化;real-time PCR检测肺组织中miR-21;免疫组化法分析P-Smad2和P-Smad3蛋白的表达.结果 与模型组相比,芪归方用药组大鼠的肺泡炎及肺纤维化程度有明显降低,肺组织中miR-21表达下降,TGF-β1、NF-KB水平和P-Smad2和P-Smad3蛋白表达水平也明显下降.结论 芪归方抗肺纤维化的作用可能与抑制miR-21的表达,从而干预TGF-β1/Smad信号通路,减少细胞外基质沉积有关.
关键词： 芪归方 特发性肺纤维化 微小RNA-21 TGF-β1/Smad -
拉米夫定和水飞蓟素对酒精刺激的HBV转基因小鼠肝纤维化相关因子的影响
目的:观察在肝损伤早期,拉米夫定和水飞蓟素对酒精刺激的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因小鼠肝组织保护作用,并通过检测肝纤维化相关因子探讨其机制.方法:将40只1.3拷贝HBV转基因BALB/C小鼠随机分为4组.对照组以生理盐水灌胃;模型组以体积分数为50％的白酒5mL/kg灌胃,1次/d;拉米夫定组在模型组处理基础上以拉米夫定溶液(100 mg/kg)灌胃,1次/d;水飞蓟素组在模型组处理基础上以水飞蓟素溶液(200mg/kg)灌胃,1次/d.10周后荧光定量PCR检测各组小鼠血清HBV-DNA载量,全自动生化仪检测血清ALT和AST水平.HE染色,Masson染色镜检观察肝组织病理变化,荧光实时定量PCR检测肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7,结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF) mRNA表达水平,免疫组织化学检测肝组织TGF-β1,CTGF,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平.结果:与对照组相比,模型组肝组织病理损伤加重,血清HBV病毒载量,ALT和AST水平明显增高,肝组织内TGF-β1,Smad3,Smad7,CTGF mRNA及TGF-β1,CTGF,α-SMA蛋白表达增加(P＜0.05).与模型组相比,拉米夫定组和水飞蓟素组肝组织病理损伤均减轻,肝组织内TGF-β1,Smad3,CTGF mRNA及TGF-β1,CTGF,α-SMA蛋白表达减少(P＜0.05),Smad7 mRNA的表达进一步增加(P＜0.05),水飞蓟素组血清ALT和AST水平降低(P＜0.05).结论:拉米夫定和水飞蓟素可通过调节TGF-β1/Smads信号通路,减少CTGF表达,抑制肝星状细胞活化等机制阻断酒精刺激的HBV转基因小鼠肝组织纤维化的发生和进展.
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β-catenin、Smad3及TGF-β1在宫腔粘连患者子宫内膜组织中的表达及意义
目的 研究β-catenin、Smad3及TGF-β1在宫腔粘连(IUA)患者粘连组织中的表达水平,探讨其在IUA中的作用机制.方法 选择 2014年5月至2016年5月在乌鲁木齐市妇幼保健院行宫腔镜下宫腔粘连松解术的IUA患者 60 例为实验组,常规行宫腔镜检查患者60例为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测实验组 IUA 患者的粘连组织、靠近粘连的子宫内膜和对照组的正常子宫内膜组织中β-catenin mRNA、Smad3mRNA及TGF-β1 mRNA的表达水平.结果 对照组患者正常子宫内膜组织中与实验组轻度、中度、重度IUA患者粘连组织中的β-catenin mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1 mRNA的表达比较,从低到高依次排序:对照组<实验组轻度粘连<实验组中度粘连<实验组重度粘连,对比差异有统计学意义(F值分别为20.35、19.62、22.32,均P<0.05),β-catenin mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1 mRNA在实验组IUA 患者粘连组织、靠近粘连的子宫内膜中的表达均高于对照组正常子宫内膜,差异有统计学意义(P值分别为0.038、0.003、0.004);β-catenin mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1 mRNA在粘连组织中的表达高于靠近粘连的子宫内膜,差异有统计学意义(P值分别为0.016、0.001、0.008).在IUA患者粘连组织中TGF-β1与Smad3的表达呈正相关(rs=0.44,P=0.01);TGF-β1与β-catenin 的表达亦呈正相关(rs=0.42,P=0.02);Smad3与β-catenin的达无相关性(rs=0.037,P=0.85).结论 在 IUA 中 β-catenin 、TGF-β1及Smad3的高表达可能与宫腔粘连的发生有密切相关;β-catenin和TGF-β1/Smad通路可能协同参与子宫内膜纤维化及促进宫腔粘连的形成.
关键词： 宫腔粘连 β-连环蛋白 TGF-β1/Smad 纤维化
