首页 > 文献资料
-
针刺大鼠心经神门与少海对补阳还五汤抗脑缺血作用及成分代谢的影响
目的:通过针刺大鼠心经神门与少海两穴,观察其对补阳还五汤成分抗脑缺血作用及代谢影响,验证“穴药”法能研究中药归经及经络脏象的可行性;方法:采用改良栓线法制备大鼠脑缺血模型;针刺大鼠心经的神门与少海;观察补阳还五汤的药效指标及代谢指纹图谱的变化.采用高效液湘法建立血液指纹图谱并用相似度评价法进行评价.结果:与对照组比较,针刺药物组与药物组的谷氨酸(GLU)、白细胞介素-6(IL-6)、乳酸脱氢酶(LDH)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、热休克蛋白70(HSP70)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)均产生显著性的变化,其中VEGF、TGF-β 1上调,IL-6、LDH、GLU、γ-GABA、HSP-70、NO、TNF-α下调,说明针刺药物组及药物组能使缺血性脑组织血管新生、兴奋性氨基酸的毒性、神经损害、氧自由基损伤、炎症反应等降低,神经功能改善,其中针刺药物组更为明显;针刺药物组内、药物组内、对照组内、针刺药物与药物组间、针刺药物与对照间组、药物与对照组间的补阳还五汤指纹图谱或血液指纹图谱的相似度为0.1711-0.6041,各组间、组内差异显著(P＜0.01),针刺能明显改变补阳还五汤代谢,促进其向对照组方向代谢.结论:针刺经络腧穴能调整脏腑功能,改变药物对其作用与代谢规律, “腧穴针刺作用-经络脏腑功能-药物作用与代谢”存在一定的印迹规律,据此可建立中药归经与经络脏象研究的“穴药”法.
-
代谢指纹图谱分析技术及数据处理方法研究进展
代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后的一门新兴学科,旨在系统研究机体代谢产物的变化规律,揭示机体生命活动代谢本质,尤其在现代药理研究中发挥重要作用.代谢指纹图谱分析(metabolic finger printing analysis)是对所有代谢物整体进行高通量的代谢分析的方法,研究药物本身、机体本身及药物引起的机体内源性代谢物的变化,找出与之相关的生物标志物,因此可以更直接地反映体内状态的动态变化,阐明药物及疾病作用机制.该文综述了目前用于代谢指纹图谱的一些新的分析手段和数据处理方法,阐述其优缺点,并展望了其与中医药研究相结合,有望促进中医药复杂理论体系研究新方法和新途径产生的发展前景.
-
脾气虚证大鼠尿液生物标记物的识别及其生物学意义
考察脾气虚证大鼠尿液小分子代谢组成分,寻找脾气虚证的标记物,阐明其与代谢通路之间的联系.采用劳倦伤脾加限制饮食的方法构建大鼠脾气虚证动物模型,分别进行D-木糖吸收实验及血常规检测.收集的尿液采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)分析,尿液代谢指纹图谱数据集进行主成分分析(PCA)和正交偏小-判别分析(OPLS-DA)等统计学分析,筛选脾气虚证的生物标记物.D-木糖和血常规测定结果表明脾气虚证大鼠造模成功.正、负离子模式下的PCA,OPLS-DA得分图显著区分模型组和空白组.根据OPLS-DA分析的S-plot图、VIP值、t检验及受试者特征曲线ROC下的面积(AUC),筛选并鉴定出苯丙氨酸、琥珀酸、乌头酸、异柠檬酸、甜菜碱、犬尿酸、吲哚、肌酸、肌酸酐、乳清酸、黄嘌呤、黄嘌呤酸等24个脾气虚证相关的生物标记物,主要涉及能量代谢、氨基酸代谢、色氨酸代谢、嘌呤代谢、嘧啶代谢.尿液代谢组学方法结合在线软件包进行数据处理解析代谢通路,可为脾气虚证及其他中医证候的研究提供新的方法和思路.
关键词： 脾气虚证 代谢组学 代谢指纹图谱 超高效液相色谱-飞行时间质谱联用 生物标记物 -
川乌与白芍配伍对CYP450酶活性影响及其代谢指纹的研究
利用UPLC-MS/MS的多反应监控(MRM)技术,结合多探针底物方法,评价川乌-白芍配伍对肝脏主要药物代谢酶CYP 1A2、CYP 2C、CYP 2E1、CYP 2D、CYP 3A的活性影响.结果表明:与川乌单煎液相比,白芍与川乌不同配比溶液均能降低川乌对CYP3A、CYP2D、CYP2C及CYP1A2的抑制作用,而对CYP2E1基本无影响.制川乌组分-白芍配伍溶液的CYP代谢指纹图谱分析结果表明,与川乌单煎液相比,共煎液经CYP代谢后双酯型生物碱的丰度明显降低,而单酯型生物碱的丰度明显增加.表明白芍与川乌共用,能使川乌中的双酯型毒性生物碱加快降解,生成抗炎活性较好的单酯型生物碱,起到减毒增效的作用.
-
基于衍生化反应和GC - MS技术测定大鼠血液和尿液中内源性代谢物轮廓谱
目的:建立基于硅烷基衍生化反应的气相色谱-质谱联用技术( GC - MS)的代谢组学测定方法,初步研究大鼠血液和尿液中内源性代谢物轮廓谱.方法:通过硅烷基化反应,将生物样品中的氨基酸、脂肪酸、有机酸、糖类和固醇类物质制成热稳定性强、易挥发的硅烷酯或醚,通过优化色谱条件对大鼠血液和尿液中的内源性代谢物进行分析测定.结果:通过优化衍生化条件和色谱条件,建立了佳的GC - MS测定方法,并进行了方法学考察.获得了大鼠尿液和血液中的内源性代谢物轮廓谱,并鉴定了其中23个主要色谱共有峰.结论:优化的衍生化方法结合GC - MS技术可以从代谢水平对内源性代谢物进行分析,为后期的病理模型中内源性生物标志物的发现提供佳的测定技术和方法.
关键词： 代谢指纹图谱 气相色谱-质谱联用(GC - MS) 血液 尿液 -
CS-HPLC-ESI-MSn法分析复方丹参滴丸的代谢指纹图谱
目的:建立舌下含服复方丹参滴丸后人血浆中活性成分的代谢特征指纹图谱.方法:在不同时间点采集人血浆样品,通过微血管张力实验测试血管扩张效果,采用柱切换系统对样品进行富集纯化.结果:1.5h采集的血浆扩张血管能力强,在色谱图中出现5个新的色谱峰.结论:色谱图中5个特征色谱峰与复方丹参滴丸的药效物质基础关系密切.
-
指纹图谱在中药质量控制中的应用进展
本文综述了化学指纹图谱、生物指纹图谱及代谢指纹图谱在中药质量控制研究中的应用.化学指纹图谱已经发展比较成熟,并广泛应用于中药及其制剂的定性、定量研究中;生物指纹图谱和代谢指纹图谱与中药的药效活性相关,其发展尚处于起步阶段.但已经越来越受到人们的重视;建立从原料、中间体到制剂的包括化学与药效学信息的多维多息指纹图谱已经成为解决中药目前"信任危机"有效的手段.
-
基于UPLC-MS/MSE方法研究马兜铃酸肾病大鼠的血清代谢组学
目的:基于超高效液相色谱-四极杆时间飞行高清质谱串联(UPLC-QTOF/HDMS)-代谢组学方法研究马兜铃酸Ⅰ诱导的马兜铃酸肾病(AAN)的代谢指纹图谱.方法:基于UPLC-QTOF/HDMS的代谢组学方法测定AAN大鼠血清,质谱数据采用MarkerLynx软件处理,然后使用主成分分析和正交校正的偏小二乘判别分析法分析AAN模型组和正常对照组之间的代谢物谱差异,并通过S-plot图选取潜在的生物标示物,通过精确分子量、同位素分布、MSE信息和对照品对照,再通过检索HMDB等数据库对潜在的生物标示物进行鉴定.结果:用代谢组学方法鉴定了10个生物标示物,马兜铃酸Ⅰ上调了鹅去氧胆酸、胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、硫酸对甲酚、肌酐、7-酮基脱氧胆酸、硫酸吲哚酚和12-酮基脱氧胆酸,同时下调了溶血卵磷脂(15∶0)和溶血卵磷脂(17∶0).结论:马兜铃酸诱导的肾损伤干扰了磷脂、胆汁酸、氨基酸的代谢.基于UPLC-QTOF/HDMS代谢组学法能够应用于马兜铃酸诱导的AAN的研究.
