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降脂宁调血脂及抗脂质过氧化作用的实验研究
目的:观察降脂宁提取物及其分离部位对高脂血症大鼠的调血脂及抗脂质过氧化作用.方法:用高脂饲料喂养大鼠4周.建立实验性高脂血症大鼠模型,给予降脂宁提取物及其分离部位十预6周后,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;测定血浆内皮素-1(ET-1)、血清一氧化氮(NO)含量及总一氧化氮合酶(NOS)活力;血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及总抗氧化能力(T-AOC)的变化.结果:降脂宁提取物及其分离部位能降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.05或P<0.01),升高HDL-C水平(P<0.05);降低ET-1分泌,增加NO释放及总NOS活力;使MDA水平降低,提高SOD及T-AOC活力.结论:降脂宁提取物及其分离部位对高脂血症大鼠有调节血脂、保护血管内皮和抗脂质过氧化作用,且两者作用具有等效性.
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降脂宁水提取剂对高脂血症大鼠肝细胞基因表达的影响
目的:研究降脂宁水煎剂对高脂血症大鼠肝脏LDLR基因表达的影响.方法:雄性Wistar大鼠,高脂饲料喂养造成高脂血症模型,降脂宁水煎剂(200%)1.4 gkg-1灌胃给药,每天1次,连续15 d.取其肝组织采用斑点探针杂交法检测LDLR mRNA,以LDLR mRNA与β-actin mRNA比值表示LDLR基因表达水平.结果:各组动物肝LDLR基因表达水平依次为正常组(100±19)%,高脂血症组(39±14)%,两组比较有明显差异(P<0.05),降脂宁组(108±8)%,与高脂血症组比较,差异非常显著(P<0.01).结论:高脂饲喂大鼠可显著抑制其肝脏LDLR基因的表达,而降脂宁水煎剂可显著上调高脂血症大鼠肝脏的LDLR基因表达水平.这一结果提示降脂宁对于预防和治疗心脑血管疾病可能有重要的研究和开发价值.
关键词: 降脂宁 肝细胞 低密度脂蛋白受体基因 -
降脂宁血中移行成分归属研究
目的:研究降脂宁(由制首乌、山楂、决明子和荷叶4味中药组成的复方制剂)Beagle犬灌胃给药后血中移行成分及其归属.方法:通过建立灌胃降脂宁后Beagle犬血浆HPLC图谱,比较降脂宁各单味药、给药及未给药Beagle犬血浆的HPLC图谱,结合色谱峰保留时间和紫外光谱分析,确认灌胃降脂宁后Beagle犬血中移行成分及其来源药味.结果:降脂宁给药后血浆中出现了24个移行成分,其中8个为降脂宁的原型成分,16个为代谢产物.结论:对降脂宁Beagle犬灌胃给药后血中移行成分及其代谢产物的研究有助于阐明其药效物质基础.
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降脂宁有效部位及其药效组分对脐静脉内皮细胞损伤的保护作用
目的 观察降脂宁有效部位及其药效组分对氧化损伤的脐静脉内皮细胞(HUVECs)EAHY926的保护作用.方法 体外培养EAHY926,建立氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)氧化损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定内皮细胞活力;检测细胞培养液中一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)含量;细胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD) 活力及总抗氧化能力(T-AOC).结果 降脂宁有效部位及其药效组分能够提高氧化损伤的内皮细胞活力,增加NO释放,使ET-1和MDA水平降低,提高SOD及T-AOC活力.结论 降脂宁有效部位及其药效组分对Ox-LDL所致内皮细胞损伤有保护作用.
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HPLC法测定降脂宁调脂抗氧化有效部位中4种蒽醌类成分的含量
目的 建立降脂宁有效部位中4种蒽醌类成分橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的HPLC含量测定方法.方法 采用SunFire C_(18)柱(150 mm × 4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长285 nm.结果 橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚平均回收率分别为98.69%、99.97%、97.98%和99.20%,RSD分别为2.20%、1.18%、2.27%和1.15%.结论 3批样品测定结果表明,该方法简便、准确,可用于降脂宁有效部位中4种葸醌类成分的含量测定.
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基于降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱的多指标成分定量方法研究
目的 建立以降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱参照峰为基准,计算多指标成分含量的定量方法.方法 建立降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱,以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为对照品,以其色谱峰为基准,计算主要色谱峰相对含量.结果 确定10个色谱峰为多成分定量指标,计算3批降脂宁调脂抗氧化有效部位中10个成分的总量,以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷计分别为12.40%、12.44%和11.85%.结论 建立的多指标成分定量方法简便、可行,可作为降脂宁调脂抗氧化有效部位质量控制和评价方法之一.
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降脂宁有效部位及其药效组分对胆固醇代谢的影响
目的 探讨降脂宁有效部位及其药效组分对人肝细胞Bel-7402胆固醇代谢的影响.方法 体外培养人肝细胞株Bel-7402,待细胞长满80%后用无血清培养基饥饿细胞24 h,加入降脂宁有效部位及其药效组分和阿托伐他汀,高效液相色谱法(HPLC)和分光光度法检测给药24 h后细胞内胆固醇及胆汁酸含量;逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测细胞内低密度脂蛋白受体(LDL-R)和3羟基-3甲基-戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)、7α-羟化酶(CYP7A1) mRNA表达水平.结果 降脂宁有效部位及其药效组分和阿托伐他汀均能够降低细胞内胆固醇含量,增加细胞内胆汁酸含量,提高LDL-R及CYP7A1 mRNA表达水平,降脂宁有效部位及其药效组分高剂量组能够提高HMG-CoAR mRNA表达.结论 降脂宁有效部位及其药效组分可以抑制胆固醇合成并促进其转化,其机制可能与影响细胞胆固醇代谢相关受体和酶mRNA表达水平有关.
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基于调脂抗氧化有效部位的降脂宁HPLC指纹图谱研究
目的:建立基于调脂抗氧化有效部位的降脂宁颗粒(山楂、制首乌、决明子和荷叶)HPLC指纹图谱.方法:HPLC方法采用Agilent Te-C18色谱柱,流动相为0.01%甲酸水溶液-乙腈.梯度洗脱模式,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,参照物2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D葡萄糖苷,并对指纹峰进行归属.结果:降脂宁调脂抗氧化有效部位指纹图谱有29个共有色谱峰,其中峰1~4,8,9来自山楂;峰20~29来自决明子;峰5,6,11~13,15,17~19来自荷叶;峰7,10,14,16来自制首乌.同批次药材和不同批次药材制备的降脂宁调脂抗氧化有效部位指纹图谱相似度分别均在0.99和0.90以上.结论:建立基于调脂抗氧化有效部位的降脂宁HPLC指纹图谱是可行的,该方法准确,稳定,重复性好,能够以调脂抗氧化活性为基础,有效控制降脂宁质量.
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降脂宁颗粒降脂与抗氧化作用研究
目的 研究降脂宁颗粒的降血脂与抗氧化作用.方法 灌服高脂乳剂建立大鼠高脂血症模型,同时灌服降脂宁颗粒,15 d后取血和肝脏,测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-Px)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、清蛋白(ALB).结果 降脂宁颗粒能明显降低高脂血症大鼠血清TG、MDA,明显升高血清HDL-C,GSH-Px.结论 降脂宁颗粒有明显降脂作用,其降脂作用可能是通过提高机体抗氧化能力,清除体内过多自由基,降低脂质过氧化反应来实现.
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降脂宁有效部位中芪多酚和金丝桃苷的含量测定
目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定降脂宁有效部位中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(SBGC)和金丝桃苷的含量。方法采用大连依利特 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(15.5:84.5);流速1.0 mL · min-1,检测波长340 nm,进样量20μL。结果 SBGC 和金丝桃苷分别在24~120μg·mL-1(r=0.9998)和2.4~12.0μg·mL-1(r=0.9996)范围内呈良好的线性关系。平均回收率分别为100.07%和100.14%,样品中 SBGC 和金丝桃苷的含量分别是2.26%和0.23%。结论该测定方法简便、快速、准确,可应用于降脂宁提取物中 SBGC 和金丝桃苷的含量测定。
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化痰降脂汤加减治疗高脂血症39例疗效观察
目的:观察化痰降脂汤加减对高脂血症的临床疗效,并与中成药降脂宁散作疗效比效.方法:将78例符合入选条件的高脂血症患者,随机分为治疗组与对照组各39例.治疗组用化痰降脂汤随证加减治疗,1剂/d,分2次服;对照组服中成药降脂宁散,3次/d,1包/次.2组均以20 d为1疗程,3个疗程后评价疗效.结果:显效率与总有效率,治疗组为30.7%与84.6%;对照组为18.0%与64.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效优于对照组.结论:化痰降脂汤加减治疗高脂血症有较好效果.
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降脂宁调脂及抗动脉粥样硬化的研究
目的:研究降脂宁水煎剂调脂及抗动脉粥样硬化(AS)的作用.方法:鹌鹑高脂饲料喂饲造成高脂及AS模型,降脂宁灌胃45天,取血测定血脂、血脂蛋白及载脂蛋白,取横膈段主动脉,观察内膜下及中膜组织内脂肪颗粒.结论:降脂宁水煎剂可明显降低鹌鹑血清TC、TG、LDL-C浓度,提高HDL-C、Apo-AI、Apo a/b水平,减轻高脂饲料对鹌鹑主动脉内膜的损伤,提示降脂宁水煎剂有调脂及抗动脉粥样硬化的作用.
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HPLC测定降脂宁胶囊中的红镰霉素龙胆二糖苷
目的 采用HPLC法测定降脂宁胶囊中红镰霉素龙胆二糖苷的含量.方法 采用SunFire C18色谱柱(150 mm×4.6mm,5μm),柱温35℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(18∶82),流速1.0 mL·min-1,检测波长278nm.结果 红镰霉素龙胆二糖苷的平均回收率为99.42%,RSD =2.99%.结论 所用方法简便、准确,可用于降脂宁胶囊的质量控制.
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降脂宁有效部位提取纯化工艺研究
目的 研究降脂宁有效部位佳提取纯化工艺,为降脂宁的进一步研究和开发利用提供依据.方法 采用比色法测定总黄酮、总蒽醌和总生物碱的含量,用 HPLC法测定2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量,正交实验设计优选佳提取工艺,单因素考察法筛选降脂宁有效部位大孔吸附树脂纯化工艺.结果 降脂宁有效部位的佳提取工艺:药材用10倍量体积分数为70% 的乙醇回流提取3次,每次1.5 h;降脂宁有效部位的佳纯化工艺为:X-5型大孔吸附树脂,上样液质量浓度为0.1 g·mL -1,树脂柱径高比为1:9,除杂溶剂为5 BV水,洗脱溶剂为体积分数50% 乙醇,洗脱体积7 BV,洗脱流速为4 BV·h-1.结论 该工艺操作简单、稳定可行、重复性较好,可用于降脂宁有效部位的制备.
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HPLC法测定降脂宁调脂抗氧化有效部位中金丝桃苷和异槲皮苷含量
目的:建立降脂宁有效部位中金丝桃苷和异槲皮苷的HPLC含量测定方法.方法:采用SunFire C<,18>色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温35℃,流动相为乙腈-0.01%甲酸水溶液(15:85,v/v),流速为0.8 mL·min<'-1>,检测波长354 nm.结果:金丝桃苷、异槲皮苷平均回收率分别为100.0%和99.8%,RSD分别为2.6%和2.5%.结论:3批样品测定结果表明,该方法简便、准确,可用于降脂宁有效部位中金丝桃苷和异槲皮苷的含量测定.