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  • 阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

    作者:罗润齐;叶晓光;潘建刚;陈志伟;周芸;蔡志群

    目的 分析2010至2012年广州医学院第二附属医院阴沟肠杆菌的临床分布及耐药情况.方法 收集2010年8月至2012年8月本院细菌室检测的痰、尿、脓液或创口分泌物、胆汁、血液及其他体液样本,从中分离出97株阴沟肠杆菌并经VITEK 2 Compact细菌鉴定仪鉴定.分析阴沟肠杆菌在各科的分布情况.采用K-B纸片法进行药敏试验,再用双纸片法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL).结果 阴沟肠杆菌主要分布于呼吸科、肝胆外科和新生儿科,分别占12.4%、11.34%、2.06%;其中46株来自于痰,占47.42%,其次为尿、脓液或创口分泌物,均为12株,各占12.37%.标本中阴沟肠杆菌ESBL阳性株对亚胺培南耐药率低为0,对头孢吡肟、丁胺卡那耐药率为14.29%、4.76%,与ESBL阴性株耐药率差异无统计学意义;对氨苄西林、头孢噻肟、氨曲南耐药率为100%、95.24%、100%,明显高于ESBL阴性株的耐药率.结论 阴沟肠杆菌多药耐药现象较为严重,应加强耐药性监测,指导临床医师合理使用抗菌药物.

  • 基因型分析法快速检测耐药结核分枝杆菌

    作者:石瑞如;高飞絮;沈青玉;黄祖峰;秦殊;王伟;张国龙

    目的 探讨基因型分析法检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的价值.方法 采用多重PCR和线性探针反向膜杂交法来检测异烟肼耐药基因katG S315T和inhA C-15T突变以及利福平耐药基因rpoB D516V,H526Y,H526D,S531L突变来判断78株结核分枝杆菌临床分离株的耐药性,并与金标准L-J固体培养基药敏法以及BACTEC960液体培养药敏法进行对比分析.结果 基因型分析法在6h内可以完成;结核分枝杆菌常规药敏检测需要3个月.与后者相比,基因型分析法检测异烟肼耐药的敏感性和特异性分别为89% (16/18)和99% (77/78);检测利福平耐药的敏感性和特异性均为100%(13/13,78/78).结论 基因型分析法检测结核菌耐药性快速准确,对耐药结核病的早期诊断和治疗很有帮助,有望在临床实验室广泛开展.

  • 变性高效液相色谱法检测结核分枝杆菌gyrA基因突变

    作者:石瑞如;张健源;李传友

    目的 分析我国结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药基因gyrA突变的特点并探讨变性高效液相色谱法(DHPLC)的应用价值.方法 以结核分枝杆菌临床分离株109株(常规药敏试验显示87株氧氟沙星耐药,22株敏感)为对象,测定氧氟沙星小抑菌浓度(MIC),同时进行gyrA基因氟喹诺酮类耐药决定区域(QRDR)DNA测序及DHPLC分析.结果 发现我国耐氧氟沙星结核分枝杆菌近来出现两个新的特点:一是gyrA QRDR双位点突变率高(87株耐药株中56.3%携有双位点突变);二是出现了以往认为的仅存在于其他细菌而在结核分枝杆菌中从未报道过的Ala74Ser突变(49株双位点突变耐药株中有20.4%携有该突变).gyrA基因突变类型与MIC之间并无密切关系.DHPLC测定中除常规的M.tb H37Rv以外还引入了M.tb Erdman做为参照菌株,成功地摆脱了95位AGC:ACC自然多态性的影响.与测序法相比较,DHPLC法的敏感度与特异度均达100%.结论 我国结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药已很严重,gyrA基因QRDR双位点突变率高为其特点.本研究建立的结核分枝杆菌gyrA基因突变的DHPLC分析法简便快速,稳定灵敏,在大面积大样本耐药监测以及临床快速药敏检测中有应用价值.

  • 硝酸盐还原试验快速检测结核分枝杆菌的耐药性

    作者:罗开军;王晓红;侯娟;肖政;李辉

    以绝对浓度法为"金标准",对已知耐药浓度的耐药结核分枝杆菌菌株及敏感株采用硝酸盐还原试验检测其耐药性.结果与绝对浓度法比较,硝酸盐还原试验的敏感性≥96.5%,特异性为100%,符合率为97.5%~100%,且比绝对浓度法平均提前3周观察到结果.

  • 注射用头孢拉宗钠的体内外抗菌活性研究

    作者:白小刚;胡辛欣;李聪然;杨信怡;张伟新;娄人慧;游雪甫

    目的 评价注射用头孢拉宗钠的体内外抗菌活性.方法 选取663株临床分离致病菌为实验菌,以头孢美唑、头孢西丁、头孢替坦、头孢米诺、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢吡肟为对照药物,分别采用平皿二倍稀释法测定药物低抑菌浓度(MIC)、低杀菌浓度(MBC)、绘制杀菌曲线(KCs)并行诱导耐药实验,观察头孢拉宗的体外抗菌作用;建立小鼠腹腔感染模型,评价头孢拉宗皮下给药对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌感染小鼠的体内疗效.结果 头孢拉宗对多种革兰阴性菌具有较高的抗菌活性,尤以对大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的抗菌活性更为突出,其MIC50、MIC90分别为0.5、8μg/ml,对产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的抗菌活性也较强,其MIC50、MIC90分别为4、8 μg/ml;头孢拉宗对革兰阴性菌的抗菌作用大多优于头孢西丁、头孢美唑、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢替坦和头孢呋辛,而对革兰阳性菌的抗菌活性较弱,与头孢替坦和头孢米诺相近.MBC和KCs测定结果表明,头孢拉宗对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌均具有杀菌作用.以1/4 MIC剂量诱导20 d后,头孢拉宗对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的抗菌活性无明显改变.头孢拉宗皮下给药对大肠埃希菌ATCC25922、大肠埃希菌1515、肺炎克雷伯杆菌7、肺炎克雷伯杆菌9613感染小鼠的体内疗效明显优于头孢美唑和头孢唑啉(均P<0.01);对金黄色葡萄球菌感染小鼠的体内疗效与头孢美唑相近(P>0.05),但弱于头孢唑啉(P<0.01).结论 注射用头孢拉宗钠对多数革兰阴性菌,特别是大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌具有较强的体外抗菌活性;同时对大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌腹腔感染小鼠的体内疗效也较好.

  • 提高可利霉素药代动力学研究中微生物法检测灵敏度的研究

    作者:戴剑漉;赵小峰;赫卫清;贾晓宇;李慧宁;王以光

    目的:研究影响可利霉素微生物法检测敏感度的因素,以提高血浆中测定可利霉素的灵敏度,为药代动力学研究中血药浓度的测定奠定基础。方法采用管碟法和纸片法,以抑菌圈大小为指标,考察检定菌液浓度,培养基配方,单、双层培养基检定平板,缓冲液加 NaCl,胎牛血清,血浆等多种因素对检测灵敏度的影响;采用有机溶剂从人血浆中萃取可利霉素等方法测定血药浓度。结果检定菌浓度、培养基配方、检定平板厚度对检测灵敏度影响显著,含 NaCl 的缓冲液有利于提高检测灵敏度,人血浆对检测灵敏度有一定影响。以藤黄八叠球菌作检定菌,其菌浓为 OD600=0.3~1.0,采用含牛肉蛋白胨0.5%,牛肉浸膏0.25%检定培养基制备单层检定平板,可以有效提高可利霉素检测灵敏度6倍;从血浆中萃取可利霉素,用纸片法进行测定,其低检测限度可达0.02μg/ml。结论所建立的从血浆中萃取可利霉素的纸片法显著提高了微生物法检测血浆中可利霉素的灵敏度,可用于可利霉素药代动力学研究中血药浓度的微生物法检测。

  • 三种乙型肝炎病毒拉米夫定耐药突变的酶切分析方法及其应用

    作者:孙剑;侯金林;肖蕾;王战会;章廉;骆抗先

    目的建立三种乙型肝炎(乙肝)病毒拉米夫定耐药突变的酶切分析方法,了解这三种耐药突变在拉米夫定治疗患者中的发生情况.方法设计3对HBV P基因引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,应用Nde Ⅰ和Nla Ⅲ两种限制性内切酶对PCR产物进行酶切,酶切产物用电泳加以分析.应用此方法检测70例拉米夫定治疗的慢性乙肝患者中3种拉米夫定耐药突变的发生情况.结果 Nde Ⅰ和Nla Ⅲ两种限制性内切酶对PCR产物进行酶切可有效区分HBV野株和YMDD(酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸)变异株,并确定是YI(异亮氨酸)DD或YV(缬氨酸)DD变异.用Nla Ⅲ内切酶对PCR扩增产物酶切可有效区分HBV野株和L526M(第526位氨基酸由亮氨酸变为蛋氨酸)变异株.利用此方法发现11例患者在服用拉米夫定过程中出现耐药突变,其中YIDD变异6例,YVDD变异5例,后者有1例伴有L526M点突变.结论本方法只需应用常规PCR和酶切技术,既可有效筛检出YMDD变异株标本,还可以确定属于YIDD还是YVDD变异,或是否伴有L526M点突变等,均可作为临床监测拉米夫定耐药性的参考.

  • 神经外科病房铜绿假单胞菌耐药性监测

    作者:李三中;冶刚

    目的 了解2008年10月至2009年10月神经外科监护病房患者铜绿假单胞菌的药敏及耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 菌种经珠海DLMedcal-96细菌测定系统进行鉴定,及该系统肠杆菌属随机体外诊断试剂板进行药敏试验,并作统计分析.结果 本院神经外科病房共检出264株病原菌,其中铜绿假单胞菌分离出92株34.85%(92/264),为第一病原检出菌.铜绿假单胞菌对21种抗生素耐药较低的依次为头孢他啶、亚胺培南、美罗培南(均为6.52%)、粘菌素、多粘菌素B(均为8.70%)、左氧氟沙星(17.39%)、头孢吡肟(21.74%)、环丙沙星、氨曲南(均为23.91%)、哌拉西林/他唑巴坦(26.09%)、头孢哌酮/舒巴坦(30.43%)、头孢噻肟(36.96%).耐药较严重的抗生素为氯霉素(86.96%)、复方新诺明(95.65%).结论 临床应重视药敏试验结果, 并及时对耐药结果统计分析,严格控制抗菌药物的使用.

  • 生殖道支原体感染262例药敏分析

    作者:李珍宇

    目的 了解本院生殖道支原体感染常用抗菌药物的耐药性,合理选择抗生素.方法 采用支原体药敏检测试剂盒进行解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)培养,鉴定和药敏检测.结果 在262例支原体培养阳性病例中,UU阳性224例(85.5%),MH阳性4例(1.5%),UU、MH混合感染34例(13.0%).药敏试验结果显示,UU对交沙霉素的敏感率为94.6%,对强力霉素、阿齐霉素的敏感率都为92.0%,其次是克拉霉素敏感率为85.3%,美满霉素敏感率82.6%.MH对交沙霉素、强力霉素、美满霉素敏感.UU+MH混合感染以强力霉素、交沙霉素敏感.UU和MH无论是单一感染还是混合感染,对红霉素、环丙沙星耐药性高.结论 生殖道支原体治疗以四环霉素及大环内脂类药物为敏感,首选药物以交沙霉素、强力霉素、阿齐霉素、美满霉素为主,开展体外药敏试验,根据试验结果合理选择治疗药物.

  • 不孕妇女支原体感染现状及药敏分析

    作者:万德胜

    目的 探讨不孕妇女支原体感染现状及药敏情况.方法 对我院就诊197例不孕妇女进行生殖道支原体培养和药敏分析,支原体采用法国生物梅里埃Biomerieux公司的IST试剂盒,按说操作.结果 支原体培养阳性91例(46.19%),单一解脲支原体(Uu)感染85例(43.38%)单一人型支原体(Mh)感染6例(3.05%),Uu和Mh混合感染11例(5.58%).支原体对药物敏感的敏感株比例依次是:交沙霉素85.71%,原始霉素74.73%,强力霉素52.75%,氧氟沙星43.96%,四环素29.67%,低是红霉素19.78%;而耐药性高的耐药株比例依次是:红霉素59.34%,四环素45.05%,氧氟沙星37.36%,强力霉素25.27%,原始霉素23.08%,低的是交沙霉素6.59%.结论 本地区不孕妇女支原体感染率较高,单一解脲支原体感染多见;治疗支原体以交沙霉素为首选药物.

  • 支气管扩张症内科治疗86例临床分析

    作者:邓晓琴;杨智

    目的 了解支气管扩张症病人痰标本致病菌及其药物敏感性试验情况,为临床用药提供依据.方法 对2000~2005年我院呼吸内科收治的86例支气管扩张症病人痰标本病原菌分布情况及抗生素的敏感性分离测定,并对革兰阴性菌株进行超广谱β内酰胺酶(ESBLs)检测.结果 革兰阴性菌75株中产ESBLs菌10株,占10.9%;革兰阳性菌7株,占7.6%.药物敏感性测定显示菌株对亚胺培南,第三、四代头孢菌素及氟喹诺酮类抗生素敏感性较高,氨基糖甙类抗生素中阿米卡星敏感性较高,对其他药物敏感性较低.结论 支气管扩张症病人痰标本病原菌分布以革兰阴性菌为主,第三、四代头孢菌素及氟喹诺酮类药物可作为支气管扩张症治疗经验用药的首选.

  • 中药莪术油对肺炎支原体地方株的体外抑制实验研究

    作者:辛德莉;侯安存;李靖

    目的测定中药莪术油、红霉素对肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)地方株的体外抑制情况.方法采用肉汤倍比稀释方法,在微生物敏感性体外实验中分别测定莪术油对肺炎支原体地方株的小抑菌浓度(mioimal inhibitory concentration,MIC)、红霉素的MIC和莪术油联用红霉素时其各自的MIC.结果体外实验中莪术油对肺炎支原体地方株的为MIC 2.5μg/ml,红霉素的MIC 0.025μg/ml.莪术油联用红霉素时其各自的MIC分别为1.25μg/ml和0.00625μg/ml.结论莪术油对肺炎支原体地方株有抑制作用,莪术油与红霉素联用可增加抑菌效果.

  • 舒普深与米诺环素对多重耐药鲍曼不动杆菌联合物敏感性研究

    作者:马全玲;曹阳;陆盈;魏殿军;张坚磊;胡静宜

    目的 了解天津地区鲍曼不动杆菌耐药性现状,探索头孢哌酮/舒巴坦(商品名舒普深)与米诺环素对多重耐药鲍曼不动杆菌的联合药物敏感性,为临床选择用药提供实验室依据.方法 对2007年5月至2008年12月分离自天津地区3家医院患者标本中的116株鲍曼不动杆菌进行耐药谱分析,并对其中的耐舒普深的多重耐药鲍曼不动杆菌进行联合药敏试验.结果 共分离鲍曼不动杆菌116株,其中耐舒普深的多重耐药鲍曼不动杆菌19株,联合药敏试验结果:协同作用11株(57.9%),累加作用6株(31.6%),无关作用2株(10.5%),无拮抗株.结论 目前天津地区鲍曼不动杆菌耐药情况严峻,舒普深与米诺环素联合作用于多重耐药鲍曼不动杆菌有一定的协同作用,可作为临床联合用约的备选药物.

  • 口腔螺旋体对甲硝唑敏感性的临床评价

    作者:范文;成伟

    当前很多国内外学者研究证实,口腔牙周病的发生和发展与口腔微生物有密切的关系,龋齿、牙周炎等口腔常见疾病的发生发展与口腔菌群的数量和组成有关,正常菌群的易位及过度增殖均可导致口腔感染性疾病.因此,应用药物控制其过度增殖和易位,甲硝唑是疗效很高的抗原虫、抗厌氧菌首选药.牙周病是局部感染性疾病,抗菌药物可直接通过牙周袋口进入,同时还避免了全身用药的副作用,又能发挥对口腔微生物抗菌作用.

  • 重症监护病房中常见的3种非发酵革兰阴性杆菌的耐药性分析

    作者:蒋蕾;张之烽

    重症监护病房(ICU)由于其本身的特点,如危重患者多,住院天数长,创伤性插管留置等,使其成为院内耐药菌感染的高发区.近年来的研究表明铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌是ICU感染中常见的3种非发酵革兰阴性杆菌,并且这些细菌耐药性呈现快速增长之势[1].

  • 住院肺结核患者对左氧氟沙星耐药情况分析

    作者:金周德;陈艳萍;韩永德

    本文对2001-02~2005-12在我院住院治疗的肺结核患者中痰结核菌培养阳性同时有左氧氟沙星(LVFX)药敏试验结果者161例进行分析,现将结果报告如下.

  • 泌尿生殖系统支原体体外药敏试验分析

    作者:李克诚

    目的:分析浙江瑞安地区泌尿生殖道支原体感染的检出情况及体外药敏结果.方法:用珠海丽珠公司提供的支原体试剂盒对8 682例怀疑支原体感染的标本进行解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)的培养、鉴定、计数和药敏试验.结果:8 682例标本阳性率29.0%(UU阳性率25.8%,MH阳性率0.41%和UU+MH混合感染阳性率2.86%),其中女性阳性率33.0%,男性阳性率22.6%;UU对强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素、阿齐霉素、氧氟沙星、左旋氧氟沙星、司帕沙星的敏感率分别为94.3%、78.9%、22.6%、82.6%、74.6%、67.0%、14.2%、17.6%、19.6%.结论:浙江瑞安地区泌尿生殖道支原体感染率高,女性高于男性;九种抗生素中强力霉素、美满霉素的敏感性高,氧氟沙星、左旋氧氟沙星、司帕沙星已产生很高耐药性.

  • 泌尿生殖道支原体感染药敏分析及临床治疗观察

    作者:白云花

    目的:了解泌尿生殖道支原体感染药敏情况及临床治疗观察.方法:采用支原体培养、药敏一体化试剂盒对216例临床标本观察,并根据药敏结果治疗90例患者.结果:216例标本支原体阳性率45.37%,其中Uu 37.04%,Mh 2.78%,Uu合并Mh 5.56%.敏感抗生素为美满霉素、强力霉素.治疗1个疗程转阴率76.67%,2个疗程转阴率87.78%.结论:本地区支原体感染者对美满霉素、强力霉素敏感性高.常规口服抗生素使支原体转阴较满意.

  • 2006/2007年我院糖尿病合并泌尿系感染的病原体和耐药性分析

    作者:赵雪松;李鹏

    目的:研究引起糖尿病患者泌尿系感染的常见病原体种类及其耐药性.方法:对我院2006-01/2007-12糖尿病患者合并泌尿系统感染时的病原体种类及其体外抗生素敏感性进行分析.结果:2 a中糖尿病患者合并泌尿系感染共146例,尿培养中共培养出致病菌168株,其致病菌以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药性有不同程度的增加.结论:糖尿病患者合并泌尿系感染要严格控制血糖,合理选用敏感的抗生素,减少并发症发病率.

  • 873株鼠伤寒菌药敏分析

    作者:吴孝田

    鼠伤寒沙门氏菌是小儿腹泻的常见致病菌之一,多通过不洁喂养或不卫生饮食而感染婴幼儿,临床多表现为胃肠炎型.因该菌极易产生耐药性,使抗菌药物疗效较差,病程迁延不愈,成为临床治疗的难点.为解决这一问题,我们对873株鼠伤寒菌药敏现状进行分析,为临床用药提供参考.

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