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体外评价羧甲基壳聚糖超顺磁氧化铁纳米粒的细胞毒性和巨噬细胞的摄取
目的 体外评价自制羧甲基壳聚糖超顺磁氧化铁纳米粒(OCMCS-SPIO-NPs)的细胞毒性和逃避巨噬细胞的吞噬能力.方法 以菲立磁和未包被的超顺磁氧化铁纳米粒为对照,采用四唑盐(MTT)比色法考察OCMCS-SPIO-NPs对LO2细胞(正常肝细胞株)和A549(人肺腺癌细胞株)的细胞毒性;用菲洛嗪法及普鲁士蓝法考察OCMCS-SPIO-NPs纳米粒并评价其体外的抗吞噬能力.结果 SPIO-NPs经羧甲基壳聚糖共价修饰后,对LO2和A549细胞的细胞毒性明显降低,OCMCS-SPIO-NPs的细胞毒性和dextran-SPIO的细胞毒性无显著性差异(P>0.05),其细胞毒性与培养基中SPIO的浓度呈正相关;与3种SPIO纳米粒孵化24h后,RAW264.7细胞内铁含量随培养基中SPIO的含量增加而增加,细胞内铁含量依次为:未包被SPIO-NPs>dextran-SPIO-NPs>CMCS-SPIO-NPs组(P<0.05).结论 超顺氧化铁纳米粒经羧甲基壳聚糖共价修饰后能显著降低细胞毒性和吞噬细胞摄取,提高了生物相容性,显著降低了巨噬细胞对其的摄取.
关键词： 羧甲基壳聚糖超顺磁氧化铁纳米粒 细胞毒性 巨噬细胞摄取 体外 -
龙葵碱诱导人宫颈癌细胞HeLa凋亡的体外实验研究
目的 研究龙葵碱对人宫颈癌细胞系HeLa的凋亡作用及其抑癌机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测龙葵碱对HeLa细胞生长的影响;通过Hoechst33258染色及DNA Ladder研究龙葵碱诱导HeLa细胞凋亡的作用;RT-PCR法检测龙葵碱对环氧合酶(COX-2)表达的影响.结果 龙葵碱可剂量依赖性地抑制HeLa细胞生长,作用48h时,IC50=260μg·mL-1;可诱导HeLa细胞凋亡,荧光染色可见凋亡小体,DNA Ladder显示典型的细胞凋亡梯形条带;可降低COX-2的表达水平.结论 龙葵碱可抑制人宫颈癌细胞HeLa的增殖.诱导细胞凋亡,这可能是龙葵碱抑癌作用的机制之一.
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甘蔗叶提取物的体外抑菌作用研究
目的 研究甘蔗叶提取物的抑菌作用.方法 采用琼脂稀释法对甘蔗叶提取物进行体外抑菌试验.结果 甘蔗叶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和肺炎克雷伯氏菌均有不同程度的抑制作用,对链球菌作用较差.其中,50%和70%醇提物作用效果较好.结论 甘蔗叶提取物在体外有抑菌活性,在抑菌方面有一定的开发前景.
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丹皮酚经皮给药系统的研究
目的 以脂溶性药物丹皮酚为模型药物,制备载药传递体,评价其质量并进行小鼠经皮渗透体外研究.方法 采用薄膜分散-超声法制备丹皮酚传递体;以改进的Franz扩散池进行体外小鼠经皮渗透实验,比较不同处方组成对丹皮酚经皮渗透的影响.结果 丹皮酚传递体为乳白色、近透明的胶体溶液.脂质传递体、普通脂质体和丹皮酚水醇混悬液8 h时的累积渗透率分别为81.22%、49.66%、42.22%.结论 丹皮酚传递体制备工艺简单可行,所制传递体的粒径较小且均匀,并可促进丹皮酚的经皮转运.
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细辛挥发油对颅痛定的裸鼠体外促透的作用
目的 考察细辛挥发油对颅痛定的体外促透皮作用,筛选中药透皮促进剂.方法 采用改良的Franz扩散池进行体外透皮实验,以裸鼠皮肤为渗透屏障、5%氮酮为对照,观察5%细辛挥发油对颅痛定的促透皮作用.采用HPLC法测定颅痛定的含量,计算24 h平均累积渗透量与12 h平均透皮速率常数.结果 15 mg·ml-1颅痛定加入5%细辛挥发油或5%氮酮后,24 h平均累积渗透量分别为5.723×103、4.384×103μg·cm-12 h平均透皮速率常数分别为284.29、223.18 μg·cm-2· h-1;增渗倍数分别为37.09、29.12.与阴性对照组相比,透皮速率常数在数值上差异有非常显著性意义.结论 5%细辛挥发油对颅痛定有较强的促透皮作用,其效果优于5%氮酮.
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榼藤子水溶性提取物的体外抗肿瘤作用
目的观察榼藤子水溶性提取物对3种不同肿瘤细胞株的抑制作用.方法采用噻唑蓝染色法(MTT法),肿瘤细胞株选用人类慢性髓性白血病细胞株(K562)、人类淋巴瘤细胞株(U937)和人早幼粒白血病细胞株(HL60),检测A值,计算抑瘤率.结果榼藤子水溶性提取物对K562、U937、HL60有较强的抑制作用,且呈一定的浓度依赖性,半数生长抑制剂量(IC50)均＜20 μg·ml-1.结论榼藤子水溶性提取物体外实验具有显著的抗肿瘤活性.
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常用第一、二代头孢菌素注射剂体外抗菌活性研究
目的 评价目前临床常用第一、二代头孢菌素对近年临床常见分离菌的体外抗菌活性.方法 采用标准琼脂二倍稀释法;对760株细菌进行了低抑菌浓度(MIC)测定.结果 菌株主要来自2015-2016年间全国18个城市收集临床分离株.对于革兰阴性菌,第二代头孢菌素抗菌作用优于第一代头孢菌素,但对于革兰阳性需氧或厌氧菌,则第一代头孢菌素抗菌作用更优.第一代头孢菌素中,五水头孢唑林和头孢西酮抗菌作用为全面,对甲氧西林敏感葡萄球菌、肺炎链球菌、革兰阳性菌具有较好抗菌作用,其中对甲氧西林敏感葡萄球菌的MIC90值分别为≤1mg/L和≤0.5mg/L,优于头孢拉定.对肠杆菌科细菌中不产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌以及嗜血菌、卡他莫拉菌,五水头孢唑林和头孢西酮也有很好抗菌活性,MIC50值≤4mg/L,MIC90值分别为≤16mg/L和≤32mg/L,优于头孢硫脒和头孢拉定.结论 第一、二代头孢菌素各具特点,且同类药物中不同品种抗菌活性也不尽相同.其中五水头孢唑林抗菌作用较为全面,对革兰阳性、阴性菌均表现出较好抗菌作用,是第一代头孢菌素中临床应用广泛的品种之一.
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四季青水煎液体外抗内毒素、抗菌和体内抗炎作用
目的 研究四季青水煎液的抗内毒素、抗菌和抗炎作用,揭示四季青清热解毒作用的药效学特点.方法 采用体外鲎试剂凝集实验方法检测其抗内毒素作用;采用琼脂二倍稀释法测定四季青水煎液以及与头孢噻肟、左氧氟沙星和庆大霉素联合使用时对25株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-1actamase,ESBLs)大肠埃希菌、非产ESBLs大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);采用二甲苯致小鼠耳廓炎症肿胀法观察其抗炎作用.结果 四季青水煎液在生药浓度6.25～100mg/mL时具有抗内毒素作用;对受试菌株MSSA、MRSA的MIC范围均为8～33mg/mL,对产ESBLs大肠埃希菌及非产ESBLs大肠埃希菌的MIC范围均为33～＞133mg/mL,对铜绿假单胞菌的MIC为33～133mg/mL;与头孢噻肟、左氧氟沙星和庆大霉素联合使用时抗菌活性有相加作用,分级抑菌浓度(fractional inhibitory concentration,FIC)指数范围为0.5＜FIC≤1;在小鼠口服给药剂量1,280～2,000mg/kg时对小鼠耳肿胀具有抗炎作用.结论 四季青水煎液具有较强的抗内毒素作用和一定的抗炎作用,对MSSA、MRSA、产ESBLs大肠埃希菌、非产ESBLs大肠埃希菌和铜绿假单胞菌均具有一定的抗菌活性;与头孢噻肟、左氧氟沙星和庆大霉素联合使用时抗菌活性具有相加作用;其清热解毒功能主要以清热作用为主.
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头孢卡品体外抗菌作用研究
目的 评价头孢卡品对我国近年临床分离致病菌的体外抗菌作用及影响因素.方法 低抑菌浓度(MIC)测定采用标准琼脂二倍稀释法；低杀菌浓度(MBC)测定采用标准肉汤二倍稀释法；杀菌曲线绘制采用菌落计数法.结果 头孢卡品对甲氧西林敏感葡萄球菌以及绝大部分链球菌具有很强的抗菌作用,MIC范围基本在0.125～4mg/L,其对革兰阳性菌的抗菌作用与头孢妥仑相当,优于头孢泊肟和头孢克肟.头孢卡品对肠杆菌科细菌的MIC50值普遍≤1mg/L.与所测第三代口服头孢菌素相比,其抗菌活性与头孢妥仑、头孢泊肟相近,略逊于头孢克肟.头孢卡品对流感嗜血菌和黏膜炎莫拉菌具有很强的抗菌作用,特别对于流感嗜血菌,MIC值小于0.031 mg/L,略优于头孢妥仑,明显优于头孢泊肟和头孢克肟.各影响因素测定结果表明,细菌接种量、培养基pH值及血清含量变化对头孢卡品的MIC值基本无影响,只金黄色葡萄球菌在pH 5.0时,MIC值略有降低.MBC和杀菌曲线测定结果表明,头孢卡品为一时间依赖性杀菌药物.结论 头孢卡品对我国近3年临床分离致病菌仍保持较好体外抗菌活性,其抗菌作用与国外文献报道基本一致,值得进一步研究.
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川贝母止嗽颗粒的体外抗菌作用研究
目的:测定川贝母止嗽颗粒的体外抗菌活性.方法:采用常规琼脂扩散法对质控和标准菌株以及临床分离得到的革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌进行体外抑菌实验,倍比稀释法测定小抑菌浓度(MIC).结果:川贝母止嗽颗粒能够不同程度地对质控和标准菌株,及革兰氏阳性、阴性菌临床分离株发挥体外抑菌作用,MIC范围为13 mg·mL-1～ 3120 mg·mL-1.结论:川贝母止嗽颗粒体外具有较好的抗菌作用.
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非甾体类抗炎药对卵巢癌细胞生长的抑制作用
目的 比较2种非甾体类抗炎药Celecoxib和Aspirin对人卵巢癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响,以及Celecoxib对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤成瘤性的影响.方法 不同浓度Celecoxib和Aspirin作用于卵巢癌细胞不同时间后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法检测卵巢癌细胞的增殖;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;流式细胞技术(FCM)测定卵巢癌细胞凋亡;裸鼠皮下移植瘤实验检测卵巢癌细胞体内成瘤性.结果 Celecoxib和Aspirin均对卵巢癌细胞的增殖有抑制作用,呈剂量依赖关系,且24 h就已表现出较强的抑制SKOV3细胞增殖效应,以Celecoxib作用显著,24 h肿瘤细胞半数抑制剂量(IC50)所需Celecoxib浓度为5×10-5 mol/L,而所需Aspirin浓度约为7×10-3 mol/L; Celecoxib和Aspirin作用后,部分细胞出现形态不规则、细胞浆空泡化,尤以Celecoxib更明显;5×10-5 mol/L Celecoxib和7×10-3 mol/L Aspirin组癌细胞凋亡率分别为47.1%、15.7%,均高于对照组(4.8%,P均＜0.05);3种不同剂量的Celecoxib对裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率分别为25.20%、33.00%、38.60%,尤以Celecoxib 50 mg/(kg·d)组更为明显,且对裸鼠肝肾胃肠等重要脏器无明显影响.结论 Celecoxib和Aspirin均能抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖和诱导其凋亡,且Celecoxib作用强于Aspirin.
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冷循环微波天线对人离体曲张大隐静脉作用的实验研究
目的 研究冷循环微波天线对人离体曲张大隐静脉腔内的作用机制.方法 术中切取下肢大隐静脉曲张患者的大隐静脉主干,直径(6.5±0.5)cm,将其分成每段长10cm,两端细线结扎,腔内注入5ml生理盐水.对照组2组,每组2段；实验组4组,每组12段.将冷循环微波天线插入静脉腔中,分别以不同输出功率(0W、30W和35W)与不同退出速度(5cm/min和10cm/min)退出.用苏木精-伊红染色和透射电镜观察静脉壁的内膜,弹力纤维、胶原纤维、平滑肌细胞和血管外周围组织的病理改变,用游标卡尺测量管腔外径的变化.结果 内膜损伤率:对照组和30W×10cm/min组无内膜损伤,30W×5cm/min组为25％,35W× 10cm/min组为91.67％,35W×5cm/min组为100％,后两组与第1组差异均有统计学意义(P＜0.05),后两组间差异无统计学意义(P＞0.05).外膜损伤率:35W×5cm/min组为41.67％,其余组均无外膜损伤,与对照组差异有统计学意义(P＜0.05).管腔缩小率:对照组无管腔缩小,30W×10cm/min组为(31.67％±2 16)％,30W×5cm/min组为(36.44％±2.42)％,35W× 10cm/min组为(50.60±0.39)％,35W×5cm/min组为(56.62±1.23)％,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).病理观察和电镜结果显示内膜损伤组的内皮细胞变性坏死、脱落,内膜断裂完整性破坏,肌纤维、胶原纤维变性、挛缩,排列紊乱.结论 冷循环微波天线能损伤曲张大隐静脉内膜,内膜损伤率随输出功率的增加而升高,随退出速度减慢而增加.35W×10cm/min为佳组合,既保持高内膜损伤率又避免了外膜损伤.30W×10cm/min能使静脉管腔缩小约30％,但不损伤内膜.
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成体狗骨髓间充质干细胞的分离和体外培养的初步研究
目的 探索成体狗骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养,为其将来应用提供实验依据.方法 无菌条件下抽取狗肋骨骨髓,Ficoll分离液(密度1.077g/ml)梯度离心分离单个核细胞,在含10%新生牛血清的DMEM中,37℃、5%CO2、饱和湿度下常规培养,取贴壁细胞并进行传代,观察细胞的生长形态.结果 取得较高纯度的成体狗骨髓MSCs,并保持细胞的活性;成体狗骨髓MSCs在体外培养中,为贴壁生长的单个核球形细胞,培养3～4d后开始大量增殖,为纺锤形和星形多突起的细胞贴壁生长,6～8d细胞达到70%～90%融合.传代细胞3～4d即可再次传代.结论 采用Ficoll分离液进行梯度离心分离,可获较高纯度的MSCs,是实用、便捷和可行的方法 ;而且在体外培养的条件下能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,可以成为进一步进行细胞扩增或其它实际应用的基础.
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宫腔镜检查在胚胎移植前的应用价值
目的 了解冷冻胚胎移植(FET)前宫腔异常类型,评价FET前行宫腔镜检查的临床意义.方法 分析234例既往体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败者后准备行FET的患者,按其是否进行宫腔镜检查及治疗分为宫腔镜组114例和对照组120例,比较两组的妊娠结局,及宫腔镜组宫腔异常的检出率和异常类型.结果 宫腔镜组患者FET后临床妊娠率较对照组增高(49.12％ vs 31.67％,P＜0.05),继发不孕患者宫腔异常检出率高于原发不孕者(49.09％vs 22.03％,P＜0.05),其中以宫腔粘连、宫内膜息肉、息肉样增生多见.结论 宫腔镜能改善宫腔环境;宫腔镜检查及治疗后能提高IVF-ET的成功率,建议在FET之前行宫腔镜检查.
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不同粒径的碳酸钙在体外模拟胃肠道环境中的除铅效果比较
目的:比较不同粒径的碳酸钙在体外模拟胃肠道环境中的除铅效果.方法:原子吸收光谱仪测定Pb2+浓度.结果:碳酸钙在模拟胃液中Pb2+没有影响,在pH 6.0模拟肠液中具有除铅效果,除铅效果随碳酸钙粒径减小而增强.结论:碳酸钙粒径对除铅效果有影响,将纳米碳酸钙制备成肠溶生物粘附制剂,可以通过阻断铅的肠肝循环,成为新型驱铅药物.
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硒对肝脏脑体外脂质过氧化的影响
目的:研究不同浓度硒对小鼠肝脏、脑体外脂质过氧化的影响.方法:体外孵育肝脏、脑匀浆液使过氧化脂质增加,TBA法测不同浓度硒作用下肝脏、脑组织的过氧化脂质含量.结果:低浓度硒发挥抗氧化作用,对肝脏浓度为10-2μg/ml时效果较佳,对脑为10-5μg/ml;高浓度的硒则产生强烈的毒性作用.在一定范围内,二者皆呈剂量依赖关系.结论:选择合适浓度的硒对人体健康至关重要.
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英语会话
术前灌肠Enema before a surgery交流护士:虽然你不是做腹部手术,但你的髋关节手术需用连续硬膜外麻醉的方法.使用麻醉药后,被麻醉平面以下没有痛觉,肛门括约肌松弛.你无法像现在一样控制下半身的运动,万一有大便排出,就会污染手术区.灌肠可使肠内的宿便排出体外.况且,你术后需卧床一段时间,手术后开始几天,解大便有可能不方便.
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MI期未成熟卵胞浆内单精子注射后可获得胚胎分析
目的:探讨来源于超排卵刺激周期的MI期未成熟卵胞浆内单精子注射(ICSI)后受精和发育能力.方法:选择ICSI治疗中无第一极体也无生发泡的MI期卵母细胞共37枚,行常规ICSI授精,16 ～ 18 h后观察受精情况,以后每24h观察胚胎生长情况并评级,直至采卵后72 h,按ICSI时MII卵子受精数计算受精率.结果:ICSI 37枚卵子,观察到原核的受精卵7枚,共获得11枚胚胎(4细胞I级,5～8细胞Ⅰ级或Ⅱ级胚胎9枚),受精率为29.73％ (11/37).结论:MI期卵子ICSI后仍有受精和胚胎出现,该部分胚胎是患者能多获得的可移植胚胎.
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经阴道多普勒超声评价体外受精-胚胎移植子宫内膜容受性
输卵管不孕是不孕症的主要病因之一,体外受精一胚胎移植(IVF-ET)已成为目前治疗这类不孕症的重要手段.受精卵的质量和良好的子宫内膜容受性是决定胚胎种植的关键因素.目前,在IVF-ET周期控制性超排卵(COH)时,对子宫内膜容受性的影响及评价并不明确,各方争议较多.对2004年1月～2005年1月接受助孕技术的277个周期作回顾性分析,探讨注射绒毛膜促性腺激素(HCG)当天子宫内膜厚度、类型对IVF-ET后妊娠的预测价值.
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单侧输卵管切除术对体外受精-胚胎移植结局的影响
输卵管性不孕是体外受精 - 胚胎移植(IVF-ET)常见的适应症,约占IVF的50%,其中许多患者是因异位妊娠曾行输卵管切除术导致不孕.输卵管切除是否影响卵巢功能有不同的意见,近年来关于输卵管切除手术对卵巢的反应性及对IVF-ET妊娠结局的影响成为研究热点.通过比较单侧输卵管切除术后患者与未行输卵管切除术的患者促超排卵周期的卵巢反应和妊娠结局,以了解输卵管切除术是否会影响卵巢功能和IVF-ET的妊娠结局,现将结果报告如下.
