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浮小麦与小麦的电泳研究
目的:找出浮小麦与小麦的真伪鉴别方法.方法:对二者进行聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳研究.结果:找出了两者不同的电泳图谱.结论:为种子类中药的鉴别研究,为浮小麦与小麦粉末的真伪鉴别,提供了新的科学依据.
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权威遇尴尬
堂侄自小学业优秀,考取了一所有名的医学院,接着读研究生.硕士课题做的是老年痴呆病分子生物学研究.他用试管养了一年多细胞,对培养液的配制、温度、湿度,免疫组化、凝胶电泳、聚合酶链反应,都能说出个子丑寅卯,发了几篇文章.然后读博士,用小白鼠做人类疾病的模型,成了个很不错的小鼠驯养员,而且还在国外SCI杂志上发表了一篇英语论文,很受导师器重.
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山豆根水提物对白血病CEM细胞生长抑制及其机制研究
目的 研究山豆根水提物对白血病CEM细胞的生长抑制及其可能机制.方法 以人类T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用MTT实验检测山豆根对CEM细胞的抑制率；光镜、电镜技术观察CEM细胞形态结构的改变；琼脂糖凝胶电泳检测山豆根水提取物对CEM细胞的诱导凋亡作用.结果 山豆根水提物能明显抑制CEM细胞的生长,药物浓度在0.019 mg/ml作用48 h后,即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为9.728mg/m];光镜、电镜下见细胞体积缩小,细胞膜皱缩,染色质明显浓缩、聚集,边聚于核膜下呈典型的凋亡特征；琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带.结论 山豆根水提物对白血病CEM细胞的生长具有明显的抑制作用,抑制白血病CEM细胞生长的机制之一是诱导CEM细胞凋亡.
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白花蛇舌草醇提取物对K562细胞的生长抑制及诱导其凋亡的研究
目的 研究白花蛇舌草醇提取物对人类红白血病细胞(K562细胞)的生长抑制作用及其机制.方法 采用MTT比色实验检测白花蛇舌草醇提取物对K562细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察细胞形态结构的改变:琼脂糖凝胶电泳法检测白花蛇舌草醇提取物诱导K562细胞的凋亡作用.结果 白花蛇舌草醇提取物能明显抑制K562细胞的生长.药物浓度在0.32μg/ml作用于48 h后,即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为1 000μg/ml;光镜、电镜下见细胞体积缩小.细胞膜皱缩,染色质明显浓缩,核聚集成团块,形成凋亡小体,有的边聚于核膜下呈新月形等典型的凋亡特征;琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带.结论 白花蛇舌草醇提取物对K562细胞的生长具有明显的抑制作用,诱导细胞凋亡是其机制之一.
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白花蛇舌草水提取物对白血病K562细胞的抑制作用及诱导其凋亡的研究
目的 研究白花蛇舌草水提取物对K562细胞的抑制作用及其机制.方法 采用MIT比色试验检测白花蛇舌草水提取物对K562细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察细胞凋亡形态结构的改变;琼脂糖凝胶电泳法检测白花蛇舌草水提取物对K562细胞的诱导凋亡作用.结果 白花蛇舌草水提取物能明显抑制K562细胞的生长,药物浓度在0.005 μg/ml作用于48 h后,即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为5 μg/ml;光镜、电镜下见细胞体积缩小,细胞膜皱缩,染色质明显浓缩,核聚集,边聚于核膜下呈新月形等典型的凋亡特征;琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带.结论 白花蛇舌草水提取物对白血病K562细胞的生长具有明显的抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其机制之一.
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凝胶电泳法鉴别蒙药小茴香及其伪品孜然
蛋白质在植物、动物细胞中普遍存在,具有种的特异性和稳定性.利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对小茴香及其伪品孜然进行鉴别.
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蛋白质组学研究技术及其联合应用
蛋白质组学是研究细胞、组织和器官内所有蛋白质的组成及其动态变化的科学,是在蛋白质水平上定量的、动态的、整体的研究生物体.目前蛋白质组学技术分为样品制备、分离和鉴定3个方面,其新技术主要有激光捕捉显微解剖法、离心超滤法、双向凝胶电泳、同位素亲和标签技术、色谱技术以及质谱技术等.然而,任何一种蛋白质组学研究技术都有其缺陷.因此多种技术的联合应用能使蛋白质组研究更精确和完整,是蛋白质组学的发展趋势.
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HPV-16型在前列腺癌人群中的表达及临床意义
目的 探讨高危型人乳头状瘤病毒(HPV)16型在前列腺癌组织及前列腺增生组织中的表达情况及临床意义. 方法 选取我院2014年9月至2016年1月经病理确诊的前列腺癌组织75例、良性前列腺增生组织50例,采用PCR结合凝胶电泳方法检测组织标本中HPV-16的表达情况,并分析其表达水平与前列腺癌各临床病理参数之间的相关性. 结果 18.6%(14/75)的前列腺癌标本中检测出HPV-16;良性前列腺增生组织中HPV-16的阳性表达率为4.0%(2/50).前列腺癌组织中HPV-16的阳性表达率高于良性前列腺增生组织,其差异具有统计学意义(P<0.05).HPV-16的表达与前列腺癌患者年龄、PSA、Gleason评分、临床分期之间差异均无统计学意义. 结论 HPV-16的感染与前列腺癌可能存在一定相关性,可能是前列腺癌的致病因子之一.
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葱白中蛋白质的凝胶电泳分析
目的 分析葱白中提取的蛋白质溶液,为葱白中蛋白质的研究提供依据.方法用Bradford检测法测定蛋白质的浓度;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离葱白提取液中的蛋白质,并测定其相对分子质量.结果提取物的蛋白质主要分布在相对分子质量(40～55)×103之间,且浓度较高,另外在相对分子质量(35～40)×103和(75～100)×103两个区段之间也有少量蛋白质存在.透析前后样品的蛋白质电泳结果显示,透析能提高蛋白质浓度,而对其组成没有影响.结论葱白中提取蛋白质的方法中透析前后蛋白质成分无明显差异.
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六种菊花电泳的初步分析
目的 建立菊花的蛋白质类成分的分析方法,比较六种菊花的蛋白质类成分差异.方法 应用PAGE、SDS-PAGE 技术且综合应用圆盘和垂直板电泳仪.结果 各类菊花的图谱未能明显区分有明显谱带出现.结论 此方法用于菊花类中药指纹图谱的建立有一定的局限性,但电泳对菊花中蛋白质的分离效果很好,灵敏度也较高,对于寻找新药源或DNA分析均是一个基础性工作.
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钌、铜吡啶类配合物的制备及与DNA相互作用的研究
目的 研究钌、铜金属配合物对DNA的作用方式和效果,为进一步研究开发新型金属抗癌药物提供基础.方法 以钌、铜两种金属分别与2,2-联吡啶及含吡啶四氮环作用,制备了含吡啶的金属配合物[Ru(bpy)3] Cl2及(CuL) (NO3)2{ bpy =2,2'-联吡啶,L=3,6,9,15-四氮杂[9.3.1]十五元双环-1(15),11,13-三烯},通过红外、紫外及质谱等对该两种配合物进行了表征.运用紫外光谱与凝胶电泳手段研究了上述配合物与pBR322 DNA的相互作用.结果 表明配合物[Ru(bpy)3]Cl2与DNA主要以静电结合的方式作用,而(CuL) (N03)2则是以嵌插的方式作用,且后者对DNA的切割效果更为显著.结论 本论文合成的两种钌、铜配合物与pBR322DNA结合方式不同,这可能与其结构有关系,而切割活性可能与配合物对其结合方式有关.
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血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物的分离和纯化
从机采浓缩血小板中,应用凝胶柱刀豆素A-琼脂糖、肝素-琼脂糖亲和层析与分子筛层析法,分离、纯化并得到血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物.血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物由α、β两个亚单位组成,糖蛋白Ⅱb可还原为糖蛋白Ⅱbα(分子量为125 kDa)和糖蛋白Ⅱbβ(分子量为23 kDa),而糖蛋白Ⅲa为一条多肽链,分子量为95 kDa,还原后为108 kDa.经不同凝胶亲和层析、凝胶电泳分析,得到血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物,为进一步筛选单克隆抗体和进行药物研发打下了基础.
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两种凝胶电泳法在含蛋白中药材鉴定中应用的比较研究
目的比较两种凝胶电泳法(梯度PAGE与平板PAGE)在含蛋白中药材鉴定中的优劣.方法以4种桃仁和3种牛蒡子为样品,通过平板PAGE与梯度PAGE进行电泳分离.结果梯度PAGE与平板PAGE对相同样品进行电泳发现,梯度PAGE的电泳条带比平板PAGE的多,而且梯度PAGE的条带清晰度高.结论梯度PAGE对含蛋白中药材的鉴定明显优于平板PAGE.
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山慈菇及其伪品的蛋白质电泳鉴别
目的:建立山慈菇与其伪品的蛋白质电泳鉴别方法.方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对山慈菇正品和伪品丽江山慈菇、金果榄、白芨、山兰进行鉴别分析.结果: 山慈菇蛋白谱图有3条特征性谱带,与其伪品蛋白谱图具有明显的差异.结论:蛋白质凝胶电泳是鉴别山慈菇与其伪品的一种科学、简便、快捷的方法.
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四种种子、果实类药材及其混伪品的电泳鉴别
目的:对四种种子、果实类药材及其混伪品进行电泳鉴别,并考察考马斯亮蓝G-250的染色效果.方法:可溶性蛋白质凝胶电泳.结果:四种中药及其混伪品的电泳图谱存在显著差异.结论:电泳图谱可作为四种中药及其混伪品的鉴别依据,考马斯亮蓝G-250可用于电泳鉴别.
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失血性休克大鼠肠上皮细胞凋亡的实验研究
目的:探讨大鼠失血性休克肠上皮细胞凋亡的发生情况,阐述肠道靶学说的分子机理.方法:采用DNA凝胶电泳、电镜、光镜以及流式细胞仪分析(FACS)等方法测定了大鼠缺血缺氧后肠上皮细胞凋亡和坏死情况.(1)动物模型:Wistar大鼠随机分为正常对照组与失血性休克缺血再灌流组.用戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉,右侧股动脉插管.按Wigger法放血至平均动脉压5.33 kPa,分别在休克2 h、3 h、5 h活杀动物.(2) 光镜:动物活杀后立即取回盲部小肠5 cm,3%戊二醛固定,常规脱水包埋,切片,光镜观察.(3)电镜:动物活杀后立即取回盲部小肠5 cm,10%甲醛固定.脱水后石腊包埋,切片厚度为2 μm,HE染色后光镜下观察.(4)细胞DNA凝胶电泳: 按戴纪纲等方法分离肠上皮细胞,提取DNA,肠上皮细胞悬液经PBS洗涤2次后,将细胞数调至1×109/L,加annexm v-FITC和碘化丙啶(PI)避光反应 10 min后,流式细胞仪分析.结果:失血性休克缺血再灌流组细胞凋亡主要发生于肠上皮细胞,并可见大量坏死组织;DNA ladder呈明显的梯型条带;FACS检测肠上皮细胞凋亡比例明显增多,其大凋亡率(MAR)较对照组明显增加,与DNA ladder结果一致.而对照组未发现附着在小肠上皮细胞的凋亡细胞.讨论:大鼠失血性休克后小肠细胞凋亡特征是:凋亡细胞主要发生于上皮细胞,凋亡细胞的数量以休克3 h后为明显,先分布于绒毛顶端, 逐步扩散至绒毛中下部,固有层和隐窝也有部分凋亡出现;值得注意的是小肠细胞凋亡出现在休克后早期,说明凋亡过程可能与缺血缺氧和氧自由基有关.严重创伤休克后,大量过度的粘膜细胞凋亡,必然导致粘膜屏障的损伤,导致肠源性感染的发生.因此进一步研究失血性休克后小肠上皮细胞的凋亡机制及药物防治,无疑对临床救治肠源性感染具有十分重要意义 .结论:失血性休克可诱导肠粘膜上皮细胞凋亡和坏死,其机理可能与缺血缺氧及氧自由基有关.
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利用蛋白质组技术进行胃癌差异蛋白质研究
目的 分离胃癌蛋白质组,找出胃癌组织的差异蛋白质点.方法 利用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)分离胃癌组织和正常对照组织的总蛋白质,并通过质谱分析技术对9个差异蛋白质点进行检测,以确定胃癌的差异蛋白质.结果 在胃癌组织中点检测共有蛋白质点1147个,正常胃黏膜组织中点检测共有蛋白质点1079个.胃癌和正常胃黏膜组织两者共有164个差异蛋白质点,其中41个点仅在胃癌组织中表达,27个点仅在正常胃黏膜中表达;39个点在胃癌组织中高表达,57个点在胃癌组织中低表达.确定了7种在胃癌组织中明显高表达的蛋白质.结论 利用蛋白质组技术获得了胃癌蛋白质组与正常对照组的差异蛋白质点,并获得了7种两者的差异蛋白质,为寻找胃癌的特异蛋白质奠定了基础.
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Alport综合征一家系中新的COL4A5基因突变
目的了解我国X伴性显性(XD)遗传Alport综合征(AS)中COL4A5基因突变特点.方法应用聚合酶链反应(PCR)-变性梯度凝胶电泳(DGGE)和直接测序的方法,对来自7个XD-AS家系10个成员和100个正常人外周血DNA标本进行了COL4A5基因43号外显子的检测.结果在一个家系中发现4142C→T(Pro1314Ser)的转换突变,先证者与其弟、其母均发现有此异常.结论表明该突变为一遗传性突变.查阅基因库,未发现相同突变报道.
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电泳技术结合计算机凝胶图像系统检测细胞凋亡
目的探讨检测细胞凋亡的新方法.方法利用常规电泳技术结合计算机凝胶图像分析系统对经地塞米松处理的巨噬细胞做细胞凋亡的定性定量检测.结果经地塞米松处理的巨噬细胞发生细胞凋亡,用1%琼脂糖凝胶电泳出现典型梯状条带,同时用流式细胞术检测出现凋亡峰,计算机凝胶图像光密度分析电泳结果,地塞米松处理0、0.5、1.0、2 0、4.0 h巨噬细胞的凋亡率分别为0%、16.37%、30.72%、35.87%、56.60%,与流式细胞术的检测结果基本一致.结论琼脂糖凝胶电泳结合计算机凝胶图像分析系统是一种简便、低耗、准确的细胞凋亡定性定量检测新方法.
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芦荟大黄素苷与DNA相互作用的研究
目的 探讨芦荟大黄素苷与DNA的相互作用.方法 采用电子吸收光谱,荧光发射光谱,粘度实验以及凝胶电泳实验进行研究.结果 与结论 芦荟大黄素以插入方式与DNA分子结合;较高浓度的芦荟大黄素苷能够使Bel-7402肝癌细胞DNA由超螺旋构型转化为缺刻构型.
