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五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸对AS患者外周血CD4+CD25+CD127low/-Treg表达的影响
目的:观察五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸对督寒型强直性脊柱炎(AS)患者的临床疗效及对外周血CD4+ CD25+CD127low/-Treg表达的影响.方法:将78例督寒型AS患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,治疗组给予五味温通除痹胶囊口服并联合中药熏蒸治疗;对照组给予柳氮磺胺吡啶口服,2组疗程均为8周.对2组中医证候评分、总体疗效评价、中医证候疗效评价及CD4+ CD25+ Treg等实验室指标进行观察.结果:治疗组第4、8周有效率明显高于对照组,中医证候显效率及总有效率高于对照组;与对照组比较,治疗组患者治疗后中医证候积分、总体以及腰背痛VAS评分、BASDA1、BASF1功能评分、ASDAS评分均显著降低.结论:五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸能显著上调督寒型AS外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg表达,有效改善AS患者临床症状.
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UPLC法测定五味温通除痹胶囊中黄芩苷的含量
目的：建立五味温通除痹胶囊中黄芩苷的含量测定方法。方法：采用超高液相色谱法，以Acquity UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7μm）为色谱柱，乙腈-0.1%磷酸（25∶75）为流动相；流速：0.25 mL/min；柱温：30℃；检测波长280 nm。结果：黄芩苷在0.0955 mg~0.955 mg范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.21%，RSD=1.16%。结论：该法准确可靠、重复性好，可用于该制剂中黄芩苷的含量测定。
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正交试验结合UPLC法优选五味温通除痹胶囊醇提工艺
目的:优选出五味温通除痹胶囊佳的醇提工艺.方法:采用正交试验法结合超高效液相色谱(UPLC),以黄芩苷、淫羊藿苷的含量和干浸膏得率为综合指标进行评判,通过正交试验设计L9(34),考察乙醇浓度、乙醇体积、提取时间和提取次数4个因素对五味温通除痹胶囊醇提工艺的影响.结果:五味温通除痹胶囊佳醇提工艺为70％乙醇,12倍乙醇,提取3次,每次1h.结论:本法简便、重复性好,为五味温通除痹胶囊的醇提工艺确定提供了依据.
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五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响
目的 明确五味温通除痹胶囊(桂枝、茯苓、淫羊藿,等)对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎的可能机制.方法 雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、五味温通除痹胶囊(0.80、1.60、3.20 g/kg)组、阳性药雷公藤多苷片(40 mg/kg)组,每组10只.除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎大鼠模型.致炎后第12天灌胃给药,连续12 d.实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ mRNA的表达,免疫荧光组织化学染色和Western blot法检测滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白的表达.结果 与模型组相比,五味温通除痹胶囊(1.60、3.20 g/kg)不仅可减轻佐剂性关节炎大鼠关节病理损伤程度,还可显著升高Beclin-1、LC3-ⅡmRNA和蛋白的表达水平.结论 五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与促进细胞自噬,减少滑膜细胞的过度增殖,从而减轻关节软骨损伤有关.
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超高效液相色谱法测定五味温通除痹胶囊淫羊藿苷含量
目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)测定五味温通除痹胶囊中淫羊藿苷含量的方法.方法:采用UPLC法测定五味温通除痹胶囊的君药淫羊藿中淫羊藿苷的含量,色谱条件:Acquity BEH C18柱(100mm×2.1mm,1.7μm);检测波长:270nm;流动相:乙腈-水(27∶73);流速:0.2mL· min-1;进样量:1.0μL;柱温:22℃.结果:淫羊藿苷保留时间为5.4min,淫羊藿苷于0.016-0.160mg间呈良好线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为98.36％,RSD=2.07％(n=6);精密度良好,RSD＜2％;重复性良好,RSD＜2％;限定五味温通除痹胶囊淫羊藿苷含量不得低于0.00mg/g.结论:此方法的结果准确,重复性良好,可以作为五味温通除痹胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法.
关键词： 五味温通除痹胶囊 超高效液相色谱(UPLC) 含量测定 淫羊藿苷 -
正交试验法优选五味温通除痹胶囊水提工艺
目的：优选五味温通除痹胶囊的水提工艺。方法以淫羊藿苷提取率和浸膏得率综合评分为指标，采用L9（34）正交设计，考察加水量、提取时间、提取次数对水提工艺的影响。结果佳提取工艺为：加10倍水，提取3次，每次1．0 h，淫羊藿苷提取率为（74．59±2．32）％，浸膏得率为（15．87±0．27）％。结论五味温通除痹胶囊的水提工艺简单、可行，可用于该制剂的工业化生产。
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五味温通除痹胶囊促进佐剂性关节炎大鼠滑膜组织细胞自噬活性及机制
目的 观察五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素白蛋白(PI3 K/AKT/mTOR)信号通路关键基因表达的影响,探讨其防治类风湿性关节炎的可能机制.方法 SD大鼠,随机分为正常组、模型组、(0.80、1.60、3.20) g/kg五味温通除痹胶囊治疗组、40 mg/kg雷公藤多甙片治疗组,每组10只.除正常组外,采用Freund完全佐剂诱导AA大鼠模型.致炎后第12天灌胃给药,每天1次,连续12 d.实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理组织学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中PI3K、AKT、mTOR、p70s6、beclin 1 mRNA的水平,免疫荧光组织化学染色和Western blot法检测滑膜组织中PI3K、AKT、磷酸化的AKT (p-AKT)、mTOR、p-mTOR、p70s6、p-p70s6、beclin 1蛋白的表达.结果 与模型组相比,(1.60、3.20) g/kg五味温通除痹胶囊治疗组不仅可减轻AA大鼠踝关节病理组织学损伤程度,还可降低PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p70s6、p-p70s6的水平,提高beclin 1的水平.结论五味温通除痹胶囊可抑制PBK/AKT/mTOR信号通路,上调AA大鼠滑膜细胞自噬活性,减轻关节软骨损伤.
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五味温通除痹胶囊对类风湿关节炎风寒湿痹阻证模型大鼠的治疗作用
目的:观察五味温痛除痹胶囊对类风湿关节炎风寒湿痹阻证模型大鼠的治疗作用.方法:将60只雄性SD大鼠随机分成6组,每组10只.除正常组外,其余各组采用“风、寒、湿”环境因素+弗氏完全佐剂的方法复制类风湿关节炎风寒湿痹阻证大鼠模型.造模第15天灌胃给予相应的药物,每天1次,连续14 d.致炎后第16天测量大鼠继发性足趾肿胀度,记录大鼠多发性关节炎指数,4d1次,共4次.末次给药后,处死大鼠,用HE法检测大鼠关节病理组织学改变程度；用比色法测定血清中丙二醛、超氧化物歧化酶、一氧化氮含量.结果:与模型组相比,五味温通除痹胶囊中、高剂量组能显著降低大鼠继发性足趾肿胀度、多发性关节炎指数、血清丙二醛、一氧化氮水平,升高超氧化物歧化酶水平；病理结果亦发现,五味温通除痹胶囊能够减轻大鼠关节病理损伤程度.结论:五味温通除痹胶囊对类风湿关节炎风寒湿痹阻证模型大鼠具有一定的治疗作用.
