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外源性bFGF对大鼠创伤性海马神经元坏死凋亡的治疗作用
目的探讨颅脑损伤后大鼠海马神经细胞发生变性坏死同时是否存在神经细胞凋亡现象,并试图应用外源性bFGF观察其对损伤后大鼠神经细胞病理学改变的治疗作用.方法应用Marmarou's颅脑损伤装置,造成Wistar大鼠重型颅脑损伤.以TUNEL法做原位细胞凋亡检测.以组织病理HE染色观察组织损伤程度.结果颅脑损伤后4小时,动物海马CA2-3区即出现少量凋亡细胞,伤后1、3天逐渐增多,伤后7天达峰值.外源性bFGF明显抑制颅脑损伤后神经细胞坏死、凋亡过程.结论颅脑损伤后,神经元发生变性、坏死同时,存在凋亡现象.海马结构bFGF基因表达不足可能是颅脑损伤后神经元坏死、凋亡的原因之一.因此脑损伤后,在常规治疗基础上,有必要给予外源性bFGF,减少神经细胞坏死及凋亡.
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bFGF和NT3基因共表达质粒对豚鼠庆大霉素耳蜗损害的防治作用研究
目的 探讨pBudCE4.1-bFGF-NT3基因共表达载体对豚鼠庆大霉素耳蜗损害的防治疗作用.方法 取健康豚鼠造模,分组,即:治疗组、预防组、对照组、NT3组、bFGF组.治疗组经右耳圆窗导入pBudCE4.1-bFGF-NT3、bFGF组、NT3组分别导人pCI-bFGF及pUC18-NT3;预防组在肌注庆大霉索前,先行导人共表达质粒:对照组导入SA-EGFP.各组动物分别进行ABR阈值的测试:耳蜗外毛细胞、螺旋神经节细胞计数并观察组织形态学变化.结果 ABR阈值测试,预防组、治疗组、NT-3组、bFGF组与对照组比较差异有显著意义(P<0.01),治疗组与NT-3组、bFGF组比较差异有显著意义(P<0.01),对照组,外毛细胞大面积缺失及细胞水肿坏死.而预防组、治疗组、N1r3XEG、bFGF组外毛细胞缺失等渍理性改变均显著减轻.毛细胞计数:预防组、治疗组、NT-3组、bFGF组与对照组比较差异有显著意义(P<0.01),治疗组与NT-3组、bFGF组比较差异有显著意义(P<0.01).对照组螺旋神经节细胞大面积坏死肿胀和消失,而预防组、治疗组、NT-3组、bFGF组仅有少数的螺旋神经节细胞发生退行性病变和损失.螺旋神经节细胞计数:预防组、治疗组、NT-3组、bFGF组与对照组比较差异有显著性(P<0.01),预防组、治疗组与NT-3组、bFGF组与比较差异有显著性(P<0.01).NT-3组与bFGF组比较差异有显著性(P<0.01).结论 pBudCE4.1-bFGF-NT3真核共表达载体,可有效预防和治疗庆大霉素对豚鼠耳蜗的损害.
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集体发生眼部盐酸烧伤的急救与治疗
目的探讨集体发生眼部严重盐酸烧伤的急救和后续治疗.方法对22例44眼进行了急救和治疗,并加用碱性成纤维细胞生长因子--贝复舒,3眼施行羊膜移植.结果随访观察15月,Ⅰ度烧伤11眼及Ⅱ度烧伤15眼视力均恢复正常,Ⅲ度烧伤12眼,视力均在0.5以上;Ⅳ度烧伤6眼,3眼视力0.2～0.3,2眼视力0.1～0.15,1眼0.04.结论严重盐酸烧伤经急救后,在综合治疗基础上加用碱性成纤维细胞生长因子能加速创面愈合,严重者可通过羊膜移植改善眼表功能,防止睑球粘连和穿孔,减少新生血管形成.
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人工角膜植入术后EGF和bFGF局部应用的实验研究
目的在兔眼局部应用上皮生长因子(EGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),观察对人工角膜植入术后植床角膜的影响.方法于PMMA襻状支架人工角膜植入兔眼后,结膜下注射EGF或bFGF,术后1月取植床角膜制作石蜡切片,应用免疫组织化学技术ABC法,检测植床角膜组织增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况及细胞凋亡情况;并检测c-myc基因的表达情况.结果bFGF组植床角膜基质细胞可见PCNA阳性表达;EGF组植床角膜上皮细胞及基质细胞均可见PCNA阳性表达;对照组未见PCNA表达;各组植床角膜基质及上皮细胞均可见c-myc基因表达,角膜内皮细胞未见表达;各组均未见阳性凋亡细胞.结论EGF和bFGF对人工角膜植入兔眼后植床角膜组织细胞的增生过程有促进作用,对减少人工角膜植入术后并发症,提高成功率有积极意义.
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c-fos与c-jun原癌基因在受创肺组织的表达及其对bFGF基因的影响
本实验研究肠道缺血再灌注时肺c-fos与c-jun两种癌基因表达的特征及其对肺内源性bFGF基因激活的影响,并探讨这两种原癌基因和bFGF基因的变化与肺损伤后修复的关系.
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跑台运动对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后TGF-β1和bFGF表达的影响
目的:观察跑台运动对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后修复过程中转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的影响.方法:雄性Sprague-Dawley大鼠33只,随机分为正常对照组(A组,n=3)、自然愈合组(B组,n=15)和跑台运动组(C组,n=15).A组于建模前全部处死取材(6肢).B组与C组用自制重物坠落打击装置造成双侧后肢腓肠肌中段闭合性急性钝挫伤,建立骨骼肌急性钝挫伤模型(60肢).建模后B组不施加运动干预,自然愈合；C组每天进行定时定量跑台训练.B组和C组分别于伤后第3、6、9、12、21天随机选取3只(6肢)处死,在击打中心部位取材制成病理切片,行免疫组化染色,并使用Imagepro plus 6.0图像分析软件进行定量分析,计算TGF-β1和bFGF的平均光密度,观察其表达水平.结果:A组仅有微量TGF-β1和bFGF表达.B组伤后3天TGF-β1、bFGF平均光密度值开始增高,6天达到峰值,9天开始逐渐下降,两因子表达特点相似.B、C两组伤后各取材时间点两因子的表达均显著高于A组(P＜0.01).C组伤后各取材时间点TGF-β1平均光密度值显著高于B组(P＜0.01)；伤后3、6、9、12天bFGF平均光密度值均升高(P＜ 0.01或P＜0.05),3天时达峰值,21天时无显著性差异(P＞0.05).结论:骨骼肌急性钝挫伤后,早期施加运动干预促进TGF-β1和bFGF表达,提示骨骼肌愈合过程中可能发生瘢痕过度增生而影响愈合质量.
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一次及长期运动对大鼠心肌细胞cAMP、cGMP及bFGF含量的影响
目的:探讨一次和长期运动对大鼠心肌cAMP、cGMJP及bFGF蛋白含量的影响.方法:30只SD大鼠随机分为对照组、一次运动组和8周运动组,每组10只.8周运动组进行每周6天、每天1次、每次60min、强度为20m/min的跑台运动.一次运动组的运动时间和强度与8周运动组相同.一次和8周运动组运动后24小时(对照组同期)取材测定心脏重量、计算心脏系数;采用硝酸还原酶法测定NO含量,比色法测定cNOS及iNOS的含量;采用放射免疫法测定心肌cAMP、cGMP含量,采用Western blot免疫印迹法测定bFGF蛋白含量.结果:与对照组相比,一次运动组NO、cNOS、cAMP、cGMP及bFGF含量显著增加(P<0.01);8周运动组心重和心脏系数显著增高(P<0.05和P<0.01),NO、cNOS、iNOS、cGMP及bFGF含量明显升高(P<0.01).结论:一次和8周运动均能使大鼠心肌NO、cNOS、cGMP及bFGF含量显著升高,但一次运动能使cAMP水平显著升高,而8周运动组能使iNOS水平显著升高.
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凉血活血中药对剂量分割重复照射下大鼠肺组织TNF-α和bFGF的影响
目的 通过观察凉血活血中药对剂量分割重复照射下大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、碱性成纤维生长因子(bFGF)在不同时相动态表达的影响,探讨其防治放射性肺损伤的作用机制.方法 160只Wistar种雌性大鼠随机分为单纯照射组(40只)、中药治疗组(40只)、单纯中药组(40只)和空白对照组(40只).用直线加速器对单纯照射组和中药治疗组大鼠右肺进行分次照射(3 Gy/次,2次/周,累积剂量高为30 Gy),于照射开始后第3、5、8、12和26周5个时间点分别处死各组各8只大鼠,取材切片行HE和免疫组化染色,观察大鼠肺组织病理改变和不同时相TNF-α和bFGF的表达.结果 单纯照射组大鼠肺组织于照射第5周急性放射性肺炎重,第26周肺纤维化明显,不同时相TNF-α和bFGF表达明显增强(P＜0.01);中药治疗组大鼠各时相TNF-α、bFGF的表达均组明显低于单纯照射组(P＜0.01).结论 在剂量分割重复照射过程中,应用凉血活血中药可抑制致炎因子和致纤维化因子的表达,减轻早期放射性肺炎的炎症反应和后期放射性肺纤维化的程度,因而对放射性肺损伤具有防治作用.
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bFGF复合部分脱矿异体骨修复兔下颌骨缺损的电镜观察
目的 观察bFGF( basic fibroblast growth factor,碱性成纤维细胞生长因子)复合部分脱矿异体骨在修复下颌骨缺损中的成骨情况,研究bFGF在骨缺损修复中的成骨作用机制及其适宜载体的选择.方法 取健康成年家兔新鲜下颌骨,经部分脱矿和冻干辐照处理以降低其免疫原性.在21例兔双侧下颌骨缺损模型中,按照完全随机原则,一侧选用bFGF复合部分脱矿异体骨修复骨缺损,作为实验组；另一侧单纯以部分脱矿冻干辐照异体骨修复,作为对照组.术后3、6、12周分别处死7只实验动物,对标本进行电镜观察.结果 实验组和对照组手术创口均为一期愈合,宿主对移植物未发生排斥反应.扫描电镜显示,实验组植骨区有大量新生骨,随时间推移,新骨的量渐多；对照组植骨区多为纤维组织,新骨形成少.结论 bFGF可促进异体骨植骨区骨质形成.部分脱矿异体骨可用于下颌骨缺损的修复并可作为bFGF的载体.
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宫颈鳞癌微血管密度与碱性成纤维细胞生长因子表达意义的研究
目的 探讨宫颈鳞癌组织中微血管密度、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达在肿瘤生物性行为中的意义,以期对宫颈癌的预后评估和指导临床提供新的依据.方法 应用免疫组化SP法检测宫颈癌组织中,微血管密度及bFGb、蛋白的表达,分析其与肿瘤组织分级、临床分期及它们之间的相互关系,并分别研究其与预后的关系.结果 宫颈鳞癌微血管密度及bFGF蛋白的表达与肿瘤组织分级、临床分期有关;bFGF阳性组微血管密度明显高于阴性组(P＜0.01).微血管密度较高组的存活率低于微血管密度较低组(P＜0.01),bFGF的表达对存活率有明显影响(P＜0.01).结论 宫颈鳞癌组织中bFGF阳性组微血管密度明显高于阴性组,说明bFGF有促进肿瘤血管形成作用,二者的表达均与预后有关,提示肿瘤微血管化的评估可能成为一种新的预测宫颈鳞癌预后的手段.
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P7抑制bFGF诱导的3T3细胞增殖的作用机制
研究从噬菌体随机七肽库中筛选得到的新型bFGF拮抗肽(P7)抑制bFGF诱导的Balb/c 3T3细胞增殖的作用机制.采用倒置显微镜观察不同浓度P7对细胞形态的影响;流式细胞术分析P7对细胞周期的影响;Western blotting检测P7对bFGF刺激的Balb/c 3T3细胞中MAPK通路的MEK、Erk1/2信号分子活化水平的影响.结果显示.在检测的浓度范围内,P7对Balb/c 3T3细胞形态无显著影响;P7可改变bFGF刺激下Balb/c 3T3的细胞周期,减少S期细胞比率,使细胞阻滞在G_0/G_1期;并以剂量依赖的方式下调bFGF激活的MEK、Erk1/2信号分子的磷酸化水平.P7可能通过阻滞细胞在G_0/G_1期,下调MAPK通路信号分子的活化水平,从而抑制bFGF诱导的Balb/c 3T3细胞增殖.
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卡拉胶寡糖与 bFGF 的结合活性及其对乙酰肝素酶活性的抑制作用
为探讨卡拉胶寡糖作为硫酸肝素类似物的抗肿瘤和抗血管新生机制,以宫颈肿瘤细胞 HeLa 和人脐静脉内皮细胞 HUVEC 为研究对象,考察几种不同聚合范围的寡糖结合 bFGF 及抑制乙酰肝素酶活性的作用.发现卡拉胶寡糖对正常细胞和肿瘤细胞均表现出低毒特征.在低浓度下,具有结合 bFGF 并能抑制 bFGF 引起的细胞增殖能力,其中λ-卡拉胶寡糖(聚合度2～8)效果明显,在质量浓度为 20μg·mL-1 时,可达30%的抑制率.几种寡糖对乙酰肝素酶活性有不同趋势的抑制作用,在 HeLa 细胞中,λ-卡拉胶寡糖的抑制活性高;在 HUVEC 细胞中,聚合度在9～17的k-卡拉胶寡糖活性高.结果表明,卡拉胶寡糖的类硫酸肝素生物活性与其分子量大小、硫酸取代量有明显的关系,低分子量、高硫酸基取代是其高活性的关键.
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VEGF、bFGF和TGF-β1在大鼠马兜铃酸肾损伤中的表达
目的 观察3种致纤维化细胞因子:血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠马兜铃酸肾病肾损伤过程中的表达.方法 实验组:Wistar大鼠20只,马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ) 50 mg·kg-1·d-1灌胃,连续7 d,分别于停药后第1、2、3、4周宰杀.对照组大鼠6只,纯净水灌胃,连续7 d,分别于第2和4周宰杀.免疫组织化学二步法观察各组大鼠肾脏 VEGF、bFGF和TGF-β1的表达及产生规律.结果 实验组于第2周起,出现明显的肾小管上皮细胞损害,初期以近曲肾小管病变为主,至第4周时病变累及各段肾小管,损害更为明显.VEGF、bFGF和TGF-β1的表达具有共同特点,阳性表达范围均随实验时间的延长呈逐渐扩大趋势,弥漫分布于肾皮髓质各段损伤的肾小管上皮细胞.各实验组与正常对照组VEGF、bFGF和TGF-β1的平均表达率比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 马兜铃酸可以刺激致纤维化细胞因子VEGF、bFGF和TGF-β在肾小管上皮细胞内表达.VEGF、bFGF、TGF-β的早期、过度表达可加重马兜铃酸肾病的进展.
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碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的兔软骨细胞合成蛋白多糖的影响
观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养兔关节软骨细胞合成蛋白多糖的影响,旨在为临床软骨损伤的修复寻找理论依据.取新西兰幼兔关节软骨组织,经消化后将其以细胞密度2×104/mL接种,当细胞融合生长时,培养瓶随机分2组,为细胞换液,第1组的培养液同前,第2组的培养液中含有bFGF 10 μg/L,2 h后,在培养液中加入Na235SO4, 使其含量为1 850 MBq/L,继续培养1 d后测量软骨细胞摄取35SO42-的量,并在电镜和光镜下观测蛋白多糖的形态.结果:培养基中含有bFGF和缺乏bFGF生长的软骨细胞对35SO42-的摄取量有明显差异(两者均P＜0.01).在光镜和电镜下均可以看到生长在含有bFGF培养液中的单层软骨细胞分泌的蛋白多糖较未加bFGF培养出单层软骨细胞分泌的蛋白多糖多.由此提示bFGF可促进软骨细胞合成蛋白多糖.
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成纤维细胞生长因子对体外培养的兔软骨细胞增生的作用
将经消化后的新西兰幼兔软骨细胞接种在含有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)或缺乏bFGF的培养液中进行培养,观察bFGF对软骨细胞的增生作用及其佳质量浓度,并测取软骨细胞对3H-胸腺嘧啶的摄取量.发现bFGF可促进软骨细胞数目增多,促进软骨细胞增生的佳质量浓度为10～15μg/L;培养基中含有bFGF和缺乏bFGF生长的软骨细胞对3H-胸腺嘧啶摄取量有明显差异(P＜0.05).提示:bFGF可促进兔关节软骨细胞增生,其促细胞增生作用在一定范围内同bFGF质量浓度成正相关.
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COX-2、bFGF在前列腺癌组织中的表达及相关性实验研究
目的 研究COX-2及bFGF在前列腺癌组织中的表达,在前列腺癌的发生、发展过程中的作用.方法 应用免疫组化SP法检测正常前列腺(NP)、良性前列腺增生(BPH)、前列腺癌(PCa)组织中COX-2和bFGF蛋白表达.结果 (1)在NP组中COX-2表达0%,在BPH组中为8.70%,在PCa组中72.41%(P＜0.01).bFGF阳性表达率依次增高(P＜0.01).(2)COX-2在PCa组中表达率为72.41%,bFGF在Pca组中为81.03%,与肿瘤的分级无明显相关性(P＞0.05),与肿瘤临床分期密切相关(P＜0.05).COX-2,bFGF在PCa中存在正性相关(r=0 786,P＜0.01).结论 (1)COX-2与前列腺癌的发生、发展相关.检测COX-2蛋白表达可以协助PCa的病理分级、临床分期.(2)bFGF的表达是PCa的恶性表型.(3)COX-2的增加可上调bFGF的表达而促进血管生成和肿瘤的发展.
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纳洛酮对急性脑梗死患者侧支循环建立的影响
目的：探讨纳洛酮治疗急性脑梗死患者侧支循环建立的影响。方法选取2013年12月—2014年4月的急性脑梗死72 h 内入院,经头颅CT 或MRI 证实符合临床表现及相应影像学改变的80例患者,采用完全随机分组分为对照组和纳洛酮组。对照组依据其发病情况、并发疾病等给予抗血小板聚集药、调脂、扩血管、活血化瘀中药及脑保护药物等治疗，治疗组在对照组治疗基础上加用纳洛酮2.4 mg+5%葡萄糖250 mL（糖尿病患者用9%NaCl 250 mL）静点1次/d，连续应用7 d。两组研究对象分别于入院第1天、7天时抽取卧位静脉血，用酶联免疫吸附法（ELISA)测定血清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的水平；均在入院第1天、7天采用美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）进行神经功能缺损评分。结果治疗7 d后，纳洛酮组较对照治疗更能显著降低神经功能缺损评分(P＜0.01)；纳洛酮组VEGF、bFGF水平均增高，且与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；而对照组中bFGF水平呈略下降趋势(P>0.05)，更能佐证纳洛酮可促进血清 bFGF的高表达。结论纳洛酮作为一种新型的脑保护剂可以通过显著增加脑梗死患者血清中VEGF、bFGF的表达来改善神经功能缺损程度和血液供应状态，减轻残疾。
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bFGF结合远红外线对促进烧伤创面愈合的临床研究
目的 探讨外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)结合远红外线对促进烧伤愈合的临床疗效.方法 烧伤患者37例(43例创面),按随机数字表法分为两组,对照组18例(21例)给予单纯常规治疗,治疗组19例(22例)在常规治疗的基础上联合bFGF、远红外线.比较两组患者创面愈合时间及愈合率、临床总有效率以及瘢痕评分.结果 治疗组与对照组在治疗7d、14 d、21 d的创口愈合率方面比较,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组与对照组临床总有效率分别为95.5％ (21/22),80.9％(17/21),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).两组瘢痕评分比较,治疗组显著优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 bFGF结合远红外线可以促进创口愈合率及缩短愈合时间,提高临床总有效率、改善患者瘢痕评分.
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bFGF及雷帕霉素降解支架对心肌血运重建的实验研究
目的 探讨镁合金可降解联合bFGF(basic fibroblast growth factor,bFGF)及雷帕霉素(rapamycin)支架对改善心肌缺血区灌注的情况.方法 对18只小型猪通过结扎前降支冠状动脉制作急性心肌梗死模型,然后随机分为3组(每组6只),A组为心肌打孔组,B组为心肌打孔+镁合金复合bFGF可降解支架植入组,C组为心肌打孔+镁合金复合雷帕霉素可降解支架植入组.在各组中,于心肌梗死区采用自制高速钻孔器由心外膜打两个直径为2mm透壁孔道,每个孔道内植入1枚支架.6周后,Image Pro Plus 6.0软件量化各组新生血管密度.于治疗前和治疗后6周SPECT结合软件Emory Cardiac Toolbox分析心肌灌注缺损区域质量百分率,超声学指标左室舒张末直径(LVEDD)、右室收缩末直径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)评价心脏的功能.结果 治疗后6周,B组和C组LVEF和心肌灌注质量缺损较A组明显改善(P＜0.05)；B组和C组中新生血管密度百分率较A组显著改善(P＜0.01).结论 镁合金复合bFGF及雷帕霉素可降解支架能够显著增加缺血心肌新生血管密度,改善缺血部位心肌血流灌注,进而提高心脏功能.有望成为一种心肌梗死后再血管化的有效方法.
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冷冻异体骨加TGF-β1和bFGF复合移植修复骨缺损的研究
目的观察重组TGF-β1和bFGF在经冷冻处理的同种异体骨移植修复骨缺损过程中促进骨愈合的作用.方法以家兔作为实验动物,修复桡骨1.2cm缺损.冷冻处理后的异体骨加纤维蛋白载体携带bFGF和TGF-β1移植作为实验组(A组),自体桡骨移植(B组)和单纯异体骨移植(C组)作为对照组.术后不同时间拍摄X线片,同位素骨扫描计数分析和HE染色组织切片观察和扫描电镜观察.结果X线检查自体移植较异体移植提前愈合,同位素扫描计数分析2周后A和B组明显优于C组,并有显著差异(P＜0.01).组织学观察异体移植骨切片可见明显的髓腔内诱导成骨相.结论TGF-β1和bFGF能明显促进异体移植修复骨缺损中的骨愈合过程.
