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人参三七川芎提取物延缓内皮细胞复制性衰老的机制研究
目的:探讨人参三七川芎提取物对内皮细胞复制性衰老(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)的影响.方法:体外培养的HUVEC-2C传代至第8代,造成内皮细胞复制性衰老模型.细胞分为4组,8代衰老模型组、维生素E(Vit E)组(50 mg·L~(-1))、中药高、低(50,20 mg·L~(-1))剂量组,采用衰老相关卢β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察细胞衰老改变,流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量,硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot法检测各组细胞AngII1型和2型受体(AT_1R和AT_2R),NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达.结果:8代衰老模型组β-gal染色阳性细胞数明显增多,细胞停滞在G_0/G_1期,激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强,培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少,p47phox,AT_1R,AT_2R蛋白表达上调.给予高、低剂量中药处理后,可明显改善细胞的衰老状态,β-gal染色阳性细胞数减少,G_0/G_1期细胞减少,G_2/M期细胞增加,ROS荧光强度减弱,抗超氧阴离子、NO含量较8代衰老模型组增加,p47phox,AT_1R,AT_2R蛋白表达下调,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:人参三七川芎提取物能够延缓内皮细胞复制性衰老,通过活性氧途径下调NADPH氧化酶p47phox的表达,终使ROS产生减少;同时,中药提取物还能降低衰老内皮细胞AT_1R,AT_2R的表达,改善内皮功能,这可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一.
关键词: 人参三七川芎提取物 NAD(P)H氧化酶 细胞复制性衰老 ROS -
解偶联蛋白2对氧化损伤性细胞衰老的影响和信号通路
目的:氧化损伤是细胞复制性衰老的主要原因,线粒体是细胞生理条件下活性氧(ROS)产生的主要来源,本课题观察线粒体质子转运蛋白解耦联蛋白2(UCP2)对氧化损伤下端粒依赖性复制性衰老改变的影响并初步探讨有关信号通路。
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端粒依赖性衰老中的PI3K/Akt信号通路和线粒体解偶联作用相关
目的:氧化应激过程是诱导端粒依赖性衰老的重要原因,其中涉及诸多信号通路的参与,线粒体是内源性氧化产物的主要来源,本研究探讨在抗衰老和凋亡中扮演重要角色的PI3K/Akt信号通路在血管紧张素II(AngII)干预的细胞复制性衰老中的作用并观察其与线粒体功能调节蛋白解偶联蛋白2的相互关系。
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T细胞复制性衰老与老年人应用疫苗的有效性
根据病原菌的不同有时需要疫苗增强机体的细胞免疫水平和/或增强机体的体液免疫水平.中和抗体是传统上评价疫苗有效性的金标准,但现在越来越清楚的了解,很多病原菌,除了体液免疫产生的中和抗体,机体免疫系统中的其他组分可能对机体抵御病原菌起到长期的保护作用.
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不同年龄不同组织中的端粒限制性片断长度测定的意义
目的探讨端粒长度与高等真核细胞生物中正常体细胞增殖能力间的关系.方法以不同年龄的正常腮腺组织及正常皮肤表皮组织做标本,利用Southern杂交方法测定每份标本的端粒限制性片段长度,然后比较同一组织不同年龄的端粒限制性片段长度,并进行统计学分析.结果同一年龄不同组织的端粒限制性片段长度是不同的.皮肤表皮的端粒限制性片段长度平均值随年龄增长而变短;腮腺组织的端粒限制性片段长度平均值未随年龄增长而变短.结论端粒缩短是细胞复制性衰老的主要原因.在不同的组织中,由端粒缩短引起的细胞复制性衰老表现程度是不同的.