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豨莶草生品和炮制品抗炎、抗风湿作用的实验研究
目的:探讨豨莶草生品和炮制品抗炎、抗风湿作用的特点.方法:采用角叉菜胶诱发大鼠足肿胀;二甲苯诱发小鼠耳肿胀;大鼠慢性肉芽肿;大鼠佐剂性关节炎.结果:莶草生品和炮制品6.0,2.0 g·kg-1可显著降低角叉菜胶诱发的足肿胀,足肿胀抑制率大于40%,生品好于炮制品;生品和炮制品6.0,2.0 g·kg-1可预防大鼠佐剂性关节炎的原发病变和继发病变,炮制品在起效时间、作用强度、维持时间等方面明显好于生品.结论:豨莶草炮制品对佐剂性关节炎炎症具有明显的抑制作用,明显好于生品;炮制品和生品对角叉菜胶引起的炎症具有明显的抑制作用,两者无明显的差异.
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佐剂FCA与Quil A对rGST-Sj32的免疫增强作用的比较
目的比较弗氏完全佐剂(FCA)与皂素的纯化物Quil A的免疫增强作用,进一步提高重组抗原rGST-Sj32的免疫效果.方法rGST-Sj32+FCA或Quil A免疫NIH小鼠3次,ELISA法检测抗体水平,用减虫率及减卵率表示保护效果.结果与PBS对照组比较,rGST-Sj32+FCA免疫小鼠减虫率为42.9%,每克肝卵(LEPG)减少率51.0%,每雌肝卵(LEPF)减少率为23.9%,抗体滴度达1:25 600.rGST-Sj32+Quil A免疫小鼠减虫率为46.0%,LEPG减少率39.4%,LEPF减少率为8.5%,抗体滴度达1:51 200.结论FCA和Quil A均可增强rGST-Sj32免疫小鼠的抗感染保护性免疫力;FCA亦可增强rGST-Sj32诱导小鼠抗生殖免疫,Quil A无增强抗生殖免疫的作用.
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两性霉素B免疫作用的研究
本研究的目的是发展一种简便快速的检测两性霉素B(Amphotericin B,AMB)血药浓度的酶联免疫吸附试验(ELISA).以AMB与小牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)连接物作为免疫原,AMB与中国鲎血蓝蛋白(TTH)的连接物作为检测抗原,用弗氏完全佐剂乳化抗原,分别免疫日本大耳兔、新西兰大白兔和BALB/c小鼠.大白兔的体重为2.5kg/只,BALB/c小鼠为6~8周龄.
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海枫藤抗类风湿性关节炎的实验研究
目的 观察海枫藤醇提物的抗类风湿性关节炎作用.方法 采用佐剂性关节炎模型观察大鼠体重、原发侧足跖肿胀度以及关节炎指数的变化.结果 海枫藤醇提物可以不同程度的减轻大鼠原发侧足跖肿胀度以及关节炎指数.结论 海枫藤醇提物高浓度组对大鼠类风湿关节炎具有较强的抑制作用.
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银杏叶提取物对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用与机制
目的:考察银杏叶提取物( EGb761)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用,初步探讨银杏叶提取物治疗AA的作用机制.方法:将大鼠随机分为正常对照组,模型组,雷公藤多苷组,EGb761低、中、高(50,100,200 mg· kg -1)剂量组.弗氏完全佐剂致AA后d12,大鼠出现继发性炎症,分别灌胃给予雷公藤多苷和E Gb761,连续16d;在不同的时间点检测大鼠继发侧关节肿胀度;致炎d 28处死大鼠,酶联免疫法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6( IL-6)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10 (IL-10)含量;光学显微镜观察关节病理变化.结果:EGb761可明显减轻继发性AA大鼠足爪的肿胀度;降低大鼠血清中IL-1β和IL-6含量;升高大鼠血清中IL-4和IL-10含量.结论:EGb761对大鼠继发性AA具有显著的治疗作用,其作用机制可能与抑制促炎因子IL-1β和IL-6的产生和释放以及促进抑炎因子IL-4和IL-10的表达相关.
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弗氏完全佐剂对小鼠细胞免疫功能的影响
弗氏完全佐剂(CFA)是一种常用免疫佐剂,其提高体液免疫应答的作用已被公认,而对细胞免疫应答的影响鲜有报道.作者测定了一些注射佐剂后小鼠的细胞免疫应答指标,同时测定体液免疫指标对CFA剂量作一监测,报告如下.
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不同剂量弗氏完全佐剂对类风湿关节炎模型大鼠复制的影响
目的 观察不同剂量的弗氏完全佐剂对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)模型复制的影响,探讨RA 模型复制中弗氏完全佐剂的佳注射量,以期为RA 的实验研究提供较好的模型复制方法.方法 采用"病证结合"复合佐剂性关节炎模型复制方法,即"风、寒、湿"环境因素+弗氏完全佐剂的模型复制方法,观察不同注射量的弗氏完全佐剂对RA 模型复制的影响.结果 0.1mL模型复制组有自愈的趋势;0.15mL模型复制组大鼠体质量、跖围改变呈进行性下降趋势,X线可见骨质破坏情况较贴近临床患者骨质的改变;0.2mL模型复制组骨质呈粉碎性破坏.结论 0.15mL注射量可能是RA模型复制中的佳注射量.
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不同溶剂对多肽类抗原乳化效果的影响
目的:探究多肽类抗原在与弗氏完全佐剂乳化过程中不同的抗原溶剂(无菌水和PBS缓冲溶液)对乳化效果的影响。方法利用三通管连接双注射器的人工乳化器推拉法进行抗原乳化,采用滴水实验检测乳化效果。结果以无菌水作为溶剂,乳化时间较长,乳化程度易于人工控制;以PBS缓冲液作为溶剂,会在极短时间即形成稳定的“油包水”乳剂,但容易乳化过度。结论多肽类抗原乳化过程中,不同抗原溶剂对乳化效果的影响有较大差异。
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赤雹根总皂苷对实验性佐剂型关节炎镇痛作用的研究
目的:观察赤雹根总皂苷对实验性佐剂型关节炎的镇痛作用.方法:采用弗氏完全佐剂(FCA)制备大鼠实验性佐剂型关节炎疼痛模型,分别给予赤雹根总皂苷(160、80、40mg·kg<'-1>),以及雷公藤12mg·kg<'-1>阳性对照药治疗,以关节炎指数、痛阈和疼痛级别为指标,评价其对实验性佐剂型关节炎的镇痛作用.结果:赤雹根总皂苷各剂量均能明显降低大鼠实验性佐剂型关节炎的关节炎指数,提高其痛阈,降低其疼痛级别.结论:赤雹根总皂苷对实验性佐剂型关节炎具有显著的镇痛作用.
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卡介苗在关节炎模型小鼠诱导中的作用
目的:探讨在牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型( Collagen-induced arthritis ,CIA)小鼠的诱导过程中,弗氏完全佐剂( FCA)中的卡介苗( BCG)浓度和CIA小鼠关节炎严重程度的关系。方法:将牛Ⅱ型胶原蛋白溶液与含不同BCG的FCA等体积混合乳化,在小鼠尾根部注射进行免疫。免疫后观察小鼠的相关指标包括体重、发病率、血清TNF-α、关节炎指数及小鼠关节和脾脏的病理变化。结果:与1 mg/ml卡介苗组相比,4 mg/ml卡介苗组诱导的CIA小鼠发病早,关节炎指数、关节和脾脏病理评分升高及小鼠体重下降更明显,血清TGF-α明显升高,差异有统计学意义。结论:在进行CIA小鼠诱导时,BCG浓度和CIA小鼠关节炎严重程度呈正相关,实验中可以根据对动物的要求,选择含不同BCG的佐剂来诱导CIA小鼠。
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电针对佐剂性关节炎大鼠血清IL-2和IL-10的影响
l 实验材料 Wistar大鼠40只,雄性,体重180-200g,1.5月龄,黑龙江中医药大学实验动物中心提供.弗氏完全佐剂:美国Sigma;血清白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素一lO(IL-10)ELISA试剂盒:美国ADL公司.KWD-808Ⅱ型电针仪:常州长城;Anthos 2010型全自动定量酶标仪:奥地利;AB204-N电子分析天平:梅特勒托利多集团;TCL-16B高速台式离心机:上海安宁科学仪器厂.
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当归拈痛汤及其拆方对佐剂性关节炎大鼠红细胞免疫功能的影响
1 实验材料药物:当归拈痛汤全方:羌活、茵陈、炙甘草各15g,猪苓、泽泻、防风、知母、苍术、当归各9g,葛根、苦参、人参各6g,升麻、黄芩、自术各3g.拆方1(蠲痹组):羌活、菌陈各15g,猪苓、泽泻、防风、知母、苍术各9g,葛根、苦参各6g,升麻、黄芩各3g.拆方2组(扶正组):白术3g、人参6g、当归9g、炙甘草15g.试剂:弗氏完全佐剂,Sigma公司产品.冻干酵母多糖和补体致敏酵母多糖试剂,由免疫室提供.雷公藤多甙片,上海医科大学红旗制药厂生产.动物:健康Wistarl大鼠60只,雄性,体重(180±20)g,由南方医科大学实验动物中心提供,分笼饲养,室温(18±2)℃,相对湿度45%~50%,空气新鲜,通风良好,自由摄食、饮水.
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痹痛灵注射液对类风湿性关节炎大鼠踝关节灌流液中PGE2和cAMP含量的影响
1材料健康成年Wistar远交系大白鼠60只,体重200g±30g,3~4月龄,均为雄性,由黑龙江中药大学实验动物中心提供.痹痛灵注射液由黑龙江中医药大学附属第一医院药厂制备;强地松龙注射液,生理盐水由黑龙江中医药大学附属第一医院西药局提供.弗氏完全佐剂(FCA)由黑龙江中医药大学附属第一医院器材科提供.PGE2放免试剂盒:购于北京东亚免疫技术研究所.cAMP放免试剂盒:购于中国原子能科学研究院同位素研究所.
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大秦艽汤加减方对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其作用机制的研究
1 实验材料动物:Wistar大鼠72只,清洁级,雄性,体重130~150 g,购自黑龙江中医药大学实验动物中心.所有动物均在恒温恒湿的动物室中饲养1周后进行实验.药物与试剂:大秦艽汤加减方由秦艽、青风藤、忍冬藤、独活、羌活、石膏等组成.雷公藤多甙片(10mg/片)由上海复旦复华药业有限公司生产,批号z31020415.弗氏完全佐剂由Sigma公司出产.IL-1β、IL-6、TNFα试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司.
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塞隆骨提取物对CFA诱导活化的小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响
目的:研究塞隆骨提取物对弗氏完全佐剂诱导活化的腹腔巨噬细胞的免疫抑制作用.方法:小鼠腹腔注射弗氏完全佐剂诱导腹腔巨噬细胞活化并回收,体外加入LPS及IFN-γ刺激培养巨噬细胞,利用酶联免疫法测定培养上清中细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-12p40、TNF-α)水平.结果:塞隆骨水提物及90%醇沉部分体内给药均能够能显著抑制弗氏完全佐剂诱导的巨噬细胞向腹腔的浸润,能抑制巨噬细胞在LPS及IFN-γ刺激下生成细胞因子(IL-12p40、IL-1β、IL-6、TNF-α).结论:塞隆骨提取物对巨噬细胞功能有一定程度的影响,能够抑制其产生炎症因子,可能是其治疗类风湿性关节炎的作用机理之一.
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057 以氢氧化铝或弗氏完全佐剂为佐剂的全身免疫能诱导保护性抗螺杆菌免疫
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空肠弯曲菌诱导系统性红斑狼疮样小鼠模型的优化
目的 优化空肠弯曲菌(CJS131)诱导系统性红斑狼疮(SLE)样小鼠模型的方法.方法 小鼠随机分为5组,即正常对照组、卡介苗(BCG)对照组、结核分枝杆菌H37Ra对照组、CJS131+ BCG模型组和CJS131+ H37Ra模型组.在第0天免疫,在第14、21、42天加强免疫,在第36、54、61天分批称其体质量后处死.检测小鼠免疫器官指数、血清抗核抗体水平、血清总IgG水平和肾组织病理损伤程度.结果 不论采用含BCG还是H37Ra的弗氏完全佐剂(FCA),给予CJS131免疫的小鼠均有SLE样综合征的表现:血清抗核抗体及总IgG水平升高,肾组织损伤.在动态检测中病变基本维持.结论 CJS131在对模型组小鼠的免疫诱导中起主要作用,以BCG或H37Ra作为FCA中采用的菌株都可引起病变,通过加强免疫可维持小鼠长期病变,优化后的模型可用于SLE治疗性药物的筛选.
关键词: 空肠弯曲菌CJS131 弗氏完全佐剂 系统性红斑狼疮 小鼠模型 -
刺山柑果实精制提取物抗类风湿关节炎的实验研究
目的 评价刺山柑果实精制提取物对弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的治疗效果.方法 采用弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原为造模剂分别建立大鼠类风湿性关节炎模型,测定刺山柑精制提取物对关节炎大鼠足趾肿胀抑制率和相关炎症因子表达的影响.结果 刺山柑精制提取物对大鼠佐剂性关节炎继发性病变具有一定的治疗作用,治疗效果均持续至实验结束,其中刺山柑高剂量的抑制率基本稳定在20%以上,对大鼠关节周围组织滑膜内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)有一定下调作用.刺山柑提取物对Ⅱ型胶原诱导的大鼠类风湿关节炎足趾肿胀也具有显著抑制作用,100 mg/kg剂量组在给药后3d,开始出现一定程度的抑制足关节的肿胀,给药后14d抑制率达到40.3% (P<0.05).结论 刺山柑精制提取物具有抑制弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原引起的大鼠类风湿性关节炎的作用,能有效缓解其关节附件的肿胀,其作用机制可能是通过下调TNF-0c、IL-1、IFN-α等相关炎症因子的表达.
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Beta-内啡肽足爪注射对慢性炎性痛大鼠局部炎性因子的抑制作用
[目的]观察足爪注射beta endorphin (Beta-END)对慢性炎性痛大鼠的治疗作用,探讨其对外周局部致炎性细胞因子Prostaglandin E2(PGE2)、Interleukin-1 beta(IL-1 beta)、Tumor Necrosis Factor-alpha(TNF-alpha)的基因和蛋白表达的干预作用.[方法]建立大鼠Complete Freund's Adjuvant (CFA)诱导的炎性痛模型,随机分为模型对照组和beta-END足爪局部注射组.Beta-END注射从模后1d至13d,隔日1次.观察痛阈(PWLs)变化,检测足爪炎症组织PGE2、IL-1 beta、TNF-alpha的mRNA和蛋白水平.[结果]与模型对照组比较,足爪局部注射beta-END能显著提高慢性炎性痛大鼠的痛阈,能显著降低IL-1 beta和TNF-alpha的蛋白水平,并对PGE2蛋白水平和PGE2、IL-1 beta、TNF-alpha mRNA表达呈现下调趋势.[结论]Beta-END足爪局部注射对慢性炎性痛大鼠具有良好的治疗作用,除传统的外周阿片受体机制外,其外周治疗慢性炎性痛的作用可能还与其有效抑制局部炎性因子的表达有关.
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β-内啡肽腹腔注射对慢性炎性痛大鼠局部炎性因子的抑制作用
[目的]观察β-内啡肽(β-endorphin,β-END)腹腔注射对慢性炎性痛大鼠的治疗作用,探究其对外周局部致炎性细胞因子前列腺素E2(prostag landin E2,PGE2)、白细胞介素1-β(interleukin 1-β,IL-1 β)、肿瘤坏死因子-α(tamor necrosis factor-α,TNF-α)的基因和蛋白表达的干预作用.[方法]建立大鼠完全弗化佐剂(Complete Freund's Adjuvant,CFA)诱导的炎性痛模型,随机分为模型对照组和β-END腹腔注射组.造模后1~13 d进行β-END腹腔注射,隔日1次.观察热缩腿阈(Thermal-PWLs)变化,检测足爪炎症组织PGE2、IL-1 β、TNF-α的mRNA表达和蛋白水平.[结果]β-END腹腔注射能显著提高慢性炎性痛大鼠的痛阈;能显著抑制局部炎症组织PGE2、IL-1 β和TNF-α mRNA表达;能显著降低IL-1 β和TNF-α的蛋白水平,对PGE2蛋白水平有下调趋势.[结论]除了经典的外周阿片受体机制外,β-END外周抗慢性炎性痛作用,可能还与其有效抑制局部炎性因子的表达有关.