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流感可进行哪些实验室检查?
血象:白细胞总数减少,淋巴细胞相对增加;合并细菌感染时,白细胞总数和中性粒细胞增多.抗原检测:取患者鼻洗液中黏膜上皮细胞的涂片标本,用荧光或酶标记的流感病毒免疫血清染色检测抗原,有助于早期诊断.
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在组织芯片上利用量子点技术进行抗原的检测
在组织培养和组织切片上,可利用放射性和非放射性方法检测抗原的定位.而在传统的免疫荧光分析技术中,有机荧光基团存在激发波长范围很窄、发光时间短,容易猝灭等缺点,限制了它们在蛋白定量上的使用.荧光半导体纳米颗粒量子点(quantum dots)提供了一种潜在的方法去克服有机荧光基团的这些缺陷,开始在免疫荧光分析中初步应用,并取得了令人满意的效果.
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SARS-CoV核衣壳蛋白重组表达及单克隆抗体特性鉴定
SARS-CoV具有与其他冠状病毒相类似的结构.在有关动物冠状病毒的研究中发现,N蛋白是病毒主要的免疫原蛋白和良好病毒抗体检测抗原.在所有冠状病毒的结构蛋白中,无论从mRNA水平还是蛋白表达水平,N蛋白是病毒在整个感染过程中含量丰富的蛋白.
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两性霉素B免疫作用的研究
本研究的目的是发展一种简便快速的检测两性霉素B(Amphotericin B,AMB)血药浓度的酶联免疫吸附试验(ELISA).以AMB与小牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)连接物作为免疫原,AMB与中国鲎血蓝蛋白(TTH)的连接物作为检测抗原,用弗氏完全佐剂乳化抗原,分别免疫日本大耳兔、新西兰大白兔和BALB/c小鼠.大白兔的体重为2.5kg/只,BALB/c小鼠为6~8周龄.
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检测抗原特异T细胞反应技术的新进展
研究T细胞的识别、活化和频数分布是现代免疫学的重要课题,其中细胞毒性T淋巴细胞(CTL或Tc)通过识别细胞表面与MHCⅠ类分子结合的抗原肽而杀伤靶细胞,是机体抗肿瘤、抗移植物及有效控制各种感染的重要途径之一.目前缺乏精确分析CTL频数及快速分离扩增这类细胞的技术.近,发展了一些新技术用来评估T细胞的特异性,这些新方法很敏感,可以直接体外分析T细胞,而不需体外扩增,这样对体内免疫反应提供了更精确的描述.简介如下:
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固相免疫层析法检测细菌样本处理液的比较研究
固相免疫层析方法检测细菌目标主要为细菌颗粒表面抗原成分,利用表面活性剂增溶活性,使待检测抗原从颗粒上解离成为 "可溶性"抗原,并保持其免疫反应性,进而提高固相膜免疫分析方法检测敏感性.故以鼠疫耶尔森菌为对象,通过建立金标记和上转换磷光(UPT)标记免疫层析方法进行不同表面活性剂处理筛选,以获取佳样本处理效果.
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量子点标记技术在生物医学中的研究进展
量子点(QDs)又称半导体纳米微晶体,是一种由Ⅱ~Ⅵ族或Ⅲ~Ⅴ族元素组成的约 2~20 nm的纳米晶粒,具有可调节和对称的发射光谱、光化学稳定性好、激发光谱宽且连续、粒度的不同发射光的颜色也不同等特点,可用于多种标记物的同时检测,极大地促进了荧光标记在生物医学中的应用[1,2].该技术具有当前体外和体内标记所没有的独特优势,根据特定的检测对象,可选择合适的生物分子进行修饰,也可修饰抗体检测抗原,或修饰配体定位受体,或修饰探针DNA检测目标DNA等,在生物医学的超痕量分析中具有非常重要的应用价值.
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FACTT 一种新的抗原检测系统
免疫学方法检测抗原的灵敏度受到抗原浓度及抗原与所使用抗体的亲和力的限制,ELISA是目前常用的抗原检测方法,其检测极限在0.01~50 ng/ml之间.不能满足于一些低丰度蛋白或微量标本中的蛋白的检测.T7RNA聚合酶具有在体外结合T7启动子后高效转录产生RNA的功能.据此特点,美国华裔学者Zhang等发明了一种抗原检测系统(fluorescent amplification catalyzed by T7 polymerase technique FACTT),即:T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术.该技术比传统的ELISA的敏感度至少提高几个数量级.而且该方法是在等温条件下进行,所以实验具有较好的重复性而且易如操作,显示了良好的应用前景[1].
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免疫-PCR实验技术条件的探讨
ELISA是免疫学检测经典实验技术,多年来已广泛用于检测各种疾病,其检测抗原/抗体的灵敏度可达pg级.但对于早期、轻症患者及产生抗体滴度较低的疾病,其检测阳性率仍不能令人满意.1992年Sano等创立了免疫-PCR方法[1],此方法将ELISA反应的灵敏度至少提高了103倍,可检测到0.5 fg的小鼠ApoE抗原.然而我们在应用中发现,由于免疫-PCR反应需在0.5 mL小离心管中进行,而离心管的包被效果远逊于ELISA反应板(酶标板),制约了免疫-PCR灵敏度优势的发挥.为克服这一难题,我们分别观察了硅化、紫外线照射、戊二醛浸泡以及增大抗原质量浓度4种处理方法对包被效果的影响.
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两种方法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的临床分析
性传播疾病(STD)是一类以性接触为主要传播方式的疾病,沙眼衣原体(chlamydia trachomatis)是STD的主要病原体之一,沙眼衣原体主要引起男女生殖泌尿系统感染,在我国性传播疾病中位居前列,对患者危害较大,特别是沙眼衣原体可与其他生殖道病原微生物共同导致女性子宫颈炎、子宫内膜炎、盆腔炎、不育症及异位妊娠等[1].目前临床实验室检测沙眼衣原体的方法有很多,主要有形态学检查、胶体金法检测抗原、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测核酸、培养法等.临床应用较广泛的胶体金法检测抗原和实时荧光定量PCR法检测核酸,其检测设备、检测原理、检测敏感度、检测特异性均不相同[2],为了解目前实验室常用方法对沙眼衣原体感染的检出率, 本研究用实时荧光定量PCR法和胶体金法同时检测615例疑似泌尿生殖道感染患者样本, 比较2种方法的检出率,并对结果进行分析.
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非淋菌性尿道炎250例沙眼衣原体解脲支原体单纯疱疹病毒感染的检测分析
非淋菌性尿道炎(nongonococcal urethritis,NGU)为常见的性传播疾病之一,在欧美国家的发病率已经超过淋病.解脲支原体(ureaplasma urealyticum,Uu)和沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)是可寄居于人体并能引起疾病的病原体.它们都可致人体非淋菌性尿道炎[1].近年来,单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)引起NGU的情况越来越受到重视,但这方面的研究报道还不多.血清抗体检测只能表明HSV曾经感染,不能证实活动性病毒,亦不能做出肯定的病因学关系判断[2].检测抗原法具有快速,特异性和敏感性高的优点,成为现阶段主要的辅助诊断指标.通过对门诊250例NGU患者进行CT、Uu、HSV2抗原的检测,报告如下.
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免疫组织化学实验技术的体会
免疫组织化学技术是在组织化学的方法上结合免疫学的理论和技术发展起来的一门新技术.它具有较高的敏感性、精确性、特异性强和操作简单等优点.其原理是利用抗原与抗体间的特异性结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原与抗体进行定位、定性,通过化学反应使标记物显示一定的颜色,并借助显微镜等对其颜色进行观察,以达到检测抗原物的目的.在科研和临床病理诊断应用广泛.但在实验操作过程中经常会出现脱片、假阳性或者假阴性等问题,所以,科学地规范免疫组织化学技术的操作对保证结果的准确判读,实验的重复性有着重要意义.工作质量时控制的关键是:抗原的高压修复,抗原的阴性阳性对照设置[1].现从按免疫组织化学操作流程对各步骤中的注意事项进行总结,以提高免疫组织化学化技术水平.
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PCR技术检测支原体感染412例分析
肺炎支原体(MyeoPlasmaPnevmomia,MP)感染是儿科较常见的一种感染性疾病,近年来其发病率有增高趋势.目前虽然有各种DNA探针和检测抗原的ELISA方法,但由于条件的限制,MP感染的诊断仍主要依靠人工培养方法和血清学方法,但它们都缺乏早期、快速、特异性强、灵敏度高等特点.因此,CecileBernet等人建立了PCR方法来检测MPDNA,该方法具有灵敏度高、特异性强和反应迅速等特点,优于其它各种方法.本文也采用了PCR方法来检测MPDNA.现报道如下.
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免疫沉析法检测大肠埃希菌O157: H7抗原
本文作者采用一种免疫沉析法--Meridian IC-STAT法,对两组粪便标本作了大肠埃希菌(大肠杆菌)O157:H7抗原直接检测及从粪便肉汤培养中检测抗原,并与山梨醇麦康凯琼脂平板(SMAC)粪便培养法进行了比较.
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反向间接血凝法检测流行性出血热抗原
我院曾从流行性出血热(EHF)尸肾提取相关抗原,进行微量免疫琼脂双扩散及对流电泳方法检测抗原,特异性虽强,但敏感性差.因此:我院初步尝试了反向间接血凝法(R-PHA)检测EHF抗原,现小结如下.
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ELISA检测乙肝标志物失败原因及处理
ELISA被广泛应用于临床检验中,用来检测抗原和抗体.ELISA检测乙肝标志物在实验中造成的失败原因及处理,笔者进行了分析.
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酶联免疫双抗原夹心法检测抗双链DNA抗体
DNA)抗体是一种自身抗体,主要在系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中出现,特别是活动期病人血清中,是诊断SLE特异性的检测指标.目前检测抗ds-DNA的方法有许多,以放免与ELISA法为简便.但都以无法得到纯双链DNA作为检测抗原而受到限制,检出的结果受抗单链DNA(SS-DNA)抗体的干扰,假阳性率高,特异性差.
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ELISA法检测乙肝五项的影响因素及排解
酶联免疫吸附试验(EUSA)是检验科免疫室基本常用的一项技术,通常是采用微孔板为同相的测定模式来检测抗原和抗体.ELISA法操作虽然简单,但由于多是手工操作,在检验过程中受到的外界环境因素和人为因素的影响比较多,致使检测结果出现误差.现将主要影响因素及其排解总结如下.
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应用全自动荧光酶联免疫分析系统同时检测人类免疫缺陷病毒抗体和p24抗原
近年来,人类免疫缺陷病毒(HIV)的检测工作在我国发展很快,各地已先后建立了上百个检测实验室,HIV检测的管理和质控也在逐渐加强.自1985年以来,检测HIV的初筛试剂不断发展.第三代试剂的出现大大缩短了从感染到检出抗体的时间[1].近研制出了第四代试剂,它能同时检测抗原和抗体.法国某公司生产的同时检测人类免疫缺陷病毒抗体和抗原的荧光酶联免疫(VIDAS HIV DUO)试剂,是一种能同时检测HIV 1+2型抗体和HIV-1 p24抗原的第四代试剂,用全自动荧光酶联免疫分析(VIDAS)仪进行检测.资料显示,VIDAS HIV DUO试剂比第三代试剂缩短了检出的时间,窗口期缩短为两个星期左右[2].2000年我们用全自动酶联免疫分析系统对部分血清进行了检测,结果如下.
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Bx亚型1例实验室检查与鉴定
ABO血型变异,遗传学认为是由于在A、B位点上出现罕见的等位基因,或者由一些能影响ABO基因正常表现的罕见基因所致.亚型是血型变异的一种,由于其血型抗原弱,用已知抗体检测抗原和用已知抗原测被检血清中抗体,往往不符合ABO血型特点.因此,应根据受检者红细胞抗原性的强弱和血清中存在的抗体以及唾液中分泌血型物质的性质,参考家系血型来确定亚型的类型.