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FACTT 一种新的抗原检测系统
免疫学方法检测抗原的灵敏度受到抗原浓度及抗原与所使用抗体的亲和力的限制,ELISA是目前常用的抗原检测方法,其检测极限在0.01~50 ng/ml之间.不能满足于一些低丰度蛋白或微量标本中的蛋白的检测.T7RNA聚合酶具有在体外结合T7启动子后高效转录产生RNA的功能.据此特点,美国华裔学者Zhang等发明了一种抗原检测系统(fluorescent amplification catalyzed by T7 polymerase technique FACTT),即:T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术.该技术比传统的ELISA的敏感度至少提高几个数量级.而且该方法是在等温条件下进行,所以实验具有较好的重复性而且易如操作,显示了良好的应用前景[1].
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前列腺癌患者前列腺特异性抗原浓度与肥胖相关血液稀释之间的关系
在过去10年中,美国肥胖的发生率急剧上升.近有研究提示,肥胖男性血清前列腺特异性抗原(PSA)浓度低于非肥胖男性.由于体重指数(BMI)较高的男性循环血浆容量较大,因此肥胖男性所出现的低PSA浓度可能与血液稀释有关.为了明确前列腺癌患者PSA浓度与肥胖相关血液稀释之间的关系,1988年至2006年,来自美国杜克大学医疗中心的Lionel等采用地方肿瘤医院共享的平等存取数据库(n=1373)、杜克前列腺研究中心数据库(n=1974)以及约翰·霍普金斯医院数据库(n=10 287)对实施前列腺根治性切除术的前列腺癌患者进行了回顾性研究,其结果发表于2007年11月21日出版的JAMA杂志中(JAMA,2007,298:2275-2280).
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STN抗原与产后出血关系的研究
一些不典型的羊水栓塞患者可以仅以产后出血为主要表现.所以,并非所有的羊水栓塞患者都表现为突然的循环衰竭和死亡,它可以是从亚临床表现到快速死亡的一组疾病.这提示,一些以产后出血为主要表现的羊水栓塞患者有可能误诊或不能被诊断,因此无法及时得到治疗.本研究通过测定产后2 h产妇血清中Sialyl Tn(STN)抗原浓度,初步探讨STN抗原与产后出血的关系.并初步探讨产后出血人群中发生不典型羊水栓塞或以产后出血为主要表现的羊水栓塞的危险性.为临床上更有效地治疗一些产后出血病人提供理论基础.
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脑梗死患者组织因子途径抑制物C-399T多态性
组织因子途径抑制物(TFPI)是外源性凝血途径起始步骤的生理性抗凝物质,在调节血栓形成、抑制溶栓后血管再闭塞等方面具有重要作用.近年研究表明TFPI C-399T基因多态性与静脉血栓形成无关[1],但与动脉血栓性疾病的关系仍有争论,且不同人种TFPI C-399T的分布頻率不同[2,3].为了研究TFPI C-399T多态性在中国人群中的分布頻率及其与脑梗死(Cerebral Infarction,CI)之间的可能联系,我们分析了部分CI患者及正常人的TFPI C-399T等位基因的变异情况及血浆总TFPI抗原浓度,现报道如下.
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哮喘患者血清螨特异性抗体及其卧室尘螨抗原浓度的季节变化
约80%的婴幼儿哮喘由尘螨过敏引起,40%~50%的成人哮喘由尘螨过敏引起[1].据统计,哮喘患者的发作,以4~5月、9~10月间为多,即哮喘发作与季节变化有关[2].由于哮喘是IgE介导的Ⅰ型变态反应性疾病,因而哮喘患者血清免疫球蛋白也可能呈季节性变化,且这种变化可能与室内尘螨抗原浓度的变化相关.
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尘螨变应原Der p1浓度与哮喘患者血清螨特异性抗体的季节消长
目的:探讨哮喘患者血清抗体及患者室内尘螨抗原浓度的季节变化规律.方法:2005年9月、2005年12月、2006年3月、2006年6月用ELISA法检测哮喘患者卧室尘样中DerP 1浓度,同步检测患者外周血总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4.结果:哮喘患者血清总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4均高于正常对照组,差异均具显著性(P<0.01);比较患者血清总IgE、s-IgE及s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4四次检测值,差异均具显著性(P<0.01),患者血清总IgE、s-IgE在12月份检测值高、6月份检测值低,s-IgG1以6月份高、3月份低,s-IgG4在3月份高、6月份低.统计表明,患者卧室DerP1浓度四次检测值差异具有显著性(P<0.01),以2006年3月和2005年12月为高.结论:哮喘患者血清总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4和卧室尘螨抗原浓度呈季节变化,IgG1的变化与尘螨抗原浓度的变化趋势相反,IgG4的变化与尘螨抗原浓度的变化趋势一致.
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CA125 ELISA对卵巢癌诊断和预后的评价
本文对我院1999~2000年妇产科100例妇科疾病患者治疗前后的血清CA125进行检测及对照分析,以探讨血清CA125对卵巢癌的诊断及预后的应用价值.材料和方法一、血清标本:100例患者,年龄20~55岁,平均33岁,分离血清置低温保存.二、试剂与器材:CA125 IRMA kit由美国MaxgeneBiotechnologies公司生产,酶标仪为奥地利SIT-Ⅱ型.三、方法:取已知抗原浓度分别为0、15、50、100、200、400ku/L的标准液及血清标本一周内检测.方法如下:(1)将系列标准液及血清标本各取100μl,加入抗CA125抗体包被的聚苯乙烯反应孔,在每孔加入酶结合剂100μl,混匀,孵育3小时.(2)取出后用蒸馏水洗板5次,拍干后加TMB底物200μl,置暗处15′,显色.(3)在每孔加入50μl终止液,30分钟内于酶标仪450nm处比色.
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12081名职工HBsAg水平调查
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的乙型病毒性肝炎(乙肝)是我国的一种常见病和多发病,HBV感染是导致乙肝、肝硬化及肝癌的主要原因,是危害人民生命与健康的疾病.本病具有高发病率、高传染性、早期疫苗接种预防效果好的特点.了解区域性人群HBV感染情况,对有效降低和控制人群中感染HBV具有积极意义.为此,我们调查了某石化企业员工人群的血清乙肝表面抗原浓度,与人体相关指标进行分析,现将结果报告如下.
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贝克曼Array 360 System免疫蛋白测定系统的使用评价
Array 360 System是用于检测悬浮于缓冲液中的抗原一抗体免疫复合物颗粒,它采用的测定方法是速率散射比浊法,测定的速率峰值经微电脑转换处理成抗原浓度.该方法具有敏感性好、精确、快速和简便等特点,一次可对40份标本进行20种免疫特定蛋白的检测,比单向扩散及放射免疫法结果准确、操作简便、时间短.现就Array 360 System的使用评价如下:
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影响血清前列腺特异性抗原浓度的原因分析
我们测定了123例前列腺疾病患者的血清前列腺特异性抗原(PSA)浓度,现对其影响因素进行分析.
关键词: 血清前列腺特异性抗原 抗原浓度 影响因素 疾病患者 测定 -
ELISA假阴性结果原因分析
免疫学检测方法有高度的特异性及敏感性,临床上常用作某些疾病的辅助诊断及很多基础学科的研究.ELISA一步法(即待测样本与酶标记物同时加入反应系统)方便、快捷、可定性,并能通过酶标仪进行定量分析,所以是当前应用广的免疫学检测方法之一.但在ELISA一步法的检测中会偶而出现这种现象:如在AFP测定时,ELISA定性为阴性,磁酶免定量浓度很高,同时将病人的血清稀释后再用ELISA定性则为AFP阳性.而在检测HBsAg等其他项目中同样会出现这种情况,说明待测物中抗原浓度过高时,ELISA结果中出现了假阴性.为什么会发生这样的现象呢?根据我们实际工作经验,具体分析如下.
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二步夹心ELISA分析中"HD-HOOK"效应的抗体铰链区变构假说
二步夹心ELISA分析是将待测抗原与固相包被抗体反应,洗涤去除未结合成分,然后加入标记抗体与被捕捉的抗原结合,其反应信号通常正比于抗原浓度,当抗原超过一定量时,使固相包被抗体呈饱和结合状态,其剂量反应曲线呈平台状延伸.1974年Miles等[1]在二步夹心ELISA法测定铁蛋白的实验中发现,当抗原浓度达到或超过某一高值时,反应信号呈现降低态势,即二步夹心ELISA分析中"HD-HOOK"效应.
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Array 360特种蛋白分析仪的保养和常见故障的处理
Array 360特种蛋白分析仪是美国贝克曼(Beckman)仪器公司产品.它的检测原理是在抗体过量的前提下,光束通过时,悬浮于缓冲液中的抗原-抗体免疫复合物颗粒所产生的散射光速率变化强弱与抗原浓度成正比,速率峰值经微电脑处理后转换成抗原浓度.因其测定方法具有敏感、精确、快速和简便的特点,故已在临床检验工作中得到较广泛地使用.我单位于1996年购进该机,下面是笔者使用五年多来的一些经验体会.