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风湿痹痛胶囊的抗炎消肿作用及与NF-kBp65的关系
目的:观察风湿痹痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠的抗炎消肿作用及与NF-KBp65的关系.方法:采用弗氏完全佐剂诱导的大鼠AA模型,测量继发性关节肿胀程度;采用免疫组化法,观察致炎关节滑膜的NF-KBp65的表达.结果:风湿痹痛胶囊能抑制继发性踝关节炎性肿胀;风湿痹痛胶囊能减少NF-KBp65的表达.结论:风湿痹痛胶囊具有较好的抗炎消肿作用.
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桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠TNF-α与RANKL表达的影响
目的:观察桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠血清中TNF-α与关节滑膜组织RANKL表达的影响,并初步探讨其治疗机制.方法:以弗氏完全佐剂诱导产生免疫性关节炎模型,用不同剂量桂枝芍药知母汤(GSZ汤20.6 g/kg、10.3 g/kg)给模型动物灌胃用药,观察用药后动物血清TNF-α水平与致炎对侧膝关节滑膜组织RANKL表达.结果:桂枝芍药知母汤用药4周后,可明显增加模型大鼠体重增长速度,减轻关节肿胀程度(P<0.05 or P<0.01);使模型大鼠血清TNF-α水平降低(P<0.01)以及滑膜组织RANKL表达下降(P<0.01).本实验条件下,GSZ汤20.6g/kg剂量时的疗效与MTX相当.结论:桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制TNt-α分泌,降低RANKL表达有关.
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大鼠被动皮肤过敏试验两种佐剂选择的探讨
目的 比较氢氧化铝佐剂、弗氏完全佐剂对大鼠被动皮肤过敏试验结果的影响.方法 以卵白蛋白为致敏原,分别加入2种佐剂,研究不同佐剂、不同致敏剂量(10,20 mg/只)、不同致敏途径(腹腔注射,皮下注射)条件下,大鼠被动皮肤过敏试验的敏感性.结果 大鼠给予卵白蛋白剂量分别为10,20 mg/只时,加入氢氧化铝佐剂、弗氏完全佐剂诱导的大鼠被动皮肤过敏试验阳性反应发生率均为100％,且各注射点蓝斑直径均大于5 mm.同等条件下,氢氧化铝佐剂组大鼠过敏反应蓝斑直径大于弗氏完全佐剂组.结论 大鼠被动皮肤过敏试验,卵白蛋白剂量为10 mg/只时,选用氢氧化铝佐剂或弗氏完全佐剂,均能得到较好的阳性结果.
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新型PH-20疫苗不同注射方式对雌性豚鼠免疫应答和避孕效果的影响
目的 观察以等比方法配制的新型精子表面特异性透明质酸酶(PH-20)疫苗的不同注射方式对豚鼠免疫应答和避孕的影响.方法 60只雌性豚鼠随机分为两大组(直肠注射组和腹腔注射组),每组再分为3个小组(实验1组、实验2组和对照组,每小组各10只),用电镜观察该新型PH -20疫苗的形态,应用双夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)检测豚鼠阴道分泌物中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的水平、放射免疫分析法检测血液sIgA的水平、竞争ELISA技术检测血液PH-20特异性抗体的水平.结果 直肠注射组和腹腔注射组豚鼠血液和阴道分泌物中slgA、PH -20抗体含量均较对照组升高(P均＜0.05);实验1组(添加弗氏完全佐剂)豚鼠在各测量时间点血液和阴道分泌物中slgA、PH-20抗体含量均较实验2组(未添加弗氏完全佐剂)高(P均＜0.05).直肠注射组(50％)和腹腔注射组(76.7％)总阳性怀孕率相比有显著性差异(P＜0.05).结论 该新型PH-20疫苗具有较高的免疫活性,能诱导机体产生明显的体液反应,且直肠注射诱导免疫优于腹腔注射.用弗氏完全佐剂均能增强两种注射方式的避孕效果.
关键词： 精子表面特异性透明质酸酶 免疫球蛋白A 弗氏完全佐剂 免疫刺激复合物 -
母爱剥夺合并慢性疼痛对新生大鼠空间学习记忆能力的影响
目的 研究母爱剥夺、弗氏完全佐剂(CFA)引起的慢性疼痛以及两者合并对幼鼠空间学习记忆行为影响.方法 10窝新生SD大鼠,每窝取4只随机均分为疼痛组(P组),空白对照组(C组),母爱剥夺组(MD组),母爱剥夺合并疼痛组(MD+P组)(n=10).在幼鼠出生后第7天(P7),P组左足底皮下注射弗氏完全佐剂(CFA)30μl;C组注射0.9%生理盐水30μ1;MD组左足底皮下注射0.9%生理盐水30μl后每天上午9:00至12:00将幼鼠与母鼠分离3h,从P7持续至P21;MD+P组左足底皮下注射30μl CFA,随后处理同MD组.检测幼鼠在P7、P14和P21的体质量变化;幼鼠从P22至P29进行Morris水迷宫实验(n=10).结果 MD组和MD+P组幼鼠体质量增加[分别为(17.13±1.13)g,(17.67±1.27)g]明显少于对照组[(22.36±1.55)g,P＜0.01,P＜0.05],而P组体质量增加与C组差异无显著性.Morris水迷宫实验中,MD组幼鼠寻找隐蔽平台的潜伏期[(34.22±5.86)s]较C组[(22.77±2.59)s]、P组[(21.29±1.01)s]、MD+P组[(25.29±2.45)s]显著延长(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),而C组、P组、MD+P组差异无显著性;母爱剥夺对潜伏期变化趋势的影响差异具有显著性(F=7.31,P＜0.05),但疼痛的影响差异无显著性.结论 重复性长时间的母爱剥夺损害了幼鼠的空间学习记忆能力,而CFA诱导的疼痛应激不会导致P7幼鼠的空间学习能力缺陷,并且可以减弱母爱剥夺对空间学习能力的损害.
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宽叶荨麻抗类风湿性关节炎的研究
目的 研究宽叶荨麻抗类风湿性关节炎的药理作用,为宽叶荨麻的开发利用提供实验依据.方法 将45只大鼠随机分为空白组,模型组,阳性药(雷公藤)组,宽叶荨麻水提物高、中、低浓度组,宽叶荨麻醇提物高、中、低浓度组,通过佐剂性关节炎模型来观察大鼠体重、原发侧和继发侧足跖肿胀度以及关节炎指数的变化.结果 与空白组相比,注射弗氏完全佐剂的各组大鼠足跖可见明显肿胀.与模型组相比,宽叶荨麻水提物和醇提物高、中、低浓度组可以不同程度的减轻大鼠原发侧和继发侧足跖肿胀度以及关节炎指数.结论 宽叶荨麻水提物高浓度组对大鼠类风湿性关节炎的抑制作用强,优于阳性药(雷公藤)组,在治疗类风湿性关节炎方面宽叶荨麻具有进一步研究和开发的价值.
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余甘子提取物对大鼠佐剂性关节炎的干预作用
目的 探讨余甘子提取物的醇溶超声提取的佳条件,及其对大鼠佐剂性关节炎的干预作用.方法 以余甘子为原料选择佳提取条件通过醇溶超声方法提取余甘子总黄酮,并测定其含量;建立大鼠佐剂性关节炎模型并于给药21d后以大鼠血清中TNF-α、IL-6含量和PGE2含量、血液常规检测及血液沉降率、类风湿因子等生理生化指标的变化,对余甘子总黄酮干预关节炎疾病的药效学进行研究.结果 经提取后得余甘子总黄酮5.56g,通过计算得总黄酮含量为59.07％,与模型组相比,余甘子黄酮高剂量组中TNF-α的含量显著降低,余甘子黄酮高、低剂量组血清中IL-6和PGE2含量显著降低.结论 余甘子总黄酮对大鼠佐剂性关节炎有一定的干预作用.
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超声波细胞粉碎仪与佐剂性关节炎模型的建立
目的:比较利用超声波细胞粉碎仪乳化弗氏完全佐剂(FCA)与单纯FCA诱导大鼠产生佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的差异.方法:FCA配制后实验组利用超声波细胞粉碎仪乳化20min,对照组直接使用,于大鼠右后足垫皮下注射诱导AA后,采用关节炎评分法对关节肿胀程度进行评估,作X线照片后记录放射学指数(RI),并用透射电镜观察眉窝淋巴结和病变关节滑膜的超微结构的变化,比较两组大鼠各项指标的差异.结果:实验组大鼠的关节肿胀先于对照组发生,程度要低;透射电镜显示实验组呈典型的类风湿性关节炎病变;两组大鼠关节的放射学指数无显著差异.结论:两种方法均能成功诱导大鼠产生佐剂性关节炎,利用超声波细胞粉碎仪乳化后的FCA更容易被大鼠吸收,造模周期短,病理组织更典型,成功率更高,为研究类风湿性关节炎(rheumatoid arithritis,RA)的发病机制及药物疗效提供理想的实验模型.
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胆汁泡蛋白促成核活性及其在不同人群含量分布的研究
我们利用超速离心法结合电泳区带定位法提纯了一种相对分子质量为33.5×103的泡蛋白，通过本研究探讨泡蛋白的促成核活性并观察不同人群的含量分布。 一、 材料和方法 1. 材料：相对分子质量为33.5×103泡蛋白（本院已制备）。胆固醇、弗氏佐剂、金黄色葡萄球菌A蛋白交联的辣根过氧化酶（HRP-SPA）等购自Sigma公司。偏光显微镜（Olympus公司），离子交换柱DEAE-Sephadex A50（Pharmacia分装），12×8孔酶标板及酶标读数仪（华美公司）。新西兰大白兔由复旦大学医学院实验动物中心提供。 2. 泡蛋白促成核活性检测： 参照Kibe等［1］的方法制备Small模拟胆汁，总脂浓度100 g/L，胆固醇饱和度1.2，胆盐/磷脂4.4；采用朱雷明等［2］的方法配制综合模拟胆汁，含3.80 mmol/L未结合胆红素。分别取40 μg泡蛋白加入1 ml Small模拟胆汁及综合模拟胆汁作为实验组，对照组用人体白蛋白（n=6）。成核时间（NT）的测定根据Holan等［3］的方法，并计算成核活性。 3. 泡蛋白抗血清的制备及效价鉴定： 将0.4 ml弗氏完全佐剂在新西兰大白兔双侧足蹼均匀多点注射激发免疫反应，2周后取50 μg泡蛋白混匀乳化液多点免疫，第5、8周行加强免疫，10周后采血、收集抗血清；经DEAE-Sephadex A50纯化IgG；双向免疫扩散法检测效价。
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风湿骨病候选复方祛风四味方对大鼠佐剂性关节炎治疗作用及机制研究
目的 观察腰痛宁(YTN)有效部位减毒拆方祛风四味方(QFSWF)对佐剂性关节炎(AA)继发性病变、相关炎症因子以及机体免疫功能的影响,探究QFSWF对类风湿性关节炎的可能作用机制及其作为风湿骨病候选中药复方的可行性.方法 随机将SD大鼠分为正常对照组,模型组,雷公藤多苷组(LGT,40 mg· kg-1),YTN组(150 mg· kg-1),QFSWF低、中、高剂量组(20,40,80 mg· kg-1),于大鼠左后足跖皮下注射弗氏完全佐剂(CFA,10 mg·mL-1)0.1 mL进行模型复制,观察各组大鼠足跖肿胀度及关节炎指数(AI);通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测AA大鼠血清中的细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的水平;摘取大鼠脾脏、胸腺,观察药物对AA大鼠免疫器官的影响.结果 与模型组比较,QFSWF组的大鼠脾脏指数及胸腺指数显著降低(P＜ 0.05,P＜ 0.01),体质量显著增加(P＜ 0.05,P＜ 0.01),QFSWF组、YTN组和LGT组的大鼠继发性病变显著受抑制,大鼠血清中的炎症因子IL-1β,TNF-α以及PGE2水平显著降低(P＜ 0.05,P＜ 0.01),且QFSWF组抑制IL-1β,TNF-α释放水平的活性显著优于YTN组(P＜0.01).结论 QFSWF通过降低炎症因子水平,提高机体的免疫能力而对佐剂型关节炎产生疗效,总体治疗指标优于YTN,可作为治疗风湿骨病候选中药复方.
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问荆合剂对类风湿性关节炎模型大鼠血清TNF-α的影响
目的 探讨问荆合剂对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)动物模型的疗效及其作用机制.方法 采用弗氏完全佐剂建立实验性大鼠RA动物模型,将50只大鼠按体重随机分为5组(空白对照组、模型对照组、问荆合剂组、甲氨碟呤组和问荆合剂加甲氨碟呤组).观察其治疗前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化.结果 各治疗组的血清TNF-α水平有显著的降低,以上各组内治疗前后比较有显著性差异(P＜0.01);各治疗组与模型对照组比较均有显著性差异(P＜0.01);问荆合剂加甲氨碟呤组与问荆合剂组、甲氨碟呤组比较有显著性差异(P＜0.05).结论 问荆合剂能明显下调RA模型大鼠前炎性因子TNF-α水平.问荆合剂对TNF-α的调控作用是其治疗RA的作用机制之一.
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新方法制备的PH-20疫苗的鉴定及其避孕效果观察
目的 观察以等比方法配制的PH-20偶联体疫苗以直肠方式注射后对豚鼠的免疫避孕效果.方法 45只雌性豚鼠随机分为3组,每组15只,实验1组注射新研发的PH-20疫苗,实验2组注射纯化的PH-20蛋白,而对照组注射等体积的生理盐水.用电镜观察该偶联体疫苗形态,Bradfords法测定免疫刺激复合物(ISCOM)中PH-20蛋白结合量,用竞争ELISA技术分别于注射后第2、4、6、8周检测血液中PH-20特异性抗体的水平.结果 ISCOMmat-PH-20偶联体疫苗呈典型的蜂窝状,颗粒直径28～32 nm,ISCOMmat-PH-20偶联体中PH-20的结合量约为0.057 9 mg/mL,实验1组血液中的PH-20特异性抗体水平在第2、4、6、8周与实验2组、对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05).实验1组PH-20特异性抗体含量在第2、4、6周逐渐升高(P<0.05),而PH-20特异性抗体含量第8周与第6周相比,差异无统计学意义(P＞0.05).实验2组在第2、4、6周时,PH-20特异性抗体水平与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),但组内第2、4、6周之间比较差异无统计学意义(P＞0.05),而PH-20特异性抗体含量从第6周开始下降,第6周与第8周相比差异有统计学意义(P<0.05),第8周与对照组相比无明显变化(P＞0.05).直肠注射8周后,实验1组与实验2组的雌性豚鼠的受孕率差异有统计学意义(2=52.84,P<0.05).结论 该偶联体疫苗具有较高的免疫活性,能诱导机体产生明显的体液反应,且持续时间较长,获得的避孕效率明显升高.
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秦皮提取物及秦皮甲素对大鼠类风湿关节炎的保护作用
目的：探讨秦皮提取物及秦皮甲素对大鼠类风湿关节炎的保护作用，比较秦皮提取物与秦皮甲素的抗炎效果。方法分别采用角叉菜胶和弗氏完全佐剂制备大鼠急性关节炎和类风湿关节炎模型，并给予秦皮提取物和秦皮甲素干预后，测量大鼠足厚度、体重变化，并记录关节评分，酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定大鼠血浆白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性变化。结果与空白组比较，2种炎症模型大鼠模型组的IL-1β，TNF-α，MDA水平显著上升，SOD活性显著下降（ P<0.05）；与模型组比较，在2种炎症模型中，秦皮提取物组和秦皮甲素组IL-1β，TNF-α含量均显著降低（ P<0.05）；在角叉菜胶模型中，秦皮甲素在致炎1，2 h表现出抑制作用（ P <0.05），秦皮提取物对 SOD活力有显著影响（ P <0.05），秦皮甲素组在降低大鼠 TNF-α水平上较秦皮提取物组显著（ P <0.05）；在佐剂模型中，秦皮提取物组和秦皮甲素组 MDA含量显著降低（ P<0.05），秦皮提取物组关节评分较低（ P<0.05），秦皮甲素组在降低IL-1β水平上较秦皮提取物组更显著（ P<0.05）。结论秦皮提取物及秦皮甲素对类风湿关节炎有一定的保护作用，秦皮甲素可能为秦皮的主要抗炎物质，其作用机制可能与调节 IL-1β和TNF-α水平有关。
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飞龙掌血提取物对风寒湿佐剂性关节炎大鼠Th17/Treg平衡的影响
目的:探讨飞龙掌血提取物对辅助性T细胞/调节性T细胞(Th17/Treg细胞)平衡的调节而抑制大鼠风寒湿佐剂性关节炎.方法:取SD雄性大鼠,采用物理方法模拟风寒湿环境造模结合弗氏完全佐剂注射造模,将大鼠随机分为空白对照组、模型组、雷公藤多苷片10mg/kg剂量组、飞龙掌血280、70mg/kg剂量组,每组10只.检测大鼠足跖容积、脾、胸腺指数;苏木素-伊红(HE)染色观察足跖关节及膝关节滑膜病理形态;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白介素-6、10、17(IL-6、IL-10、IL-17)和转化生长因子-β(TGF-β)水平.结果:与空白对照组相比,模型组大鼠体重明显减轻,足跖容积显著增加,脾、胸腺指数明显升高、关节滑膜增生及炎性细胞浸润,血清IL-6和IL-17水平显著升高,血清IL-10和TGF-β3含量明显降低.与模型组相比,飞龙掌血280mg/kg剂量组能显著增加大鼠体重,改善大鼠足跖关节及膝关节滑膜病理损伤;飞龙掌血280、70mg/kg剂量组能明显降低大鼠足跖容积,抑制脾、胸腺指数;同时显著降低血清IL-6和IL-17水平,升高血清IL-10和TGF-β含量.结论:飞龙掌血具有良好的抗风寒湿佐剂性关节炎作用,其作用机制可能涉及Th17和Treg细胞之间的平衡.
关键词： 飞龙掌血 风寒湿 弗氏完全佐剂 关节炎 辅助性T细胞/调节性T细胞 -
荨麻抗类风湿性关节炎的实验研究
目的 探讨荨麻抗类风湿性关节炎的药理作用,为荨麻的开发利用提供实验依据.方法 将70只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(雷公藤)组、荨麻水提物高、低浓度组、荨麻醇提物高、低浓度组,通过佐剂性关节炎模型来观察大鼠体重、原发侧和继发侧足跖的肿胀度及关节炎指数的变化.结果 与空白组相比,注射弗氏完全佐剂的各组大鼠足跖可见明显肿胀;与模型组相比,荨麻水提物高浓度组可明显减轻大鼠原发侧和继发侧足跖的肿胀度以及关节炎指数;其他3组对足跖肿胀度及关节炎指数的抑制作用较弱.结论 荨麻水提物高浓度组对大鼠类风湿性关节炎的抑制作用强,仅次于雷公藤组,荨麻治疗类风湿性关节炎具有研究和开发的价值.
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风湿痹痛胶囊抗炎消肿及镇痛作用的实验研究
目的:观察风湿痹痛胶囊的镇痛及对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的抗炎消肿作用.方法:采用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型,观察足关节肿胀及炎症指数的改变:采用热板法与扭体法,观察风湿痹痛胶囊对小鼠的镇痛作用.结果:风湿痹痛胶囊能抑制大鼠继发性踝关节炎性肿胀,降低炎症指数;能延长热板法实验中小鼠舔后足的时间,能明显减少醋酸所致小鼠扭体的次数(P＜0.05-0.01),其作用呈一定的剂量依赖关系.实验证实高剂量组与美洛昔康组及阿斯匹林组无明显差异.结论:风湿痹痛胶囊具有较好的抗炎消肿和镇痛作用.
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侗族传统抗风湿药对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用
目的:研究了侗族传统抗风湿药对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的治疗作用.方法:采用大鼠足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠AA 模型.足容积法测量继发侧足肿胀度,进行疼痛评分和多发性关节炎评分.结果:侗族传统抗风湿药2000 mg*kg-1*d-1剂量组于第14 d开始不同程度降低AA大鼠继发侧足肿胀度、关节疼痛评分、多发性关节炎指数(P<0.05).结论:侗族传统抗风湿药对佐剂性关节炎大鼠有明显的抗炎治疗作用.
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气候因素对Ⅱ型胶原蛋白所致类风湿关节炎模型大鼠关节炎症、免疫脏器指数及组织形态的影响
目的 观察气候因素对Ⅱ型胶原蛋白所致类风湿关节炎(RA)模型大鼠关节炎症、免疫脏器指数及组织形态的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为空白组、Ⅱ型胶原组、Ⅱ型胶原+人工风寒湿组(简称风寒湿组)、Ⅱ型胶原+人工风湿热组(简称风湿热组)4组,每组10只,雌雄各半.空白组给予等量生理盐水,Ⅱ型胶原组皮下注射Ⅱ型胶原佐剂混合液,其余2组采用Ⅱ型胶原佐剂混合液诱导,外加人工气候因素制备RA大鼠模型.造模28 d后,比较各组大鼠的关节炎评分、胸腺指数、脾脏指数,并观察各组大鼠左后肢踝关节的组织形态改变.结果 与空白组比较,各模型组大鼠均出现了不同程度的足趾关节肿胀,关节炎评分均显著升高,差异有高度统计意义(P＜0.01);各模型组脾脏指数均有所升高,其中风寒湿组与空白组比较差异有统计意义(P＜0.05);组织形态观察,造模后,Ⅱ型胶原组、风寒湿组和风湿热组大鼠踝关节出现不同程度的滑膜增生、淋巴细胞浸润.结论 气候因素对Ⅱ型胶原蛋白所致RA模型大鼠关节炎症、组织形态具有一定的影响,能加重RA大鼠关节的病理损伤.
