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电针对大鼠胃黏膜损伤相关信号分子的影响
目的 探索电针对胃黏膜损伤大鼠胃黏膜细胞损伤修复的作用机制.方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、针刺治疗组,每组10只,应用乙醇灌胃法造成胃黏膜损伤大鼠模型,用电针对胃黏膜损伤大鼠治疗10天,采用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得各组大鼠胃黏膜细胞的蛋白质指纹图谱,对比分析各组的差异蛋白质质/荷比峰.结果 模型组大鼠胃黏膜细胞蛋白质SELDI-TOF-MS蛋白指纹图谱与正常组比较有4个蛋白质质/荷比峰差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中两个蛋白质质/荷比峰明显升高(P<0.05或P<0.01),两个蛋白质质/荷比峰明显降低(P<0.05);针刺治疗组与正常组比较共有4个蛋白质质/荷比峰差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中1个蛋白质质/荷比峰明显升高(P<0.05),3个蛋白质质/荷比峰明显降低(P<0.05或P<0.01);针刺治疗组与正常组比较亦有4个蛋白质质/荷比峰差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且4个蛋白质质/荷比均为降低(P<0.05或P<0.01).结论 电针对胃黏膜损伤的修复可能不是单纯针地对某一个或两个蛋白的调节发挥治疗作用的,而可能是多个蛋白质参与的复杂的链环反应.
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非小细胞肺癌放化疗患者血清蛋白质谱分析的初步研究
目的 通过对非小细胞肺癌患者放化疗前后及正常对照组血清蛋白质谱的测定,筛选差异蛋白,观察治疗前后血清蛋白质组谱变化.方法 应用SELDI-TOF-MS及CM-10芯片对35例正常对照组、35例治疗前非小细胞肺癌患者及26例放化疗后非小细胞肺癌患者采集的血清样品进行蛋白质指纹图谱测定,并应用BioMarker Wizard 3.01及BioMarker Pattern System 5.01分析软件对测得数据进行处理及建立诊断模型.结果 非小细胞肺癌组与正常对照组共检测到251个蛋白质峰,筛选出差异蛋白质峰16个,其中肺癌组8个蛋白质峰表达升高,8个蛋白质峰表达降低.以质荷比(M/Z)为2572.1、2885.8、3870.4、4161.4、5739.7和8164.3的6个蛋白质峰为依据组合构建分类决策树模型,原始判别总准确率为87%,敏感性为91%,特异性为83%;交叉验证总准确率为76%,敏感性为80%,特异性为71%.观察16个差异蛋白质峰的表达在放化疗前后的变化,显示均发生了不同程度的变化,趋向健康对照组,其中质荷比为2572.1、2885.8、4664.8、9228.4和9396.4的5个蛋白质峰在治疗前后发生显著变化.结论 SELDI-TOF-MS技术对差异蛋白的筛选及治疗疗效的判定可能有一定的意义,需要进一步研究证明.
关键词： 癌 非小细胞肺/放化疗法 血清蛋白谱分析 蛋白芯片技术 -
蛋白芯片技术检测结核分枝杆菌的临床应用
1 材料与方法1.1 标本来源 2007年11月至12月门诊和病房住院患者空腹血标本357例,其中男182例,女175例.临床确诊结核病者111 例,非结核病246例.
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2种ENA多肽抗体谱检测方法的比较
目的 利用蛋白质芯片技术检测患者血清中ENA多肽抗体谱,并以欧蒙斑点法为金标准对蛋白质芯片法检测ENA多肽抗体谱进行评价分析.方法 同时用蛋白质芯片法和欧蒙斑点法测定患者血清中ENA多肽抗体谱,并对结果进行比较.结果 蛋白质芯片法测定结果同斑点法相比无显著性差异.结论 蛋白质芯片法具有较高的特异性与阴性预示值,且具有高通量、样品用量少、操作简单、快速、易于标准化等优点,可作为临床实验室参选方法.
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结核菌培养阳性患者303例蛋白芯片技术与涂片染色的对比研究
结核病是严重危害人类健康的慢性传染病,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题.当前对结核病的诊断显得尤为重要,其中实验室诊断是较为主要的一个诊断技术.为了探讨不同方法的诊断价值,我们选择较为简单、快捷的结核分枝杆菌蛋白芯片技术与结核分枝杆菌涂片技术的对比研究,现报告如下.
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乙醇灌胃对大鼠胃黏膜损伤修复相关信号分子的探讨
目的:为了探讨乙醇灌胃法对SD大鼠和其自身启动的修复机制及相关的信号分子的影响.方法:雄性SD大鼠20只,适应性喂养1周后,禁食24h,取10只用无水乙醇按1mg/kg灌胃造模型,其余10只灌以相同剂量的生理盐水.24h后采用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)及WCX2蛋白芯片获得胃黏膜损伤大鼠和对照组大鼠胃黏膜细胞的蛋白质指纹图谱,通过对比分析两组的差异的蛋白质荷比峰,从而寻找出乙醇致胃黏膜损伤的特异相关分子.结果:对照组与模型组比较共有4个蛋白质有显著性差异(P＜0.05),其中两个蛋白质/荷比峰明显升高,分别是3727.126、8586.021,两个蛋白质/荷比峰明显降低,分别是10777.71、18708.49.
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宫颈局部细胞因子在宫颈持续HR-HPV感染中的表达及意义
目的 探讨促炎因子:白介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α);趋化因子:IL-8;Th1:IL-2、IL-12、干扰素(IFN)-γ;Th2:IL-10、IL-4在宫颈持续HPV感染免疫微环境中的表达及意义.方法 用蛋白芯片技术检测20例HPV一过性感染者、63例HPV持续感染者22例慢性宫颈炎、19列子宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、22例子宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL),阴道灌洗液中IL-2、IL-12、IL-1β、IL-8、IL-10、IL-4、TNF-α、IFN-γ的表达.结果 TNF-α及IL-1β在一过性感染组中的表达低于HPV持续组(P＜0.001、P=0.035),且TNF-α在慢性炎症组、LSIL及HSIL组中的表达均高于一过性感染组(P＜0.05);IL-10在一过性感染组中的表达高于慢性炎症组及LSIL(P=0.007、P=0.013),而在LISL中的表达低于HSIL(P=0.027);IL-8在LSIL中的表达低于HSIL (P=0.039);IL-2、IL-12及IFN-γ在各组间表达无统计学意义.结论 促炎因子IL-1β、TNF-α及趋化因子IL-8在HPV持续感染或宫颈病变过程中表达增加,为HPV持续性感染及宫颈病变的发生发展提供有利的免疫微环境;IL-4可调节宫颈局部促炎及抗炎反应的平衡;IL-10可能在HPV感染及宫颈病变中不同阶段起着不同的作用.
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蛋白芯片技术联合结核菌素试验对痰阴肺结核病快速诊断的价值研究
目的 探讨分析蛋白芯片技术联合结核菌素(PPD)试验对痰菌涂阴性肺结核快速诊断的价值.方法 经数字表法随机选取2014-03-2015-03间到英市慢性病防治医院就诊痰菌涂阴性肺结核患者150例,按照随机数字表的方法分为对照组A、对照组B和观察组.其中接受蛋白芯片技术诊断、PPD试验及蛋白芯片技术联合PPD试验联合诊断患者各50例,比较三组快速诊断效果.结果 对照组A、对照组B和观察组阳性检出率分别为54-00%、52-00%、80-00%,观察组的阳性检出率显著高于其他两组的阳性检出率,差异有统计学意义的(P<0-05);对照组A灵敏度为64-29%,特异度为87-50%;对照组B灵敏度为61-90%,特异度为75-00%;观察组灵敏度95-24%,特异度87-50%;观察组的灵敏度明显高于对照组A、对照组B(P<0-05),但观察组的特异度与对照组A、对照组B相比无统计学意义(P>0-05).结论 蛋白芯片技术联合PPD试验对痰菌涂阴性肺结核快速诊断的效果非常显著,相对于单一蛋白芯片技术临床诊断的效果更为显著,应推广联合检查诊断的其临床应用范围.
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应用蛋白芯片技术检测结核杆菌抗体的研究
目的 评价蛋白芯片技术检测结核杆菌抗体的应用价值.方法应用结核杆菌蛋白芯片检测仪和试剂盒检测80例结核病患者和85名健康人群的血清标本.结果结核病患者标本阳性率为86.25%,健康人群阴性率是96.47%;结核杆菌抗原的抗体检出率以脂阿拉伯甘露聚糖(IAM)为高(81.25%);2种抗原的抗体均为阳性的比例(51.25%)高于3种抗原的抗体均为阳性的比例(27.5%)和单个抗体阳性的比例(7.5%);蛋白芯片检测法的阳性预测值和阴性预测值分别是95.83%和88.17%.结论蛋白芯片技术具有简便、快速、敏感性高、特异性强和检测成本较低的特点,是结核病辅助诊断的有效方法.
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蛋白芯片技术检测CK-MBmass
目的:利用蛋白芯片技术检测患者血浆中CK-MB酶蛋白含量(CK-MBmass),并与电化学发光技术(ECL)的检测结果进行客观分析评价.从而评价这种新的心肌标志物测定方法的可行性.方法:收集本院40例疑似心损患者血浆并于-30℃冻存,同时进行蛋白芯片技术与ECL法检测.结果:经相关性检验,前述两种方法检测CK-MBmass的结果其线性方程为y=1.061X+2.32,相关系数r=0.986.蛋白芯片法测定CK-MBmass其准确性和精密性都符合临床要求.结论:蛋白芯片技术与ECL相比,检测结果差异无显著性.蛋白芯片法操作简单,样品用量少,具有快速(快仅需7 min)、准确、检测指标多等特点,可用于急性心损的早期诊断和治疗效果及预后的判断.
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蛋白芯片技术检测幽门螺旋杆菌的毒素抗体
目的:利用蛋白芯片技术检测病人血清中幽门螺旋杆菌(Hp)毒素相关蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)及尿素酶抗体(Ure),并与免疫印迹技术进行客观分析评价.方法:对145例临床诊断Hp感染的病人留取血清,深低温冻存同时作蛋白芯片检测和免疫印迹检测.结果:经X2检验,前述两种方法检测CagA、VacA、Ure抗体的结果对比均P＞0.05.结论:蛋白芯片技术与免疫印迹技术相比,检测结果均差异无显著性.蛋白芯片法操作简单,样品用量少,具有快速、准确、检测指标多等优势,是一 种很有发展前途的检验技术.
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少精子症精浆差异表达蛋白的筛选、鉴定及其诊断价值
目的 探讨用蛋白质芯片技术筛选少精子症患者精浆中蛋白质表达谱,寻找精浆中的标志性蛋白.方法 采用表面增强激光解离飞行时间质谱技术(surface-enharlced Iaser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS),运用IMAC3蛋白质芯片检测70例少精子症患者和60例正常对照组精浆中蛋白质谱,获得的蛋白质谱采用Biomarker Wizard软件分析,初步筛选蛋白质峰,结合生物信息学的支持向量机(support vector machines,SVM)方法建立少精子症患者的蛋白质指纹图谱模型并鉴定其成分.结果 在芯片上捕获到168种蛋白质,用质谱仪筛选出少精子症患者与正常对照组相比的18种差异蛋白,从中再次筛选出2种蛋白质组成少精子症的蛋白质谱优化模型,少精子症患者中质荷比(m/z)分别为6632.8、15105.1的2种蛋白质表达上调.模型经三倍交叉验证后,其敏感性和特异性分别为91.4%和93.3%,阳性预测值为92.3%.结论 蛋白质芯片技术可以快速、有效地筛选出少精子症患者精浆差异蛋白,结合SVM可建立一个由2种蛋白质组成的蛋白质指纹图谱模型,可对少精子症做很好的诊断预测,对这2种蛋白质尤其是m/Z为6632.8的蛋白质进行研究,有助于少精子症病因学进展及诊断标记物的发现.
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γ-干扰素释放试验对活动性肺结核的辅助诊断价值
目的 探讨结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在活动性肺结核中的诊断价值.方法 应用T-SPOT.TB试剂盒对153例活动性肺结核(A组)和81例其他肺部疾病(B组)患者的外周血中MTB特异性T淋巴细胞进行检测,同时对两组患者进行LAM、16KD、38KD抗体的检测.结果 T-SPOT.TB对活动性肺结核的敏感性为78.4%(120/153),要明显高于对照组24.7%(20/81)(χ2=80.91,P<0.001).T-SPOT.TB检测的敏感性要明显高于16KD抗体10.5%(χ2=52.26,P<0.001)、也要高于38KD抗体(54.9%)、LAM抗体(58.8%),但其差异无统计学意义(χ2=0.62、χ2=0.50,P值均>0.05).T-SPOT.TB检测的特异性为75.3%(61/81),要低于16KD抗体84.0%(68/81)(χ2=5.59,P<0.05);也要低于38KD抗体80.2%(65/81)和LAM抗体81.5%(65/81),但差异无统计学意义(χ2=0.45、χ2=0.50,P值均>0.05).菌阳患者的ESAT-6、CFP-10的SFC分别为47.10±34.53和63.02±35.92,要明显高于菌阴肺结核(P<0.05、P<0.01).重症患者的ESAT-6、CFP-10的SFC分别为60.84±31.76和74.75±33.75,明显高于轻症患者(P<0.001).通过受试者工作特征曲线(ROC曲线),当EAST-6的SFC取值21.5时具诊断价值,其灵敏度为74.8%,特异度为94.5%;CFP-10取值19.5时具诊断价值,灵敏度为77.6%,特异度为91.8%.结论 T-SPOT.TB对活动性肺结核的诊断有一定的价值,和其他血清学结核抗体检测相比有一定的优势,但并不十分突出.两种抗原的SFC值与疾病的轻重程度相关,SFC的具体数值有一定的临床价值和意义.
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结核杆菌蛋白芯片检测在肺结核诊断中的价值
目的 评价结核杆菌蛋白芯片检测技术在肺结核诊断中的价值.方法 应用结核杆菌蛋白芯片检测仪和试剂盒检测300例肺结核患者和100例健康人群的血清标本,运用概率论对该实验真实性和可靠性做出评价.结果 结核蛋白芯片检测的灵敏度为73.7%(221/300);特异度为97%(97/100);误诊率3%(3/100);漏诊率26.3%(79/300);准确度79.5%(318/400).结论 蛋白芯片技术具有简便、快速、敏感性高、特异性强的特点,是结核病辅助诊断的有效方法 .
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SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中的应用
SELDI蛋白芯片技术全称为表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术,是近年用来研究蛋白质组学的一项新的技术平台,具有高通量、高效率、高灵敏度等特点,可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成.利用SELDI技术分析比较正常人血清、体液、组织蛋白质与异常者间的表达差异,筛选出与肿瘤相关的蛋白标记并进行确认,用于疾病的早期诊断以提高生存率.目前这一技术已运用于多种肿瘤的早期诊断研究中,并已显示出美好的应用前景.
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蛋白芯片技术在儿童幽门螺杆菌感染诊断中的应用
目的 探讨幽门螺杆菌(HP)抗体检测蛋白芯片技术在儿童HP感染诊断中的应用价值.方法 本院经胃镜检查的120例患儿,行快速尿素酶试验(RUT)及组织切片Giemsa染色.同时采用HP抗体蛋白芯片检测患儿血清中抗CagA、抗VacA、抗Ure、抗Hsp60及抗RdxA IgG抗体.以RUT及Giemsa染色两项均阳性作为HP感染阳性的诊断金标准.结果 120例患儿中,确诊HP感染阳性者60例.Ure抗体、Ure + CagA抗体、Ure + VacA抗体及Ure+CagA + VacA抗体均阳性对HP感染的诊断价值与金标准比较,吻合度和Kappa一致性检验均有统计学意义(P<0.001).其中Ure + CagA抗体诊断的敏感性为81.7%,特异性为91.7%,准确度为86.7%,阳性预测值为90.7%,阴性预测值为83.3%,诊断HP现症感染具临床价值.结论 HP蛋白芯片抗体检测,特别是Ure结合CagA抗体检测,对诊断HP感染有较高的临床价值,可作为HP现症感染的诊断方法.
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应用蛋白芯片技术筛选针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠的凋亡相关蛋白
目的应用蛋白芯片技术筛选针刺对缺血再灌注损伤( CIRI)大鼠脑组织凋亡相关蛋白。方法SD健康大鼠40只随机分为4组：假手术组、模型组、针刺对照点组(均取穴左侧旁开0.3 cm的非经非穴点)、针刺穴位组(针刺大椎、百会、人中)，每组10只，各组大鼠6次处理后取左侧海马脑组织，采用720磷酸化抗体蛋白芯片检测处理后的脑组织细胞信号蛋白磷酸化的变化，然后筛选各组上调、下调显著(磷酸化水平变化上调≥1.5倍，下调≤0.67倍)且与凋亡相关的蛋白。结果与假手术组比较，模型组上调≥1.5倍与凋亡相关的蛋白8种，下调≤0.67倍的蛋白4种；与模型组比较，对照点组上调≥1.5倍与凋亡相关的蛋白5个，下调≤0.67倍的蛋白8个；穴位组上调≥1.5倍与凋亡相关的蛋白2个，下调≤0.67倍的蛋白11个，其中下调模型组中上调的蛋白3种。结论针刺大椎、百会、人中(穴)对CIRI大鼠通过调整多个凋亡相关的蛋白表达变化抑制凋亡实现脑保护作用。
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蛋白芯片技术在肿瘤标志物中的研究进展
肿瘤尤其是恶性肿瘤严重威胁着人类的健康,肿瘤标志物的检测对恶性肿瘤的早期诊断、后期治疗有着重要的意义.但是传统单一的肿瘤标志物检测在诊断方面有其局限性,而多肿瘤标志物联合检测则更有助于肿瘤的早期诊断和后期治疗.生物芯片技术的发展为多肿瘤标志物联合检测创造了条件.
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小儿急性肠系膜淋巴结炎44例病原学检测分析
目的 了解引起小儿急性肠系膜淋巴结炎的病原学情况.方法 (1)收集44例小儿急性肠系膜淋巴结炎患儿的血清标本,采用蛋白芯片技术同时检测肺炎衣原体(CPn)、肺炎支原体(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IFA)、副流感病毒(PIV)的抗体.(2)采用胶体金法对部分患儿行柯萨奇病毒CA16型、肠道病毒71型IgM抗体的检测.结果 (1)44例患儿检出病原25例,总阳性率56.8%,其中IFA检出率为80%(20/25),MP为48%(12/25),ADV为44%(11/25).72%(18/25)为混合感染,其中IFA+ADV感染检出率高,占混合感染的44%(8/18).(2)21例患儿胶体金法检测柯萨奇病毒CA16型与肠道病毒71型均为阴性.结论 (1)引起小儿急性肠系膜淋巴结炎病原以呼吸道感染常见病原体如IFA、ADV、MP为主,且大多数是混合感染,以IFA+ADV常见.(2)蛋白芯片技术操作简单,且能同时检测多种病原体,提高了效率,降低了成本.
关键词： 小儿急性肠系膜淋巴结炎 蛋白芯片技术 病原学 -
336例上消化道疾病患者的幽门螺杆菌抗体谱检测结果分析
目的 探讨蛋白芯片技术检测幽门螺杆菌(Hp)抗体谱在上消化道疾病诊断的价值.方法 应用蛋白芯片技术对336例上消化道疾病患者(慢性胃炎120 例、消化性溃疡178例、上消化道肿瘤38 例)和58例门诊体检者(对照组)进行Hp抗体谱(CagA、VacA、Ure、Hsp60、RdxA)检测,分析Ⅰ型和Ⅱ型Hp在各组间的感染情况.结果 Ⅰ型Hp感染率消化性溃疡组为36.52%,上消化道肿瘤组47.36%均明显高于对照组的10.53%、慢性胃炎组的16.67%,差异有统计学意义(P＜0.01);上消化道肿瘤组的Hsp60抗体阳性率44.7%显著高于其他3组(P＜0.001).结论 具有高毒力因子(CagA及VacA)的Ⅰ型Hp是上消化道疾病的主要致病菌株;Hsp60抗体可以作为人群上消化道肿瘤筛选的一种标志物;Hp蛋白芯片技术是一种敏感、特异、快速的诊断Hp感染的方法 ,有助于临床诊断和制订治疗方案.
