首页 > 文献资料
-
右旋柠烯乳剂对人胃癌移植瘤生长和转移的抑制作用
目的研究并探讨右旋柠烯乳剂(D-limonene)对人胃癌生长和转移的抑制作用及其机制.方法采用人胃癌BGC-823细胞株经反复传代成实体瘤的完整组织块,建立人胃癌裸小鼠原位移植瘤模型.将40只荷瘤裸小鼠随机分成4组,移植后第5d开始分别用生理盐水灌胃、5-氟尿嘧啶(5-FU)腹腔注射、D-limonene灌胃、D-1imonene灌胃+5-FU腹腔注射共7周.第8周处死动物,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率,检测肿瘤细胞凋亡指数(AI)、肿瘤微血管密度(MVD)及免疫组织化学测定肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化,光镜与电镜观察组织细胞超微结构变化;观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况.结果D-limonene组、联用组分别与对照组相比,胃癌的原位肿瘤瘤重与抑瘤率、AI、MVD、VEGF下调,差异有显著性(P＜0.05).腹膜、肝转移受到明显抑制(P＜0.05).结论D-limonene通过抑制肿瘤微血管形成,诱导胃癌细胞凋亡,抑制了体内胃癌的生长和转移.
-
右旋柠烯对HL-60、K562白血病细胞体外作用的研究
本研究观察右旋柠烯(d-limonene, D-L)对HL-60和K562白血病细胞增殖凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制.首先采用碘化丙锭染色法观察右旋柠烯对HL-60、K562细胞增殖的影响,再通过细胞形态学观察、流式细胞术分析、免疫细胞化学半定量测定突变型p53、bcl-2、bax基因的表达水平,系统观察D-L对HL-60、K562细胞体外诱导凋亡的情况.结果表明: D-L抑制HL-60和K562细胞的增殖,IC50均为0.75 mmol/L,呈剂量时间依赖关系;D-L诱导HL-60、K562细胞凋亡;D-L在诱导HL-60细胞凋亡过程中随作用浓度增加,bcl-2的表达下降;D-L在诱导K562细胞凋亡过程中随作用浓度增加,突变型p53及bcl-2的表达下调,而bax的表达上调.结论: D-L抑制HL-60和K562细胞增值并诱导其凋亡;突变型p53,bcl-2,bax参与了D-L诱导凋亡的基因调控.
-
右旋柠烯对乳腺癌淋巴管生成和淋巴结转移影响的实验研究
目的观察右旋柠烯对人乳腺癌淋巴管生成和淋巴结转移的影响,探讨其抗肿瘤转移机制.方法 24只裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-435,建立乳腺癌模型,分成模型对照组、右旋柠烯组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组.检测肿瘤体积和腋窝淋巴结转移率,免疫组化法检测乳腺癌组织微淋巴管密度(LMVD)和血管内皮生长因子C(VEGF-C).结果右旋柠烯组肿瘤体积(0.824±0.31)明显减小,腋窝淋巴结转移率(25.0%)明显减低,与模型对照组(2.178±0.35、87.5%)比较,差异有统计学意义(均P＜0.01),与5-FU组(0.758±0.29、50%)比较,差异无统计学意义(均P＞0.05);右旋柠烯组LMVD(13.80±5.91)明显降低,VEGF-C表达(3.54±0.68)下调,与模型对照组(28.59±7.21、5.40±0.89)和5-FU组(25.28±5.35、5.21±0.78)比较,差异有统计学意义(均P＜0.01,均P＜0.05).结论右旋柠烯可能通过影响VEGF-C诱导的淋巴管生成抑制乳腺癌淋巴结转移.
-
右旋柠烯诱导人胃癌细胞凋亡
目的探讨右旋柠烯(D-limonene)诱导人胃癌细胞株凋亡作用的机制.方法采用噻唑蓝(MTT)比色法、电镜、流式细胞术以及免疫细胞化学法,对p53和bcl-2在肿瘤细胞内的表达以及细胞凋亡的定性与定量指标进行检测.结果经D-limonene处理的BGC-823细胞出现核固缩,染色质边集,凋亡小体形成.凋亡细胞发生率与药物浓度呈正相关,即药物浓度为0.25 μg/ml(48 h),凋亡细胞的发生率从(2.71±0.78)%上升至(31.62±7.81)%.经D-limonene处理的BGC-823细胞内p53蛋白表达较对照组明显增加,bcl-2蛋白表达较对照组降低.结论 D-limonene对人胃癌细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡,升提p53及降低bcl-2的蛋白表达为其诱发肿瘤细胞凋亡的机制之一.
关键词： 胃肿瘤 右旋柠烯 细胞凋亡 BGC-823细胞株 -
右旋柠烯对乳腺癌淋巴结转移影响的实验研究
目的 探讨右旋柠烯对乳腺癌淋巴结转移的影响.方法 人乳癌细胞株MDA.MB-435裸小鼠置乳腺原位种植建立乳腺癌模型,分3组进行实验,免疫组织化学方法检测乳腺癌LMVD.VEGF-C,比较各组肿瘤体积大小,转移率、LMVD及VEG-C.结果 右旋柠烯组乳癌生长和淋巴结转移受到抑制,LMVD降低.乳癌转移率下降,VEGF-C表达下调.结论 右旋柠烯通过抑制乳腺癌组织淋巴管增生,减少淋巴管密度,从而达到抑制乳腺癌的生长和转移.
-
右旋柠烯对大鼠大肠癌淋巴道转移的影响
目的 观察右旋柠烯(D-Limonene)对大鼠大肠癌淋巴结转移及淋巴管生成的影响,为临床大肠癌术后治疗提供理论支持.方法 二甲基肼诱发大鼠大肠癌模型40例.14周将大鼠分为治疗组和对照组,前者给予5％D-limonene(色拉油稀释)灌胃,后者给予等量色拉油做阴性对照.28周取材,免疫组化染色LYVE-1标记淋巴管,观察其分布.结果 LYVE-1标记的淋巴管多分布在癌周组织,中心区域未见淋巴管的阳性表达,D-limonene治疗组淋巴结转移率为5％,淋巴管数密度为2.4±0.83,与对照组(40％,6.1±1.35)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 D-limonene减少肿瘤组织淋巴管的生成,降低淋巴道的转移.
-
右旋柠烯对幼鼠颞叶癫痫海马星形胶质细胞的影响
探讨右旋柠烯(D-L)对癫痫幼鼠海马星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的影响.利用尼氏染色及免疫组化技术观察匹罗卡品致癫痫的幼鼠经药物(左乙拉西坦、丙戊酸钠、D-L)治疗后星形胶质细胞形态学变化和GFAP的表达.尼氏染色显示药物治疗后幼鼠海马胶质神经元脱失较未治疗的幼鼠明显减轻;海马GFAP免疫阳性细胞数在药物治疗后的幼鼠较未治疗幼鼠明显减少(P＜0.05).幼鼠癫痫发作可能与海马星形胶质细胞增生有关,D-L对发育期大鼠颞叶癫痫星形胶质细胞的增生及GFAP的表达似有抑制作用,推测D-L可能具有抗癫痫作用.
-
右旋柠烯对人结肠癌LS174T细胞p-ERK和p-Akts表达的影响
目的 研究右旋柠烯(D-limonene)对人结肠癌细胞(LS174T)中信号传导分子ERK1/2、Akt及其磷酸化蛋白(p-ERK和p-Akts蛋白)表达的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测右旋柠烯对LS174T细胞增殖的抑制作用;采用Western blot方法检测不同浓度右旋柠烯对LS174T细胞中ERK1/2、Akt及其磷酸化蛋白表达情况的影响.结果 右旋柠烯作用LS174T细胞48h后,呈剂量依赖性抑制细胞增殖;Western blot结果显示右旋柠烯对细胞中ERK1/2、Akt蛋白的表达没有明显影响,但显著下调p-ERK1/2蛋白和p-Akts的表达.结论 右旋柠烯抑制LS174T细胞增殖可能与其抑制p-ERK1/2和p-Akts表达有关.
-
右旋柠烯的药理毒理及临床应用研究进展
柠檬烯是自然界中常见的单萜类化合物,是一种具有柠檬香味的挥发油,主要存在于一些柑橘(橙、柠檬和葡萄柚)中.右旋柠烯是柠檬烯主要的存在形式,动物试验表明右旋柠烯具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化应激等作用.毒性研究表明右旋柠烯毒性极低,虽然对雄性大鼠可致肾小管肿瘤,但对小鼠和雌性大鼠无致癌性,对人类无致癌、致突变和肾毒性.临床上右旋柠烯用于溶解胆结石、缓解胃灼热等.本文综述了其药理毒理及临床应用的研究进展.
-
右旋柠烯对小鼠胃癌 COX-2表达及淋巴管生成的影响
目的：探讨右旋柠烯对胃癌组织中淋巴管的生长以及环氧化酶-2（COX-2）表达的影响，为癌的防治提供形态学依据。方法将50只昆明小鼠用致癌剂苯并芘（B（a）P）灌胃12周构建小鼠胃癌模型。确定胃癌形成之后将其随机分成治疗组（n＝25）、对照组（n＝25）。治疗组用5％右旋柠烯灌胃干预；对照组用等量色拉油灌胃。另选取10只昆明小鼠用等量色拉油灌胃作为正常组（n＝10）。第24周取材，测量肿瘤体积。采用 HE 染色观察癌组织的生长、浸润；免疫组织化学 S-P 法分析 COX-2和淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1（LYVE-1）在各组组织及淋巴管中的表达。结果治疗组肿瘤发生率为52％低于对照组的82％（P ＜0．05），其肿瘤体积亦小于对照组[（0．758±0．33）cm3比（2．124±0．29）cm3，P ＜0．05]。光镜下 HE 染色可见正常胃壁的层次结构被癌组织破坏，并有大量炎性细胞浸润，对照组癌细胞侵袭范围广而深，多达肌层；治疗组侵袭范围较小，主要限于黏膜及黏膜下层。免疫组织化学染色治疗组胃癌组织 COX-2呈弱阳性表达且低于对照组（39％比78％，P ＜0．05），而对照组较正常组表达明显增高（78％比20％，P ＜0．05）。LYVE-1的表达符合毛细淋巴管的典型形态特征，治疗组胃癌周边组织微淋巴管与对照组相比管腔较小，微淋巴管密度（LMVD）较少，但与正常组比较明显增多（均 P ＜0．05）。结论右旋柠烯对肿瘤生长有抑制作用，可降低瘤细胞 COX-2的表达并影响淋巴管生成；LMVD 和 COX-2的阳性表达率均与胃癌的生长浸润有关。
-
右旋柠烯乳剂对人胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用
目的研究右旋柠烯乳剂(D-limonene)对人胰腺癌生长和转移的抑制作用并探讨其作用机制.方法采用人胰腺癌完整组织块建立人胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型.移植后第5天开始分别用生理盐水灌胃(剂量为每天0.3 ml/只,对照组)、5-氟尿嘧啶腹腔注射(剂量为每天30mg/kg,5-FU组)、D-limonene灌胃(剂量为每天15 ml/kg,D-limonene组)、D-limonene灌胃+5-FU腹腔注射(剂量同前,联用组),共用7周.移植后第8周处死动物,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率,检测胰腺癌细胞凋亡指数(AI),免疫组织化学检测肿瘤组织微血管密度(MVD)与血管内皮生长因子(VEGF),并观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况.结果对照组、5-FU组、D-limonene组、联用组的原位肿瘤瘤重分别为2.73±0.23、2.55±0.28、1.49±0.09、1.48±0.21;抑瘤率分别为0、7%、45%、46%;AI分别为(3.49±0.33)%、(7.13±1.17)%、(20.50±2.39)%、(19.97±3.44)%;MVD分别为22.30±2.76、19.88±3.75、8.51±5.47、9.12±5.71;VEGF分别为48.35±6.12、47.44±5.27、33.68±8.65、34.26±7.24;腹膜转移率分别为100.0%、62.5%、30.0%、22.2%;肝转移率分别为50.0%、50.0%、20.0%、22.2%.腹水发生率分别为62.5%、50.0%、20.0%、11.1%.D-limonene组、联用组分别与对照组相比,组间胰腺癌生长和转移的抑制作用差异有显著性(P＜0.05).胰腺癌的生长和腹膜、肝转移受到明显抑制(P＜0.05).结论 D-limonene通过诱导癌细胞凋亡,对体内胰腺癌生长和转移具有明显的抑制作用.
-
右旋柠烯对大鼠结直肠癌E-钙黏蛋白和β-连环素表达的影响
目的 观察D-limonene(右旋柠烯)对大鼠结直肠癌的生长和E-cad(E-钙黏蛋白,E-cadherin)、β-cat(β-连环素,β-catenin)表达的影响,从分子学角度探讨其抗肿瘤的机制.方法 皮下注射致癌剂二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)构建大鼠原发肠癌模型,中期后给予D-limonene干预,免疫组化染色观察癌组织E-cad、β-cat的表达情况.结果 E-cad和β-cat在两组均有异常表达,治疗组异常表达率低;β-cat对照组异位表达增加.结论 D-limonene降低了E-cad、β-cat异常表达率,可能抑制了肿瘤的发展和转移.
-
右旋柠烯抑制小鼠S-180移植瘤生长的实验观察
目的 观察右旋柠烯乳剂(D-limonene)对小鼠移植瘤生长及转移的抑制作用.方法 用小鼠S180癌性腹水建立皮下移植瘤模型,随机分为3组,预防组建模当天开始给药;治疗组移植后第5天开始给药;对照组不给药.每3 d测量肿瘤大小,20 d后取材,观察肿瘤细胞的浸润程度及淋巴结转移.结果 对照组肿瘤体积较大,与皮肤及深部组织发生粘连,7只发现颈部或腋下淋巴结肿大.治疗组和预防组移植瘤生长速度明显缓慢,体积小,且瘤体较规则,未发现有淋巴结转移者.结论 右旋柠烯有抑制肿瘤生长,减少淋巴结转移的作用,其机制有待进一步探讨.
-
D-Limonene对小鼠移植瘤生长及淋巴管生成的影响
目的:观察右旋柠烯对小鼠移植瘤生长及淋巴管生成的影响,并探讨其作用机制.方法:皮下注射肉瘤(S180)腹水型瘤株构建小鼠移植瘤模型,给予D-Limonene干预,免疫组化染色观察瘤细胞VEGF-C表达,LYVE-l标记淋巴管,观察其分布.结果:对照组瘤细胞VEGF-C表达较强,瘤周边部淋巴管较多,有淋巴结、肺转移.用药组瘤细胞VEGF-C表达较弱;瘤周边部淋巴管较少,未见淋巴结、肺转移.结论:D-Limonene有抑制移植瘤内瘤细胞VEGF-C表达和淋巴管生成的作用,有可能降低肿瘤的淋巴道转移.
-
右旋柠烯对裸鼠人乳腺癌模型淋巴转移的抑制作用
目的:观察右旋柠烯对人乳腺癌淋巴管生成和淋巴结转移的影响,探讨其抗肿瘤转移机制.方法:人乳癌细胞株MDA-MB-435裸鼠乳腺原位种植建立乳癌模型,免疫组化法检测右旋柠烯对乳癌组织微淋巴管密度(LMVD)和VEGF-C的影响.结果:右旋柠烯组乳癌生长和淋巴结转移受到抑制,LMVD降低,VEGF-C表达下调.结论:右旋柠烯通过影响VEGF-C诱导的淋巴管生成抑制乳癌淋巴结转移.
-
右旋柠烯诱导人白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究
目的:探讨右旋柠烯诱导人髓性白血病HL-60细胞凋亡的作用及其相关机理.方法:采用碘化丙啶染色法、流式细胞仪技术、荧光染色以及免疫细胞化学技术,观察右旋柠烯对白血病细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.结果:不同浓度的右旋柠烯(0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mmol/L)均对白血病细胞增殖有抑制作用,呈时间及剂量依赖关系.右旋柠烯可诱导白血病细胞凋亡,浓度在0.5、0.75、1.0mmol/L时的凋亡率(%)分别为7.31±1.17,30.07±2.17,25.06±1.78.荧光染色可见细胞凋亡的形态学改变,随右旋柠烯浓度的增高,细胞内Bcl-2蛋白的表达逐渐减少,细胞内的突变型P53及bcl-2基因蛋白表达没有变化.结论:右旋柠烯可以抑制HL-60细胞增殖并可以诱导其凋亡,其作用机理与下调细胞内的Bcl-2蛋白的表达有关.
-
右旋柠烯对实验性乳腺增生症的影响
目的:观察右旋柠烯(d-limonene, DL)对大鼠乳腺增生及血雌激素和孕激素水平的影响.方法:苯甲酸雌二醇-黄体酮注射复制乳腺增生模型;HE染色观测乳腺组织学改变;放射免疫法检测血雌激素和孕激素水平.结果:右旋柠烯低、中、高剂量均能减少大鼠乳腺小叶数(9.20±2.32、6.90±1.20、6.10±1.37)、小叶腺泡数(8.20±1.75、6.10±2.23、5.10±1.52)和导管上皮层数(5.30±0.95、4.50±1.27、3.10±0.99),与模型组(分别为10.00±1.54、12.91±3.88和6.17±1.59)比较有显著性差异(P<0.01).右旋柠烯高、中剂量亦能降低血雌激素水平(28.35±2.16、25.17±1.25),提高孕激素水平(33.84±2.23、35.39±2.20),与模型组(分别为32.63±0.93, 31.77±1.48)比较差异显著(P<0.01),且对雌激素水平的影响有明显的量效关系.结论:右旋柠烯可抑制大鼠乳腺增生,降低血清雌激素水平、提高孕激素水平可能为其作用机制.
-
右旋柠烯对不同类型人胃癌细胞的生长抑制作用
目的:探讨右旋柠烯(D-limonene)对不同类型人胃癌细胞的生长抑制作用及其机制.方法:以D-limonene作用于SGC-7901、BGC-823及AGS三种不同类型人胃癌细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪及电镜检测细胞生长抑制率、凋亡率以及形态学改变,免疫细胞化学法检测p53、bax和bcl-2基因表达.结果:D-limonene处理后的细胞生长抑制率与凋亡率均增加,与药物浓度呈正相关.细胞呈现核固缩、染色质边集、凋亡小体形成等典型凋亡表现.经D-limonene 处理后SGC-7901、BGC-823细胞株p53、bax蛋白表达明显增加,bcl-2蛋白表达降低.AGS细胞株bax蛋白表达明显增加,bcl-2蛋白表达降低.结论:D-limonene对人胃癌细胞的抑制作用主要是通过诱导细胞凋亡,不同类型的细胞株作用途径可能不同.升提p53与bax及降低bcl-2的蛋白表达为其诱发胃癌细胞凋亡的机制之一.
