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不同源性精子卵胞浆内单精子显微注射结局及其安全性研究进展
卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)是目前辅助生殖技术的重要组成部分,主要用于严重男性不育症的治疗.不同来源的精子对ICSI结局及安全性是否存在影响是目前众多学者所关心的问题.文中从不同参数的射出精子、睾丸和附睾精子、冻融精子等几个方面,详述了不同源性精子ICSI后的结局及后代安全性等问题.
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单精子卵母细胞浆内注射治疗男性不育
自1992年Palermo[1]等用单精子胞浆内穿刺术(intracytoplasm sperm injection,ICSI)治疗严重精液异常的男性不育症获得成功以来,ICSI已被广泛应用于治疗男性不育症.我院自1999年6月～2002年10月采用ICSI治疗严重精液异常和梗阻性无精子症及受精障碍不孕94例112个周期,报道如下.
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卵母细胞胞浆内单精子注射的临床应用研究
目的观察卵母细胞胞浆内单精子注射(ICSI)治疗不孕症的临床疗效.方法1998年11月～2002年12月对我院生殖中心93例不孕患者进行ICSI治疗93个周期.结果共获卵1078个,获卵率90.00%;卵裂806个,卵裂率89.36%;受精率74.77%.临床妊娠33例,妊娠率35.48%;已成功分娩25例.结论ICSI治疗不孕症的效果较好.
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不同外科手术取精方法与精子发生对无精子症患者卵泡浆内单精子显微注射临床结局的影响
目的 通过对无精子症患者卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)临床结局的分析,探讨不同外科手术取精方法与睾丸精子发生对ICSI临床结局的影响.方法 回顾性分析112个梗阻性无精子症(OA)患者和42个非梗阻性无精子症(NOA)患者ICSI周期的临床结局.OA组分为2个亚组51个经皮附睾穿刺(PESA)周期与61个睾丸细针睾丸穿刺(TEFNA)周期ICSI周期.统计学方法采用t检验和χ2检验.结果 TEFNA组与PESA组比较,受精率、卵裂率、临床妊娠率及流产率差异均无统计学意义;而NOA组较OA组受精率、卵裂率、临床妊娠率显著降低,而2组间流产率未见统计学差异.结论 无精子症患者ICSI临床结局受到睾丸精子发生状态而非取精手术方法的影响.
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不同来源精子对卵胞浆内单精子注射助孕结局的影响
目的 探讨精液精子、附睾精子和睾丸精子对卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕结局的影响.方法 回顾性分析因男方因素寻求ICSI助孕的283个周期的临床资料,其中精液精子行ICSI组174个周期,附睾精子行ICSI组55个周期,睾丸精子行ICSI组54个周期,比较3组的受精率、卵裂率、临床妊娠率、早期流产率.结果 3组患者的受精率、临床妊娠率、早期流产率比较差异无统计学意义(P>0.05),而使用附睾精子的胚胎卵裂率低于精液精子(90.95% vs 94.02%,P<0.05).结论 若能够获得可移植的胚胎,精液精子、附睾精子和睾丸精子对ICSI助孕结局无明显影响;附睾精子行ICSI形成的胚胎,其发育潜力可能低于精液精子行ICSI形成的胚胎.
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外科手术重建生殖管道和辅助生殖技术治疗梗阻性无精子症的疗效对比
目的 对梗阻性无精子症(OA)患者行外科手术重建生殖管道或辅助生殖技术治疗并进行疗效分析.方法 选取78例OA不育患者,按随机数字表法分为A、B组:A组行外科手术治疗,术后仍不孕患者根据精液精子浓度分为体外受精组(A-IVF)和单精子显微注射组(A-ICSI);B组行经皮附睾穿刺取精(PESA)或睾丸精子抽取术卵胞浆内单精子注射(TESA-ICSI)治疗.比较2组临床妊娠结局以及实验室各项指标:获卵数、受精情况、D3胚胎情况以及D5囊胚情况,分析其原因. 结果 A组39例(含A-IVF 5例,A-ICSI 19例)患者采取输精管 -输精管吻合术及输精管-附睾管显微吻合术,术后1月复查精液可见精子者为31例,复通率为79.49%,复查精液发现精液浓度正常者7例(22.58%),少精患者24例(77.42%),其中包含重度少精者20例(64.52%);39例中,20例临床妊娠(51.28%).B组39例患者直接经PESA或T ESA-ICSI,其中21例临床妊娠(53.85%).经比较,2组临床妊娠率差别无统计学意义(P<0.05).A-IVF和A-ICSI 2组的受精率分别为80.77% 及79.42%,明显高于B组受精率72.79%(P<0.05).但A-IVF和A-ICSI 2组的平均D3优质胚胎数、囊胚形成数、移植胚胎数和临床妊娠率与B组比较无显著性差异(P>0.05). 结论 外科手术重建生殖管道和附睾或睾丸取精行辅助生殖技术治疗OA患者均能取得一定的疗效;不同类型的OA患者应选择合理的治疗方式.
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试管婴儿亦应优生
近年来屡有报道，国内有关科研单位采用第二代试管要儿技术帮助不育夫妇生儿育女获得成功。第二代试管婴儿辅助生育技术即“单精卵浆内穿刺(ICSI)技术，又称“细胞浆内精子注入法”。它是利用高精度的显微操作方法，将单个精子注射到卵子胞浆内获得受精，并进行体外培养和官腔内移植。此种方法每个卵子只需要一条精子就可使其受精，而自然的授精方法却需要数以十万计游动的精子。因此，这一技术适用于严重少精、弱精或阻塞性无精症的不育症患者。
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人类MⅡ期卵冷冻与复苏的初步实验研究
目的:探讨不同冻融方法对人类MⅡ期卵子结构及发育潜能的影响.方法:共收集人MⅡ期卵子186个,随机分为A、B、C三组冷冻.A组为带完整冠丘颗粒细胞的MⅡ期卵,其冷冻保护液含0.1M蔗糖;B组为不带冠丘颗粒细胞的MⅡ期卵,冷冻保护液中蔗糖浓度同A组; C组为不带冠丘颗粒细胞MⅡ期卵,冷冻保护剂中蔗糖浓度为0.2M.对冷冻复苏后的卵子进行质量评估、显微授精及胚胎培养,并对部分卵进行染色体分析.结果:(1)带冠丘颗粒细胞的A组MⅡ期卵子冻融后的受精卵卵裂率显著高于B组(P＜0.05);0.2M蔗糖浓度冷冻的C组的卵存活率、优质卵率和卵裂率均高于B组(P＜0.05).(2)冻融后MⅡ期卵子的核型分析未发现染色体数目异常,但发现有染色单体的缺失.结论:带完整冠丘颗粒细胞不影响MⅡ期卵子的冻融效果,而且可能有助于保护卵子的发育潜能;在冷冻保护液中,0.2M蔗糖浓度比0.1M更适合于MⅡ期卵子的冷冻;冷冻可能造成MⅡ期卵染色体结构的改变.
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男性不育患者卵母细胞浆内单精子注射治疗临床观察
目的:评估男性不育患者实施卵母细胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的临床疗效.方法:回顾性分析2002～2006年行ICSI治疗的1 224例男性因素不育病例临床结局.以同期健康人群自然受孕1 555例为对照比较其临床结局.结果:男性不育患者行1 224个周期治疗,374个周期获临床妊娠,移植周期妊娠率30.55%.活产率25.14%.与健康人群比较,其多胎率、早产率高,出生体重略低,男女婴性别比略低(P＜0.05),先天畸形发生的差异无统计学意义(P>0.05).结论:ICSI是治疗男性不育患者安全而有效的手段.
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ICSI周期卵母细胞成熟率对卵胞浆内单精子显微注射助孕妊娠结局的影响
[目的]探讨卵母细胞成熟率对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)助孕临床结局的影响.[方法]回顾性分析 2010 年 1月至 2016年12 月在本院行ICSI 助孕的691个治疗周期,纳入病例均采用常规长方案促排卵,人绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导排卵,女方年龄≤38岁,且获卵数≥5枚、卵母细胞成熟率≥30%.根据卵母细胞成熟率不同,分为5组,A组:30%≤卵母细胞成熟率<60%;B组:60%≤卵母细胞成熟率<70%;C组:70%≤卵母细胞成熟率<80%;D组:80%≤卵母细胞成熟率<90%;E组:卵母细胞成熟率≥90%.比较5组间的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、周期取消率及临床妊娠率等.[结果]各组女性患者年龄、不孕年限、内膜厚度、平均获卵数、精子来源比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性;A 组受精率为70.25%(111/158),明显低于D 组(81.43%,1605/1971)和E组(87.26%,3551/4069),其差异有统计学意义(P<0.05);A组优胚率为41.12%(44/107),显著低于E组(57.03%,2005/3516)(P<0.05);A 组临床妊娠率为45% (9/20),显著低于D 组(54.75%,98/179) 和 E 组(59.32%,191/322)(P<0.05);各组间卵裂率、移植胚胎数和种植率比较差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]卵母细胞成熟率较低时,可能会影响ICSI助孕周期患者的胚胎发育潜能及临床结局.
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经皮睾丸精子抽吸术治疗严重男性不育症的研究
目的探讨经皮睾丸精子抽吸术(PTSA)获取睾丸精子结合卵胞浆内单精子注射术(ICSI)在严重的男性不育症治疗中的意义.方法对140例因男性梗阻性及非梗阻性无精子症、不射精症、顽固性阴茎勃起功能障碍引起的严重男性不育症患者进行诊断性穿刺,均证实有精子后进行138个周期PTSA+ICSI治疗.结果共获卵子1 875个,成熟卵1 242个,胚胎846个,总受精率68%,平均每例6.1个胚胎;共移植130个周期和冻融胚胎移植8个周期,共移植胚胎377个,平均每周期移植2.7个胚胎,B超证实临床妊娠52例,临床妊娠率37.7%.结论采用PTSA技术获取的睾丸精子进行ICSI是治疗梗阻性及非梗阻性无精子症等严重的男性不育症的一种有效的方法.
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孕晚期人未成熟卵母细胞的体外成熟:一种新的卵母细胞来源
目的 探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响.方法 共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC 633枚和DO 453枚.其中OCC分为孕晚期组、自然周期组和IVM周期组;DO分为孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组;孕晚期来源的未成熟卵母细胞分为OCC组和DO组.所有未成熟卵母细胞体外成熟后,ICSI受精序贯培养,除IVM周期组行胚胎移植外,其余均培养至囊胚阶段.分别比较OCC和DO各组未成熟卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率和孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组的囊胚形成率,统计IVM周期组的移植周期妊娠率;比较孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率.结果 OCC:孕晚期组、自然周期组及IVM周期组的体外成熟率分别为74.3%、76.9%和82.2%,孕晚期组与IVM周期组相比具有统计学差异;三组受精率、卵裂率相比,孕晚期组和自然周期组囊胚形成率相比均未见统计学差异,IVM周期组移植周期妊娠率为20%.DO:超促排卵周期组体外成熟率高(86.0%),明显高于自然周期组(72.5%)和孕晚期组(72.7%),P<0.01;孕晚期组受精率、卵裂率、囊胚形成率分别为65.0%、83.3%和38.5%,与其他两组相比均亦未见统计学差异.孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差别.结论 孕晚期来源的未成熟卵母细胞在体外具有同样的发育潜能,孕晚期捐献的卵母细胞可作为一种供卵来源:有无颗粒细胞并不影响孕晚期卵母细胞的发育能力.
关键词： 孕晚期 卵母细胞 体外成熟 精子注射 卵母细胞-卵丘复合体 -
卵巢和睾丸组织异种移植技术在物种保存中的研究进展
随着医学研究领域的不断扩展,尤其是体外成熟(IVM)、体外受精(WF)或卵胞浆精子注射(ICSI)等技术的发展,人工体外发育与繁殖被认为是保存物种的一个有效补充途径,但就众多濒危物种来说,成熟配子获取困难以及数量有限制约了这些技术在物种保护领域的进一步应用.
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卵子形态与胚胎质量及临床妊娠的关系
目的:了解MⅡ期卵子在卵母细胞浆内单精子注射(ICSI)后与胚胎质量及临床妊娠的关系.方法:ICSI操作前,对去除颗粒细胞后的MⅡ期卵子在光镜下进行形态评分分级.分别比较各级卵子的受精率、卵裂率及优胚率.胚胎移植当天时胚胎形态进行评定,胚胎移植后确定临床妊娠,分析卵子形态与胚胎质量和临床妊娠之间的关系.结果:形态评分较高的卵子与形态评分较低的卵子比较,受精率、卵裂率和优质胚胎率均有显著差异(P＜0.05).评分高卵子有高的受精率(92.26%)、卵裂率(98.47%)和优质胚胎率(67.05%).由高形态评分的卵子形成的胚胎也有高的妊娠率.结论:对卵子形态评分可预测ICSI后受精率、卵裂率及优胚率.受精前对卵子形态的评分分级可以作为胚胎移植时选择胚胎的依据.
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两种补救性ICSI在常规体外受精中的应用
目的 探讨在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中不受精及受精率低的情况下,应用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)进行补救后获得胚胎移植的临床应用价值.方法 选择IVF周期中发生完全不受精及受精率<30%的病例97个周期,其中57个周期行晚期补救ICSI,40个周期行早期补救ICSI,两种补救ICSI在完全不受精组和受精率低组中分别进行比较.结果 在不受精组中,早期补救的2PN受精率、种植率和妊娠率分别为69.44%、28.00%、30.77%,明显高于晚期补救ICSI的56.23%、1.00%、2.50%(P<0.05或P<0.01),在低受精率组中两者的累计妊娠率、种植率差异无显著性(P>0.05),但受精率、优质胚胎率、胚胎冷冻率差异有高度显著性(P均<0.01).结论 早期补救ICSI较晚期ICSI的2PN受精率、胚胎种植率高,能更好地改善补救ICSI 的妊娠结局.
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不同受精方式及精子来源对剩余胚胎发育能力的影响
目的：探讨不同受精方式及ICSI中不同来源精子对胚胎继续发育能力的影响。方法本研究回顾性分析该中心2013年1月至2013年12月2697例患者剩余胚胎的囊胚率，按不同受精方式分为体外受精（IVF）胚胎组和显微受精（ICSI）胚胎组，其中ICSI胚胎组又根据精子来源不同再分为精液精子组胚胎和附睾精子组，序贯培养后比较不同受精方式及不同来源精子对剩余胚胎的囊胚形成率及优质囊胚率的影响。结果2697例患者共培养胚胎8426枚，其中 IV F组7048枚囊胚形成率53．18％，ICSI组1378枚囊胚形成率49．27％，IVF组囊胚形成率和优质囊胚率之间差异无统计学意义（P＞0．05）。同时与常规IVF组相比补救受精组剩余胚胎的囊胚率差异无统计学意义（P＞0．05）。常规ICSI组与PESA组的剩余胚胎囊胚形成率和优质囊胚率之间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论不同受精方式及ICSI精子来源的囊胚率之间差异不明显。
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促性腺激素结合卵胞浆内单精子注射治疗老年男性重度少弱精症1例
自1992年Palermo等[1]首次采用卵胞浆内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection,ICSl)治疗严重精液异常的男性不育症获得成功以来,ICSI已被广泛用于治疗男性不育症,国内外已有较多报道[2,3].但关于老年男性不育症的报道较少,2004年4月应用促性腺激素结合卵胞浆内单精子注射治疗l例老年男性重度少弱精症患者获得成功,报道如下.
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经皮附睾穿刺取精术结合单精子卵细胞质内显微注射技术治疗梗阻性无精子症
目的:探讨经皮附睾穿刺取精子术(PESA)结合单精子卵细胞浆内显微注射技术(ICSI)治疗梗阻性无精子症的临床效果.方法:根据精子来源和精液质量参数分为3组.梗阻性无精子症患者44个周期采用PESA获得精子,女方进行常规促排卵并获得成熟卵细胞后,用ICSI技术进行受精(A组);同期严重少弱畸精症患者75个周期(B组);少弱精症患者45个周期(C组). 比较3组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率和胚胎种植率.结果:3组比较5项统计结果均无统计学差异.结论:附睾穿刺取到的精子和体外排出的精子具有相同的受精和获得优质胚胎的能力,采用PESA结合ICSI技术是治疗梗阻性无精子症的安全有效方法.
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卵母细胞浆内单精子显微注射技术的临床应用
目的:研究卵母细胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术的临床应用价值及影响ICSI成功率的因素.方法:对接受ICSI技术治疗的69例男性因素不育、不明原因不孕及体外受精失败患者75个周期的病例资料进行回顾分析.结果:对750个成熟卵母细胞进行ICSI操作,正常受精530个,受精率70.67%;25例临床妊娠,临床妊娠率33.33%.2003～2004年ICSI的受精率和卵裂率均显著高于2001～2002年(68.53%Vs 75.86%;89.19%Vs 95.45%).女方三个不同年龄组间的受精率、种植率及临床妊娠率存在显著性差异.体外受精失败组受精率显著下降.结论:ICSI技术是治疗不孕不育症的有效方法,其治疗结局受卵子质量、女方年龄及ICSI操作技术等因素的影响.
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获单卵周期行体外受精/卵胞质内单精子显微注射的结局比较
目的 探讨不孕患者获1枚卵周期合理的授精方式的选择.方法 对2014年1月-2015年12月期间在大连市妇女儿童医疗中心、山西省儿童医院山西省妇幼保健院生殖医学中心、沈阳东方菁华医院、沈阳市妇婴医院、中国医科大学附属盛京医院、天津市中心妇产科医院和河北医科大学第二医院生殖医学科因女方因素不孕行助孕治疗且获卵数为1枚的965例不孕症患者共计965个治疗周期临床资料进行回顾性队列分析.根据不同授精方式分为体外受精(ⅣF)组(675个周期)和卵胞质内单精子显微注射(ICSI)组(290个周期).比较IVF组和ICSI组患者的一般资料、受精率、胚胎发育情况和临床妊娠结局.结果 IVF组多原核(PN)率(7.11％)、多PN总比率(7.11％)均明显高于ICSI组(1.48％,1.38％),差异具有统计学意义(P＜0.01).IVF组移植周期率(34.22％)明显高于ICSI组(24.48％),差异具有统计学意义(P＜0.01).IVF组可移植周期率和可利用胚胎率略高于ICSI组,但差异无统计学意义(P＞0.05).临床妊娠率、周期妊娠率和胚胎种植率组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05);IVF组流产率(15.38％)略低于ICSI组(41.67％)(P=0.05).结论 在仅有1枚卵细胞的治疗周期中,ICSI授精并不能提高临床妊娠率、改善妊娠结局,IVF授精是一种安全有效、又降低治疗成本的方式,值得临床推广应用.
