首页 > 文献资料
-
成人急性髓系白血病患者AML1融合基因的快速检测及其临床意义
本研究旨在检测AML1相关融合基因在成人急性髓系白血病(AML)患者中的发生率,并初步分析AML1融合基因与AML发生、发展及预后的相关性.利用多重巢式RT-PCR方法对168例初治AML患者的骨髓标本进行AML融合基因(AML1-ETO,AML1-EVI,AML1-MDS1,ML1-M TG16,AML1-PRDM16,AML1-LRP16,AML1-CLCA2和AML1-PRDX4)的快速检测.结果表明,168例AML初治患者的骨髓标本中,有18例出现AML1融合基因,其阳性率为10.7％,其中12例AML1-ETO阳性(7.14％),2例AML1-EVI1阳性(1.19％),1例AML1-MDS1阳性(0.6％),1例AML1-MTG16阳性(0.6％),1例AML1-PRDM16阳性(0.6％),1例AML1-CLCA2阳性(0.6％).在AML1-ETO阳性患者中,有10例经过初次化疗达到完全缓解,2例经过了第二次化疗达到完全缓解;2例AML1-EVI1阳性患者经过初次化疗后并没有达到完全缓解;AML1-MDS1,AML1-MTG16,AML1-PRDM16及AML1-CACL2 阳性患者经过初次化疗后均未达到完全缓解.结论:AML1融合基因在AML中较为常见,可以作为急性白血病诊断和预后标志,同时也为微小残留病(MRD)的检测提供了分子标志.
关键词： AML1 融合基因 急性髓系白血病 多重巢式RT-PCR 完全缓解 -
AML1、AML1-ETO对nucb2基因转录调控活性的影响
本研究旨在探讨造血特异转录因子AML1及M2b型急性髓系白血病(AML-M2b)累及的异常融合蛋白AML1-ETO对凋亡相关基因nucb2(nucleobindin-2)启动子转录活性的影响,探索AML1-ETO对AML-M2b型白血病的分子致病机制.利用实时RT-PCR方法在AML1-ETO诱导型白血病细胞株中研究AML1-ETO在转录水平对于nueb2的调控情况;利用ChIP-qPCR方法在AML1-ETO阳性白血病细胞株中研究AML1、AML1-ETO与nucb2基因启动子之间直接的体内相互作用情况;采用双荧光素酶报告基因检测方法,研究AML1、AML1-ETO对nucb2启动子转录活性的调节作用.结果表明:AML1-ETO的表达与nucb2的表达呈负相关;nucb2可能是AML1、AML1-ETO的靶基因;AML1、AML1-ETO皆对nucb2启动子具有转录抑制作用,且AML1-ETO对nucb2抑制更强.结论:nucb2是AML1、AML1-ETO的直接靶基因,AML1、AML1-ETO通过抑制nucb2启动子的活性对其进行转录调控.
-
拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙和阿霉素诱导AML1基因重排、融合
目的探讨拓扑异构酶Ⅱ抑制剂与染色体t(8;21)形成之间的关系.方法 K562细胞经不同浓度足叶乙甙(Vp16)和阿霉素(DOX)作用不同时间后用Southern杂交检测AML1、ETO基因重排,用筑巢式RT-PCR联合序列分析检测AML1-ETO融合基因.结果 10,50,100 μmol/L DOX作用16 h AML1基因重排阳性,50 μmol/L DOX作用48 h AML1-ETO融合基因阳性.结论拓扑异构酶Ⅱ抑制剂诱导AML1基因重排、融合是染色体t(8;21)形成机制之一.
-
慢性粒细胞白血病急变伴t(3;21)(q26;q22)染色体易位受累基因的研究
目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)急性髓系白血病(AML)变伴t(3;21)(q26;q22)的受累基因.方法对1例CML AML变伴t(3;21)(q26;q22)患者细胞间期和中期分裂相细胞采用荧光原位杂交技术(FISH)检测AML1和bcr/abl基因重排,RT-PCR联合序列分析检测t(3;21)(q26;q22)受累基因.结果der(3)和der(21)染色体上均检测到AML1基因杂交信号,AML1-MDS1-Evi1、AML1-MDS1、AML1-EAP及Evi1基因均表达,未见AML1-Evi1融合基因表达,AML1-MDS1-Evi1基因表达水平是AML1-MDS1、AML1-EAP表达水平的1.58和1.54倍,患者Evi1基因表达水平是HEL细胞系Evi1表达水平的2.71倍.结论t(3;21)(q26;q22)导致形成AML1-MDS1-Evi1、AML1-MDS1融合基因及Evi1基因激活,这些继发的分子遗传学异常是CML急性变伴t(3;21)(q26;q22)患者急变发生的分子基础.
-
AML1B和AML1/ETO对TSC基因启动子的转录调节作用
目的 观察AML1B、AML1/ETO对TSC基因、TSC1和TSC2启动子的转录调节作用,探讨其在白血病发生中的作用.方法 构建TSC基因启动子/增强子区包含AML1基因结合位点的荧光素酶报告基因质粒,与AML1B、AML1/ETO表达质粒共转染非洲绿猴肾细胞系CV-1细胞,测定荧光素酶的活性,分析其对TSC基因启动子转录活性的影响.结果 在CV-1细胞中,AML1B对TSC1基因启动子的转录没有明显的作用.而对于TSC2基因启动子的转录活性具有明显的促进作用.在pCMV5-AML1B的剂量为75 ng时,TSC2启动子的转录活性上升为对照组的8.55倍,且这种作用具有一定的剂量依赖性;相反,AML1/ETO对TSC1基冈启动子转录活性具有明显的促进作用而对于TSC2基因启动子的转录活性没有明显的作用,但是可以抑制AML1B对TSC2基因启动子的反义启动作用.结论 AML1B和AML1/ETO能够调控TSC基因的转录.
-
AML1基因转染对M-CSF受体基因的转录调节作用
目的观察AML1B基因及其异构体AML1A对靶基因启动子转录活性的影响,探讨造血干细胞定向分化和白血病发生的机制.方法构建AML1A和AML1B的表达质粒,与含有靶基因巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSF-R)启动子的荧光素酶报告质粒共转染非洲绿猴肾CV-1细胞,测定荧光素酶活性,分析AML1A及AML1B对靶基因转录活性的影响.结果AML1B对M-CSF-R具有明显的转录激活作用,这种作用具有明显的序列特异性和剂量依赖性;AML1A无转录激活作用,而且拮抗AML1B,使M-CSF-R的表达水平明显下降.结论AML1转录本结构的完整性对M-CSF-R的转录激活是必需的.AML1A可以干扰AML1B的转录激活作用.
-
FLAG方案与IA方案治疗初治急性髓系白血病临床对比观察
FLAG方案治疗难治和复发急性髓系白血病(AML)完全缓解(CR)率为30％ ～80％,多数报道在50％左右[1-6].2005年华东FLAG方案治疗协作组[7]报道FLAG方案治疗难治和复发AML1个疗程CR率为41.2％,部分缓解(PR)率为9.8％.2008年中国血液肿瘤研究组(CHORT)采用FLAG方案治疗难治和复发AML,1个疗程CR率为45.9％、PR率为14.9％.目前FLAG方案在初治AML中诱导化疗的疗效报道甚少.我们自2005年6月以来采用FLAG方案诱导治疗初治AML患者25例,并与传统IA方案在疗效及主要不良反应方面进行对比观察,结果报道如下.
