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角质细胞生长因子对老龄鼠胸腺细胞增殖作用的研究
目的 观察角质细胞牛长因子(KGF)通过恢复胸腺上皮细胞(TEC)数量促进老龄鼠胸腺细胞增殖的作用.方法 ①体内实验:BALB/C小鼠10只,随机分为KGF处理组和对照组,每组各5只,连续7 d分别给予皮下注射重组人KGF(5 mg·kg-1·d-1)和生理盐水,4周后枪测小鼠胸腺和脾组织的细胞总数,流式细胞仪分别检测胸腺组织中CD4单阳件(CD4SP)、CD8单阳性(CD8SP)、CD4CD8双阳性(DP)、CD4CD8双阴性(DN)以及脾组织中CD4SP、CD8SP各T细胞业群的比例:②体外实验:鼠胸腺上皮来源的1C6细胞,分别经含不同浓度(25、50、100、200、400、800 ng/m1)的重组人KGF和不含重组人KGF的完全培养液(对照组)作用24 h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖率.结果 细胞计数和流式细胞仪检测显示,与对照组相比,KGF处理组平均胸腺细胞总数和CD4SP、CD8SP、DP、DN各T细胞亚群的平均细胞数以及KGF处理组平均脾细胞总数和CD4SP、CD8SP各T细胞亚群的平均细胞数均有明显增加(均P<0.05).MTT法检测显示,在低浓度(<200 ng/ml)时,1C6细胞增殖率随KGF浓度的增加不断升高;当KGF浓度为200 ng/ml时,1C6细胞增殖率达到高值:而在高浓度(＞200 ng/ml)时,1C6细胞增殖率随KGF浓度的增加又逐渐下降;与对照组比较,浓度为100、200、400 ng/ml的重组人KGF对1C6细胞具有明显的促增殖作用(均P<0.05).结论 KGF可通过恢复老龄鼠TEC数量以及促进胸腺细胞生成和增加成熟T细胞向外周输出而增强机体的免疫力.
关键词： 成纤维细胞生长因子7 胸腺 T淋巴细胞 小鼠 近交BALB/C -
孕鼠羊膜囊内注射脂多糖诱导组织学绒毛膜羊膜炎对早产大鼠胎肺成熟与发育的影响
目的 在妊娠晚期利用不同剂量脂多糖羊膜囊内注射建立孕鼠组织学绒毛膜羊膜炎(histologic chorioamnionitis,HCA)模型,探讨HCA炎症强度对早产大鼠胎肺成熟及发育的影响. 方法 30只Sprague Dawley孕鼠完全随机分为4组.妊娠19d时各组单个羊膜囊内分别注射脂多糖2、8、10 μg(每组8只)和生理盐水(对照组6只),均为40μl.给药后48 h剖宫取胎.收集胎盘、胎膜、脐带和胎肺等组织行病理检查.实时荧光定量聚合酶链反应测定胎肺组织表面活性蛋白(surfactant protein,SP)A、B、C及角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)的mRNAs相对表达量.免疫组织化学法测定KGF蛋白表达.收集新生鼠肺组织,行形态学观察.采用R×C表卡方检验、Kruskal-Wallis检验和方差分析进行统计学分析. 结果 (1)对照组与脂多糖2、8和10 μg组的胎鼠死亡率分别为0.0％(0/55)、22.5％(18/80)、51.4％(36/70)和87.5％(35/40),胎鼠死亡率随脂多糖剂量增加而升高(x2=46.183,P＜0.005).(2)脂多糖组均能诱导HCA、肺炎及脐血管炎,且组织学炎症程度随脂多糖剂量增高而加重(肺炎:Hc=39.84;HCA:Hc=41.13;脐血管炎:Hc=41.52;P均＜0.01).(3)4组(依次指对照组及脂多糖2、8和10 μg组)SP-A、SP-B、SP-C和KGF mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义[SP-A mRNA:0.99±0.28、2.48±0.34、1.09±0.31和0.09±0.09,F=78.051;SP-B mRNA:0.99±0.34、2.23±0.53、1.49±0.51和0.14±0.06,F=28.327; SP-CmRNA:1.20±0.39、2.00±0.20、1.04±0.37和0.12±0.16,F=39.546; KGF mRNA:0.97±0.19、2.18±0.61、0.93±0.09和0.21±0.11,F=37.544;均P＜0.01.脂多糖2μg组各基因mRNA的相对表达量高于对照组,而脂多糖10 μg组低于对照组(P均＜0.05).(4)脂多糖2 μg组KGF蛋白表达较对照组和脂多糖8、10 μg组明显增高(0.60±0.20、0.28±0.12、0.37±0.22和0.24±0.12,F=17.280,P＜0.01).(5)出生3d时,脂多糖8 μg组仔鼠肺泡发育明显受抑,成熟度较对照组及脂多糖2 μg组低. 结论 大鼠羊膜囊内注射不同剂量脂多糖可诱导不同程度的HCA、脐血管炎和肺炎,组织学炎症程度随脂多糖剂量增高而加重.适度炎症能促进肺成熟而不增加支气管肺发育不良的发生风险,KGF可能起一定作用.
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rhKGF、CBLB502和WR2721对放射性口腔黏膜炎的防治效果观察
目的 比较rhKGF、CBLB502、WR2721对放射性口腔黏膜炎(ROM)的防治作用.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、照射对照组、rhKGF组、CBLB502组及WR2721组.其中24只小鼠观察17Gy头颈部照射小鼠的30d存活率及体重变化,另外20只小鼠利用1％甲苯胺蓝染色法观察照射小鼠舌组织溃疡情况,HE染色观察舌组织病理学改变,Ki-67免疫组化检测黏膜角化上皮细胞增殖情况.结果 与照射对照组相比,rhKGF和WR2721给药组小鼠30d存活率显著提高,体重恢复较快,角化上皮细胞增殖显著,未发生明显的口腔黏膜炎;CBLB502组小鼠的存活率、体重变化及组织病理学指标与照射对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rhKGF和WR2721对放射性口腔黏膜炎有较好的防治作用,而CBLB502并不能减轻放射性口腔黏膜炎的发生.
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低磷性佝偻病的新认识
低磷性佝偻病是儿童常见的代谢性骨病,是由于磷代谢失衡(先天遗传/后天获得)导致骨矿化障碍所造成的.磷的动态平衡依赖于一个复杂的骨-肾轴,其机制迄今知之甚少.现通过参与血磷代谢平衡的器官、细胞、激素、调节因子等进一步阐述低磷性佝偻病的发病机制,重点阐述成纤维细胞生长因子23、细胞外基质磷酸化糖蛋白、分泌型卷曲相关蛋白、成纤维细胞生长因子7等磷调节因子在低磷性佝偻病发病机制中的作用,以及常见低磷性佝偻病的诊断及治疗进展.
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重组hFGF-7腺病毒对角质形成细胞的生物学效应
目的:研究重组腺病毒导入人成纤维细胞生长因子7(hFGF-7)对人皮肤角质形成细胞(HaCat)的生物学效应.方法:通过倍比稀释和感染实验,测定重组腺病毒rAd-hFGF-7的滴度;流式细胞术检测重组腺病毒感染HaCat细胞的感染效率;MTT法检测rAd-hFGF-7对HaCat细胞增殖的影响;重组腺病毒对HaCat细胞周期的影响通过流式细胞术进行检测.结果:高滴度重组腺病毒可高效感染HaCat细胞,其促细胞增殖作用随着重组腺病毒MOI值的增加而增强,当MOI值为50时,感染细胞进入S期和G_2期的细胞比率显著增加.结论:重组腺病毒rAd-hFGF-7可促进HaCat细胞的增殖,改变HaCat细胞周期.
关键词： 成纤维细胞生长因子7 腺病毒 细胞增殖 细胞周期
