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亚抑菌浓度的抗生素对金黄色葡萄球菌杀白细胞素表达及释放的影响
目的：观察亚抑菌浓度抗生素对金黄色葡萄球菌(金葡菌)杀白细胞素(PVL)表达的影响。方法利用 PCR筛选出8株 PVL 阳性金葡菌。常量稀释法测定克林霉素、替加环素、利奈唑胺和万古霉素低抑菌浓度值(MIC)；荧光定量 PCR 测定前3种抗生素对 PVL 阳性金葡菌在1/8、1/4、1/2 MIC 作用下 PVL mRNA 相对变化。 ELISA 法测定4种抗生素1/4、1/2 MIC 时 PVL 蛋白含量。结果克林霉素、利奈唑胺和替加环素在1/8、1/4、1/2 MIC 时均可降低 PVL表达。 PVL mRNA 在3种抗生素作用下分别降低17%~82%、8%~85%和11%~78%；PVL 蛋白水平在1/4、1/2 MIC 克林霉素和利奈唑胺作用下，分别下降了65%和83%、40%和61%，替加环素仅1/2 MIC 时降低较明显，达64%。万古霉素不影响 PVL 表达。结论不同抗生素亚抑菌浓度时对 PVL 表达影响不同。克林霉素和利奈唑胺可明显降低PVL 表达，且呈剂量依赖性，替加环素只在较高浓度时抑制PVL 表达，万古霉素对 PVL 表达无影响。
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金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及临床应用
目的:了解医院获得性金黄色葡萄球菌(HA-SA)和社区获得性金黄色葡萄球菌(CA-SA)所携带肠毒素、表皮剥脱性毒素(ETs)、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)及杀白细胞素基因(PVL)的特点. 方法:应用PCR法检测肠毒素A、B、C、D、E基因,ETs A、B基因,TSST-1以及PVL. 结果:116株金黄色葡萄球菌中,85株为HA-SA,检出肠毒素A基因6株,肠毒素C基因1株,肠毒素D基因1株,PVL2株;31株为社区获得性金黄色葡萄球菌,检出肠毒素A基因1株,肠毒素B基因1株,肠毒素D基因1株,PVL7株;所有菌株均未检测到肠毒素E、ETs A、B和TSST-1基因. CA-SA PVL检出率显著高于HA-SA,两者比较差异有统计学意义(P＜0.005),而肠毒素、ETs和TSST-1基因检出率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:金黄色葡萄球菌可分泌多种毒素,在分离金黄色葡萄球菌的同时,应注意其毒素检测.
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猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药表型及其SCCmec基因分型研究
目的 了解上海猪场及屠宰场耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行状况、耐药谱特征及其SCCmec基因分型特点.方法 我们于2011年8月-2012年5月分别在上海市5个规模化猪场和1个屠宰场,采集猪鼻腔拭子样品共计232份.通过7.5%氯化钠肉汤预增菌,显色培养基显色培养分离金黄色葡萄球菌(SA),采用双重PCR方法扩增其中是否含有nuc基因和mecA基因进行MRSA鉴定;以肉汤稀释法进行药物敏感性试验;应用多重PCR方法进行SCCmec基因分型;同时检测杀白细胞素(PVL)基因.结果 共计分离得到139株SA,其中70株MRSA,MRSA的检出率为30.2%(70/232).基因分型显示均为SCCmecⅣb型,未检测到PVL基因,药敏结果显示MRSA除对利奈唑胺,万古霉素,阿米卡星全部敏感外,对头孢噻呋,庆大霉素,诺氟沙星耐药率分别为74.3%,62.9%和42.9%,对阿奇霉素,红霉素,氟苯尼考,氯霉素,苯唑西林的耐药率均为100%,值得注意的,本研究中分离的全部MRSA都对截短侧耳类药物泰妙菌素、沃尼妙林以及人医新药瑞他帕林表现高水平耐药.结论 结果显示了上海地区猪源MRSA主要流行SCCmecⅣb型,并且具有多重耐药的特点,尤其对截断侧耳类人医新药全部耐药,这也提示我们要防控动物源耐药菌或耐药基因通过食物链或者环境向人类的传播的潜在风险.
关键词： MRSA 耐药性 SCCmec基因分型 杀白细胞素 -
124株金黄色葡萄球菌的耐药性分析及PVL基因检测
目的：调查了解我院临床分离的124株金黄色葡萄球菌的耐药谱特征及PVL基因携带状况,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用Vitek2 Compact全自动微生物鉴定仪进行菌株鉴定及药物敏感试验，PCR法检测mecA基因、mecC基因和PVL基因。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为56.45%(70/124)，MRSA主要分离自烧伤病区，其次是神经外科ICU。 MRSA菌株对青霉素G均耐药；对左氧氟沙星、庆大霉素、红霉素、四环素、复方新诺明和利福平的耐药率分别为57.1%、67.1%、85.7%、80.07%、28.6%、37.1%；MRSA对多种常用抗菌药物的耐药率普遍高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)，差异有统计学意义(P<0.05)；MRSA和MSSA对呋喃妥因、喹奴普汀／达福普汀、利奈唑胺的耐药率分别为2.9%、11.4%、2.9%；0.0%、5.6%、5.6%，差异无统计学意义(P>0.05)。检出6株PVL阳性，其中MRSA和MSSA各占3株。结论我院分离的金黄色葡萄球菌对抗菌药物呈多重耐药性,MRSA菌株耐药率明显高于MSSA,应加强对MRSA的监测,指导临床合理使用抗菌药物，加强对呋喃妥因、喹奴普汀／达福普汀、利奈唑胺耐药菌株的检测及PVL基因的检测，防止此类菌株的播散。
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社区与医院获得性感染金黄色葡萄球菌毒力因子对比分析
目的 了解社区与医院获得性感染金黄色葡萄球菌的毒力因子PVL和TSST-1的携带情况.方法 收集社区和医院获得性感染金黄色葡萄球菌菌株184株和262株,PCR检测毒力因子基因pvl和tst,统计分析检出率的差异.结果 vl在社区感染菌株中的检出率(11.96％)高于医院感染(0.76％),在MSSA中的检出率(7.50％)高于MRSA(2.91％);与pvl相反,tst在社区感染菌株的检出率(6.52％)低于医院感染(17.56％),在MSSA中的检出率(5.83％)低于MRSA(21.36％).对不同感染部位菌株pvl和tst检出率进行两两比较后发现,社区皮肤/软组织感染菌株pvl的检出率高,而医院感染菌血症菌株中tst的检出率高.结论 PVL和TSST-1作为金黄色葡萄球菌的2种重要毒素,与感染部位、社区/医院获得性、细菌耐药性、疾病的严重性及转归都可能存在密切关系.
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社区医院耐苯唑西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学调查
目的 调查本院2014年7月-12月MRSA分布情况、耐药表型、SCCmec分型及检测PVL基因.方法 收集本院2014年下半年MRSA共53株.用VITEK 2鉴定菌株,检测耐药模式,多重PCR检测SCCmec分型,PCR检测PVL基因.结果 MRSA检出率前2位的科室是普外科9株(17.0％)、儿内呼吸科8株(15.1％).标本类型居前2位的是脓液18株(34.0％)、痰17株(32.1％).SCCmec分型为I型3株、Ⅱ型14株、Ⅲ型25株、Ⅳa型7株、V型1株、未分型5株.检出PVL基因阳性株10株.Ⅱ型、Ⅲ型和部分Ⅳa型除对β内酰胺类耐药外,对其他抗生素也多重耐药.结论 本院分离的MRSA主要分布在普外科和儿科,标本类型以脓液、痰为主.SCCmec的型别以Ⅱ型、Ⅲ型为主,存在对非β内酰胺类抗生素耐药的SCCmecⅣ型菌株.应加强抗生素的合理使用,减少多重耐药菌的产生.
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瑞安地区社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌spa分型和耐药特征
目的 研究瑞安地区社区获得性MRSA的PVL毒力基因、spa分型和耐药特征.方法 收集2011年1月-2013年12月,瑞安人民医院分离的社区获得性金黄色葡萄球菌132株,头孢西丁纸片法筛选MRSA;对CA-MRSA患者收集病史资料,PCR法检测PVL基因,PCR测序进行spa分型,采用whonet 5.6进行耐药谱分析.结果 132株社区获得性金黄色葡萄球菌有36株为CA-MRSA,其中17株PVL基因阳性;36株spa分型有18种,其中t437有12株占33.3％;36株CA-MRSA耐药谱主要为POEC(青霉素、苯唑西林、红霉素、克林霉素)占36.1％.结论 瑞安地区CA-MRSA PVL基因阳性比例不高,不能使用PVL基因来确认是否CA-MRSA感染,PVL基因患者主要见于皮肤软组织感染,瑞安地区CA-MRSA spa分型主要为t437,主要耐药谱为POEC的耐药模式.
关键词： 社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 spa分型 杀白细胞素 -
主动外排泵系统qacA/B、杀白细胞素与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的研究
目的 研究主动外排泵系统qacA/B和杀白细胞素(PVL)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的流行现状和对MRSA耐药性的影响.方法 PCR扩增qacA/B基因和PVL基因;运用琼脂稀释法检测消毒剂和抗生素的小抑菌浓度;把MRSA分为4组:在1株MRSA中,qacA/B基因和PVL基因均阳性为第1组(No.1),仅qacA/B阳性为第2组(No.2),仅PVL基因阳性为第3组(No.3),qacA/B基因和PVL基因均阴性为第4组(No.4),采用卡方检验分析数据.结果 qacA/B基因和PVL基因的检出率分别为34.00％(68株)和28.00％(56株),其中No.1、No.2和No.3分别为35株(17.50％)、33株(16.50％)和21株(10.50％);消佳净(1.00 g/L)、碘伏(1.00 g/L)、苯扎溴胺(1.00 g/L)、阿米卡星、环丙沙星、利福平在No.1的耐药率明显高于No.4(P ＜0.05),这种情况同样存在于No.2与No.4、No.2与No.3、No.1与No.3中.结论 MRSA对消毒剂和阿米卡星等抗生素产生的耐药性与主动外排泵系统qacA/B有关系,而与PVL均无相关性.
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49株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析及pvl基因检测
目的 通过分析济宁医附院院内分离的49株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),对16种抗生素的耐药性及菌株对杀白细胞素(PVL)的携带情况,了解MRSA的院内流行状况,为临床用药提供参考依据.方法 K-B法检测临床分离出的49株MRSA对16种抗生素的耐药情况,聚合酶链反应(PCR)检测MRSA对p以基因的携带情况.结果 药敏结果显示,49株MRSA除对β-内酰胺类抗生素100％耐药外,对万古霉素、替加环素、利奈唑胺均不耐药,对大环内酯类抗生素红霉素、克林霉素呈较高的耐药性.是否携带pvl基因对菌株耐药性也有影响.49株院内MRSA中检出12株菌株携带pvl基因,占24.5％,另外37株MRSA为pvl基因阴性,占75.5％.结论 该院临床分离出的MRSA耐药性较高,治疗应以糖肽类抗生素为主,合理规范用药,加强对pvl基因的监测,防止此类菌株的播散.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 杀白细胞素 -
产杀白细胞素金黄色葡萄球菌感染的研究现状
国外多数回顾性研究发现产杀白细胞素(PVL)金黄色葡萄球菌感染有着特有的临床表现,特别是产PVL金黄色葡萄球菌相关性坏死性肺炎可能为一新现的临床疾病,由此PVL在金黄色葡萄球菌感染中的致病研究日益受到重视.本文就目前对产PVL金黄色葡萄球菌感染的致病机制、流行病学、检测和防治等问题研究作一综述.
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产PVL毒素的金黄色葡萄球菌感染与坏死性肺炎
随着越来越多的国家相继出现金黄色葡萄球菌相关性坏死性肺炎的报道,其相关致病因子也日益引起医学界关注.多项研究表明,Panton-Valentine杀白细胞素与金黄色葡萄球菌性坏死性肺炎之间存在着明显的相关性.本文就PVL 阳性金黄色葡萄球菌pvl基因和PVL蛋白、流行病学、坏死性肺炎及其致病机制作一综述.
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儿童金黄色葡萄球菌感染的免疫-血清学研究
目的 探讨金黄葡萄球菌(S.aureus)感染患儿血清Saureus毒素抗体anti-Hla和anti-PVL的变化特点.方法 选取本院2010年6月至2012年12月收治的120例患儿为研究对象,跟据S.aureus感染程度情况分为PSS(皮肤软组织初次感染),RSS(皮肤软组织反复感染)及ISS(深度感染)3组,分别测定患者急性期及治疗后恢复期血清S.aureus毒素抗体anti-Hla和anti-PVL水平,并以40例健康儿童为对照,进行组间和组内对比分析.结果 各组患者急性期和恢复期S.aureus毒素抗体含量均显著高于对照组(P＜0.001),且各组之间亦具有显著性差异(P＜0.05),RSS组患者anti-Hla、anti-LukS及anti-LukF 3项指标均显著高于其他2组P＜0.05).PSS患者恢复期血清anti-Hla、anti-LukF水平较急性期均显著降低(P＜0.05),LukS水平无显著变化(P＞ 0.05); RSS患者恢复期血清anti-Hla、anti-LukS及anti-LukF水平均较急性期显著降低(P＜ 0.05);ISS患者恢复期血清anti-Hla、anti-LukF 2项指标含量均显著升高(P＜0.05),LukS无显著变化(P＞0.05).结论 Saureus感染与Hla、LukS及LukF密切相关,且anti-Hla、anti-LukS及anti-LukF水平与S.aureus感染程度密切相关,可作为其临床诊断和预后评估的重要指标.
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长春市金葡菌耐药状况及耐甲氧西林金葡菌基因分型
目的 调查长春地区临床分离金葡菌的耐药状况及Panton-Valentine杀白细胞索(PVL)分布情况;确定耐甲氧西林金葡菌(MRSA)染色体及葡萄球菌mec盒式染色体(SCCmec)基因分型.方法 琼脂稀释法测定苯唑西林等17种抗菌药物对2004年6月～2005年1月长春市3家教学医院临床标本分离的83株金葡菌的低抑菌浓度(MIC);聚合酶链式反应(PCR)进行金葡菌的PVL基因检测;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对MRSA菌株作染色体同源性分析,多重PCR方法检测MRSA的SCCmec基因分型.结果 83株金葡菌中MRSA 12株(占14.5%);金葡菌PVL的基因阳性7株(占8.4%).MRSA对β-内酰胺类、红霉素、克林霉素、庆大霉素、四环素、氟喹诺酮类耐药率均超过90%,对氯霉素、利福平耐药率分别为8.3%、58.3%,未发现对糖肽类及复方磺胺甲(口恶)唑耐药的MRSA.甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)对青霉素G、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉索耐药率分别为95.8%、67.6%、49.3%、45.1%、26.8%,对头孢菌素、氯霉素、利福平、氟喹诺酮类、复方磺胺甲(口恶)唑耐药率均低于20%.MRSA的PFGE显示为A、B两种类型,以A型为主,占92%(11/12),三家医院均有分布.MRSA的SCCmec分型,Ⅲ型为主75%(9/12).结论 长春市MRSA发生率低于国内报道平均水平;MRSA为两种不同类型克隆株,在不同医院间存在克隆传播;未发现社区获得性MRSA菌株.
