首页 > 文献资料
-
反义转化生长因子β1基因对大鼠肾系膜细胞FN和PAI-1分泌的影响
目的 通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染反义转化生长因子β1基因(TGF-β1),观察该细胞纤维连接蛋白(FN)及1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达的改变.方法 构建反义TGF-β1基因真核表达载体,采用脂质体进行基因转染MsC,用ELISA法检测转染系膜细胞上清液中FN和PAI-1的蛋白质水平,并与无转染的MsC对照组和空载体组比较其表达的变化.结果 构建了大鼠反义TGF-β1基因真核表达载体,并将其转染Msc,与对照组相比转染48小时后细胞分泌FN和PAI-1蛋白质水平明显下降(P＜0.05).结论 反义TGF-β1基因真核表达载体可从分子水平阻断MsC的FN及PAI-1表达,在肾小球硬化及肾小球肾炎的研究治疗中有一定的应用价值.
-
血管紧张素Ⅱ和卡托普利、缬沙坦对人脐静脉内皮细胞PAI-1、tPA蛋白表达的影响
目的研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI),卡托普利和Ang Ⅱ 1型受体(AT-1)拮抗剂缬沙坦对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)蛋白的释放及活性的影响.方法将不同浓度的Ang Ⅱ(10-6～10-9 mol/L)与HUVECs共同孵育24 h,以及将10-6 mol/L的Ang Ⅱ与HUVECs作用不同时间(0、4、8、12、24 h)后,用细胞酶联免疫法和发色底物法分别检测细胞培养液中PAI-1、tPA的含量及活性,并观察卡托普利和缬沙坦干预后的影响.结果 10-6mol/L Ang Ⅱ作用HUVECs 24 h后,可使细胞分泌的PAI-1含量与对照组相比明显增高(280±15.60 vs 83.33±10.56) ng/mL,P<0.01),PAI-1活性明显增加(9.25±0.39 vs 7.53±0.33) IU/mL,P<0.01),Ang Ⅱ虽也可刺激tPA含量增加(101.67±3.78 vs 70±5.62) ng/mL,(P<0.01),但PAI-1的增量是tPA增量的6～7倍(Δ196.67±21.34 vs Δ31±6.50) ng/mL,(P<0.01),Ang Ⅱ对tPA活性无影响(0.97±0.05 vs 0.95±0.08) ng/mL,(P>0.05);缬沙坦可显著抑制Ang Ⅱ的促PAI-1分泌作用(212.67±5.38 vs 290±6.57) IU/mL,(P<0.01),而卡托普利对Ang Ⅱ的促PAI-1分泌作用无明显抑制作用(278.33±9.16 vs 290±6.57) IU/mL,(P>0.05).结论 Ang Ⅱ可促使HUVECs分泌PAI-1,并使其活性增加;Ang Ⅱ亦可刺激tPA分泌,但作用弱于PAI-1,对其活性无明显影响.缬沙坦可抑制Ang Ⅱ促HUVECs分泌PAI-1的作用;卡托普利的作用不显著.
关键词： 血管紧张素Ⅱ 1型纤溶酶原激活物抑制剂 组织型纤溶酶原激活剂 缬沙坦 卡托普利 -
探讨血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生超氧阴离子和1型纤溶酶原激活物抑制剂的作用机制
目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)产生超氧阴离子(O-2)和1型纤溶酶原激活物抑制剂( PAI-1)的作用机制及0-2与PAI-1产生之间的关系.方法:第一部分实验:观察血管紧张素Ⅱ不同浓度及不同作用时间对HUVEcs产生0-2和PAI-1的作用.分为对照组,AngⅡ10-8～10-5 moL/L不同浓度组,AngⅡ10-6mol/L作用不同时间(0、6、12、24和48h).第二部分实验:观察不同浓度的缬沙坦对AngⅡ诱导HUVECs产生O-2和PAI-1的作用.分为对照组,缬沙坦(10-6 mol/L)组,AngⅡ(10-6mo/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+不同浓度缬沙坦(10-8～ 10-5mol/L)组.第三部分实验:观察缬沙坦、二甲苯基碘、超氧化物歧化酶对AngⅡ使HUVECs产生O-2和PAI-1的作用.分为对照组,AngⅡ(10-6 mol/L)组,AngⅡ(10-6 mol/L)+缬沙坦(10-6mol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+二甲苯基碘(10μmol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+超氧化物歧化酶(2μl)组.用酶消化法收集并培养HUVECs,采用氯化硝基四氮唑蓝还原法测定上清液O-2浓度,用酶联免疫吸附法测定上清液PAI-1浓度.结果:①AngⅡ在10-8～10-5mol/L范围内呈浓度依赖性地使HUVECs产生O-2和PAI-1增加.②缬沙坦在10-8～10-5mol/L范围内呈浓度依赖性地降低AngⅡ促HUVECs产生O-2和P1AI-1的作用.③二甲苯基碘和超氧化物歧化酶可显著抑制AngⅡ刺激HUVECs产生0-2及PAI-1.结论:①AngⅡ通过作用于AngⅡ受体1(AT1)激活还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶途径呈浓度和时间依赖性地使HUVECs产生O-2和PAI-1增加.②AngⅡ通过增加O-2产生而致PAI-1产生增加,提示抗氧化治疗有助于预防血栓性疾病的发生.
关键词： 血管紧张素Ⅱ 脐静脉内皮细胞 超氧阴离子 1型纤溶酶原激活物抑制剂 -
黄芪含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞分泌PAI-1的影响
目的：探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对内皮细胞(HUVECs)分泌1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响及黄芪含药血清对AngⅡ此效应的干预作用。方法培养脐静脉内皮细胞株,对照组与AngⅡ干预组院内皮细胞与不同浓度AngⅡ共孵育18 h；黄芪含药血清组院内皮细胞在不同浓度黄芪药血清培养基中培育24 h后,加入AngⅡ(×10-4 mol/L)培养18 h,酶联免疫吸附法(ELISA)测定PAI-1浓度。结果与对照组比较,不同浓度的AngⅡ均能刺激HUVECs分泌PAI-1；黄芪含药血清可抑制AngⅡ促HUVECs分泌PAI-1的效应。结论黄芪含药血清可能通过抑制AngⅡ诱导的HUVECs分泌PAI-1效应,产生抗动脉粥样硬化的作用。
关键词： 黄芪 血管紧张素域 内皮细胞 1型纤溶酶原激活物抑制剂 -
复荣通脉胶囊对糖尿病大鼠胸主动脉PAI 1、t PA表达的影响
目的：观察复荣通脉胶囊对糖尿病大鼠胸主动脉1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI 1)、组织型纤溶酶原激活物(t PA)表达的影响,探讨其对纤溶系统的作用。方法将 Wistar大鼠随机分为对照组和糖尿病造模组,造模成功大鼠随机分为模型组、复荣通脉低剂量组(0.7 g/kg)、复荣通脉中剂量组(1.4 g/kg)、复荣通脉高剂量组(2.8 g/kg),8周后,观察各组大鼠血糖、血脂水平及胸主动脉 PAI 1及t PA免疫组化表达。结果造模组大鼠血糖较对照组明显升高(P<0.05)；胸主动脉PAI 1表达在各造模组较对照组明显增强(P<0.05),而在复荣通脉中剂量组、高剂量组表达明显受抑制；胸主动脉 t PA表达在各造模组较对照组明显减弱(P<0.05),在复荣通脉中剂量组、高剂量组其表达明显增强(P<0.05)。结论复荣通脉胶囊可抑制PAI 1、促进t PA在大鼠胸主动脉的表达。
关键词： 糖尿病 大血管病变 复荣通脉胶囊 1型纤溶酶原激活物抑制剂 组织型纤溶酶原激活物 -
t-PA/PAI-1在乙型肝炎病毒相关性肾炎中的表达及意义
目的:探讨t-PA/PAI-1在乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)中的表达及临床意义.方法:选择2002年～2004年间获得的100例HBV-GN肾活检标本为实验对象,运用免疫组化方法观察HBV-GN肾组织t-PA/PAI-1的表达特点,并统计分析其与病理类型、肾小球病变程度及临床指标之间的关系.结果:各病理类型组t-PA/PAI-1阳性积分差异无统计学意义(P>0.05);而在不同的肾小球病变等级中,Ⅱ级、Ⅲ级组t-PA阳性积分开始升高,以Ⅲ级组高(P<0.05),Ⅳ级组积分下降(P<0.05);PAI-1随肾小球病变等级的增加阳性积分升高(P<0.05,P<0.01),并随肾功能减退阳性积分增高(P<0.05,P<0.001).结论:t-PA/PAI-1在乙肝肾中的表达平衡失调促进肾小球硬化;肾组织内PAI-1随肾功能减退而表达增强,可能是HBV-GN预后不良的指标之一.
-
高糖对肾小管上皮细胞胶原分泌和PAI-1合成的影响以及黄芪调控作用
目的:体外研究高糖刺激肾小管上皮细胞时PAI-1和细胞外主要基质成分Ⅳ型胶原的表达,以及黄芪延缓糖尿病肾病与其的相关性.方法:将小鼠肾小管上皮细胞培养于不同浓度葡萄糖中,不同时间段采用RT-PCR方法检测PAI-1 mRNA转录水平,westhem blot检测蛋白的表达,ELISA方法检测Ⅳ型胶原的合成.随即用黄芪药物血清刺激细胞,观察二者的表达情况.结果:高浓度葡萄糖培养的细胞PAI-1表达升高,并呈现剂量时间依赖性.说明PAI-1表达与高糖作用存在相关性.同时高糖诱导Ⅳ型胶原的合成增加.黄芪含药血清可以显著抑制细胞表达PAI-1和Ⅳ型胶原.结论:高糖可诱导PAI-1表达,抑制细胞外基质成分降解.黄芪通过抑制Ⅳ型胶原的产生,降低细胞外基质的合成,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展.
关键词： 1型纤溶酶原激活物抑制剂 糖尿病肾病 黄芪 -
血管紧张素Ⅱ对培养人脐静脉内皮细胞PAI-1 tPA蛋白表达的影响
目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)蛋白的释放及活性的影响.方法将不同浓度的AngⅡ(1 ×10-9～1×10-6mmol/L)与HUVECs共同孵育24h,以及将1×10-6 mol/LAngⅡ与HUVECs作用不同时间(0、4、8、12、24 h)后,用细胞酶联免疫法和发色底物法分别检测细胞培养液中PAI-1、tPA的含量及活性.结果1×10-6 mol/L AngⅡ作用HUVECs 24 h后,可使细胞分泌的PAI-1含量与对照组相比明显增高[(280±16)ng/ml vs(83±11)ng/ml,P＜0.01],PAI-1活性明显增高[(10.35±1.47)U/ml vs(5.65±0.44)U/ml,P＜0.01],AngⅡ虽也可刺激tPA含量增加[(102±4)ng/ml vs(70±6)ng/ml,P＜0.01],但PAI-1的增量是tPA增量的6～7倍[△(197±21)ng/mlvs △(31±6)ng/ml,P＜0.01],AngⅡ对tPA活性无影响[(0.97±0.05)U/ml vs(0.95±0.08)U/ml,P＞0.05];1×10-9～1～1×10-6 mol/L不同浓度的AngⅡ分别作用HUVECs 24 h,PAI-1含量增加、活性增加与AngⅡ呈浓度依赖性相关;1×10-6mol/L AngⅡ与HUVECs分别作用4～24 h,PAI-1含量及活性增加与AngⅡ作用于HUVECs的时间呈正相关.结论AngⅡ可促使HUVECs分泌PAI-1,并使其活性增加,AngⅡ虽亦可刺激tPA分泌,但作用弱于PAI-1,且对其活性无明显影响.
关键词： 血管紧张素Ⅱ 内皮细胞 1型纤溶酶原激活物抑制剂 组织型纤溶酶原激活剂 -
糖尿病性和非糖尿病性脑梗死患者血浆中纤溶酶原激活物及其抑制剂活性的动态观察
目的:观察糖尿病性脑梗死(diabetic ischemic stroke,DIS)和非糖尿病性脑梗死(non-diabetic ischemic stroke,NDIS)患者血浆中纤溶酶原激活物(plasminogen activator,PA)及纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor,PAI)的动态变化情况.方法:应用底物发色法测定血浆中PA和PAI活性,以观察DIS和NDIS患者血浆PA和PAI活性的动态变化.结果:NDIS患者血浆中PA活性在4～21 d较非脑梗死患者升高;DIS患者的PA活性在7 h～21 d较NDIS患者为低,但PAI活性在各组间无明显差异.结论:DIS患者血浆中PA活性较NDIS患者降低,提示其存在纤溶系统激活的紊乱,并可能与DIS症状加重有关.
关键词： 糖尿病 脑梗死 纤溶酶原激活物 1型纤溶酶原激活物抑制剂 -
慢性糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤时纤溶酶原激活物及其抑制剂mRNA表达的动态变化
目的观察正常和糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤时t-PA、u-PA、PAI-1和神经丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达的差异,探讨糖尿病加重脑缺血损伤的可能机制.方法糖尿病大鼠和正常大鼠各38只,随机分为脑缺血1 h再灌注1、2、5、11、23 h组(均n=6)、假手术组和非手术组(均n=4).用RT-PCR方法检测t-PA、u-PA、PAI-1和NSP mRNA表达.结果糖尿病和正常大鼠脑缺血后t-PA、u-PA、PAI-1和NSP mRNA表达均增高;但糖尿病大鼠再灌注2、11、23 h时,缺血脑组织的NSP mRNA表达明显低于正常大鼠.结论正常和糖尿病大鼠在脑缺血再灌注后存在纤溶酶原激活作用的增强,但NSP mRMA表达存在差异.
-
慢性肾小球肾炎患者血浆纤溶酶原激活物及其受体和纤溶酶原激活物抑制剂的变化与干预研究
目的 探讨慢性肾小球肾炎血浆纤溶酶原激活物及其受体和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的变化意义,血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)治疗的干预影响.方法 测定78例慢性肾小球肾炎患者的血浆组织型纤溶酶原激活物(tPA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和PA-1的水平,与健康成年人43人作对照;并观察经ACEI治疗8周后各项指标的改变.结果 78例患者血浆uPAR水平明显高于对照组(P＜0.05),PAI-1水平显著高于对照组(P＜0.01).予以ACEI(福辛普利)10～20 mg/d治疗8周后,ACEI治疗组患者PAI-1水平较常规治疗组患者明显下降(P＜0.05).结论 慢性肾小球肾炎患者血浆PAI-1水平明显升高,细胞外基质(ECM)的转. 化受到抑制;ACEI治疗可降低PAI-1水平,促进ECM的转归,延缓肾脏纤维化.
-
急性缺血性脑卒中患者血清PAI-1、Aβ水平及其与病情严重程度的相关性分析
目的:探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、β淀粉样蛋白(Aββ)水平及其与病情严重程度的相关性.方法:收集2015-03-2016-11我院收治的69例AIS患者(观察组)病例资料,于入院24 h内进行美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分,并进行神经功能缺损程度评分.根据NIH-SS评分及神经功能缺损程度评分,将69例观察组患者分为轻型(16例)、中型(44例)、重型(9例)3个亚组,同时收集23例健康体检者为对照组.用ELISA法检测2组血清PAI-1、Aββ水平.观察组血清PAI-1、Aββ水平与神经功能缺损程度评分的Pearson相关分析.结果:观察组血清PAI-1、Aββ水平[(49.34±10.72)mg/L、(176.38±92.46) pg/ml]与对照组[(36.87±8.56) mg/L、(142.25±81.43)pg/ml]比较,差异有统计学意义(P＜0.05).中型组血清PAI-1、Aβ水平[(51.25±9.68) mg/L、(178.47±96.32) pg/ml)]、重型组血清PAI-1、Aββ水平[(55.47±13.43)mg/L、(216.32±117.45) pg/ml]分别与轻型组[(42.54±7.62) mg/L、(152.35±82.56) g/ml]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).重型组血清Aββ水平与中型组比较差异有统计学意义[(216.32±117.45) pg/ml vs.(178.47±96.32) pg/ml,P＜0.05].重型组血清PAI-1水平高于中型组,但差异无统计学意义[(55.47±13.43) mg/L vs.(51.25±9.68)mg/L,P＞0.05].Pearson相关分析显示,血清PAI-1水平与AIS病情严重程度(神经功能缺损程度评分)之间呈正相关(r=0.941,P＜0.01).血清Aββ水平与AIS病情严重程度(神经功能缺损程度评分)之间呈正相关(r=0.882,P＜0.01).结论:AIS患者存在血清PAI-1、Aββ水平升高.Pearson相关分析显示:血清PAI-1、Aββ水平与AIS患者病情严重程度呈正相关,提示血清PAI-1、Aββ水平是AIS病情严重程度的重要指标,可为临床评价AIS病情严重程度提供重要的参考价值.
-
缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞分泌tPA、PAI-1抗原的影响
目的:探讨缬沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)产生组织型纤溶酶原激活物(tPA)和1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)抗原的影响.方法:用酶消化法收集并培养HUVECs,将不同浓度的AngⅡ(10-6、10-7、10-8、10-9mol/L)与HUVECs共同孵育12 h;10-7mol/L AngⅡ和HUVECs作用不同时间(0、2、6、12、24、48 h);10-7mol/L AngⅡ和不同浓度缬沙坦(10-5、10-6、10-7、10-8mol/L)与HUVECs作用12 h;10-6mol/L缬沙坦与HUVECs作用12 h.用酶联免疫吸附法测定上清液中tPA和PAI-1抗原浓度.结果: AngⅡ呈浓度依赖性升高HUVECs的PAI-1抗原水平,10-7mol/L达高峰效应[(211.00±9.34)ng/mL vs (85.67±8.53) ng/mL,P《0.01];10-7mol/L AngⅡ与HUVECs作用2 h,PAI-1含量即升高,12 h达高峰[(198.08±7.85)ng/mL vs (22.93±4.73) ng/mL,P《0.01];缬沙坦呈浓度依赖性降低AngⅡ促HUVECs分泌PAI-1,10-6mol/L缬沙坦达高峰效应[(164.73±5.36)ng/mL vs (211.00±9.34) ng/mL,P《0.01];AngⅡ和缬沙坦对tPA抗原没有明显影响.结论:AngⅡ通过促进HUVECs分泌PAI-1而降低纤溶活性,缬沙坦通过抑制AngⅡ的促PAI-1分泌作用而提高纤溶活性,有助于动脉粥样硬化血栓性疾病的防治.
