首页 > 文献资料
-
卵巢子宫内膜异位症与子宫腺肌病中促性腺激素释放激素及其受体的表达及临床意义
目的研究促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone，GnRH）及其受体（gonadotro-pin-releasing hormone receptors ，GnRH-R）在卵巢子宫内膜异位症（endometriosis，EM）与子宫腺肌病（adenomyo-sis，AM）在位、异位组织中的表达及临床意义。方法选取2010年3月至2011年5月内蒙古医科大学附属医院和包头市包钢职工医院来源的42例EM，34例AM及20例正常子宫内膜组织，经石蜡包埋制备病理切片，应用免疫组织化学方法检测GnRH及GnRH-R蛋白表达情况。结果（1） AM与EM组的在位内膜中， GnRH和GnRH-R持续表达。（2）EM组的异位内膜GnRH和GnRH-R的阳性率低于在位内膜及对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。在位子宫内膜的阳性表达率高于正常子宫内膜，差异有统计学意义（P ＜0.05），而异位内膜低于正常子宫内膜，差异有统计学意义（ P＜0.05）。（3） AM组异位内膜GnRH和GnRH-R的阳性率低于在位内膜表达率，差异有统计学意义（ P＜0.05）。 AM组在位子宫内膜的阳性表达率高于正常子宫内膜，差异有统计学意义（P＜0.05），而异位内膜与正常子宫内膜相比，差异无统计学意义（P ＞0.05）。（4）AM、EM及对照组的GnRH和GnRH-R在月经周期在位内膜的表达均为分泌期高于增生期，差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论 GnRH可能通过其受体介导，对异位内膜的种植和生长产生抑制作用，为临床应用GnRH类似物及GnRH拮抗剂治疗这两种疾病提供理论依据。
-
丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及机制研究
目的探讨不同剂量的醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长及其可能的作用机制。方法建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型，选32只雌性荷瘤裸鼠随机分为4组，即空白对照组、醋酸丙氨瑞林干预组（20μg/kg、40μg/kg、80μg/kg），不同剂量醋酸丙氨瑞林组均采取肌肉注射方式连续给药，4周后处死裸鼠，将移植瘤完整取出，测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率，并应用免疫组织化学法检测瘤组织中TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白的表达。结果实验对照组、低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林组中移植瘤生长曲线斜率依次减小，生长速度依次减慢。低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林抑瘤率分别为（13.03±5.4）％、（26.42±7.3）％、（43.27±6.9）％，组间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）。随着醋酸丙氨瑞林浓度的升高，各干预组TGF-β1、Smad2/3蛋白表达水平明显升高，Smad7蛋白表达水平明显下降，且与对照组相比，差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论醋酸丙氨瑞林对子宫内膜癌细胞株Hec-1-B裸鼠皮下移植瘤生长有抑制作用，且呈一定的剂量依赖效应，其作用机制可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关。
-
天蚕素 B-黄体生成素释放激素结合部位重组基因的构建及其抑癌功能的研究
目的 构建天蚕素B-黄体生成素释放激素结合部位(CB-LHRH')重组基因,探讨CB-LHRH'蛋白成为新型抗肿瘤靶向药物的可能性.方法 设计并人工合成CB-LHRH'重组基因序列,应用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达目的 蛋白并通过蛋白斑点印迹法鉴定,采用二甲氧唑黄(XTT)比色法检测不同剂量的目的 蛋白对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3(LHRH受体阴性)和子宫内膜癌细胞株HEC-1B(LHRH受体阳性)细胞的生长抑制率,并进行镜下形态观察.结果 蛋白斑点印迹法检测结果显示,重组杆状病毒感染的Sf9细胞裂解液呈现棕色,证实CB-LHRH'蛋白已表达.重组杆状病毒感染的昆虫细胞系Sf9细胞裂解液对SKOV3及HEC-1B细胞的生长抑制率,随作用时间的延长和剂量的增加而增加,SKOV3细胞的生长抑制率从(5.03±0.08)%增加至(53.24±1.22)%,HEC-1B细胞的生长抑制率从(5.13±0.37)%增加至(56.16±1.08)%.相同剂量的重组杆状病毒感染的St9细胞裂解液,作用相同时间,其对HEC-1B细胞的生长抑制率高于SKOV3细胞,差异有统计学意义(P＜0.01).经重组杆状病毒感染的Sf9细胞裂解液作用后,镜下可见癌细胞出现明显改变甚至成片坏死崩解为无定形的颗粒状物质.结论 CB-LHRH'蛋白可有效杀伤LHRH受体阳性的HEC-1B细胞,有望成为治疗表达LHRH受体的肿瘤的抗肿瘤靶向药物.
-
促性腺激素释放激素类似物在妇科恶性肿瘤中的应用
根据作用机制不同,促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)可分为两类:激动剂和拮抗剂.研究证实,约80％的卵巢癌以及子宫内膜癌能够表达GnRH及其受体,GnRH-A通过间接抑制下丘脑-垂体-性腺轴或通过自分泌及旁分泌直接抑制肿瘤细胞的增殖.GnRH-A曾被用于治疗晚期或复发的子宫内膜癌和卵巢癌,但疗效不明显.而目前研究的热点是将GnRH-A用于保留早期子宫内膜癌患者的生育功能以及保护肿瘤化疗患者的卵巢功能.GnRH-A还可用于妇科恶性肿瘤的靶向治疗.
-
LHRH-PE40对人结肠癌细胞增殖抑制和凋亡的影响
目的:探讨一种新型免疫毒素LHRH-PE40与人结肠癌细胞系Lovo表面LHRH受体结合的特性,观察其对细胞增殖产生的抑制作用及检测细胞凋亡.方法:用125Ⅰ标记法检测LHRH-PE40与Lovo结合的特异性;MTT比色法检测LHRH-PE40对胃癌细胞的杀伤活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果:人结肠癌细胞系Lovo细胞表面可见配基-受体特异性结合,LHRH-PE40对Lovo细胞的半数致死量为0.24 mg·L-1,0.1～10.0 mg·L-1LHRH-PE40作用于Lovo细胞,其凋亡明显(P＜0.01). 结论:结肠癌细胞Lovo细胞表面存在LHRH受体,LHRH-PE40对结肠癌细胞的增殖状态有明显的抑制作用及促凋亡作用.
-
Spiegelmer NOX1255对LHRH-PE40与HeLa细胞上LHRH受体结合的抑制作用
目的 探讨Spiegelmer NOX 1255对促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素40(Luteinizing hormone-releasing hormone-Pseudomonas aeruginosa exotoxin 40,LHRH-PE40)与HeLa细胞上促黄体激素释放激素(LHRH)受体结合的抑制作用.方法 分别将25μmol/L的LHRH-PE40、PEA和PFAO与HeLa细胞共孵育24 h后,观察细胞的形态学变化;用Spiegelmer NOX 1255特异性结合LHRH-PFA0上的LHRH,光学显微镜观察Spiegelmer NOX 1255对LHRH-PFAO的抑制作用,ELISA检测Spiegelmer NOX 1255对LHRH-PE40与LHRH受体结合的抑制作用.结果 LHRH-PE40和PEA可直接杀伤HeLa细胞,而PE40不能对HeLa细胞产生毒性作用;Spiegelmer NOX 1255能够结合LHRH-PE40中的LHRH,抑制LHRH-PFAO与LHRH受体的结合及PE40的毒性作用.结论 LHRH-PFAO对HeLa细胞的毒性作用是通过细胞表面的LHRH受体产生的;Spiegelmer NOX 1255可阻断LHRH-PF40与HeLa细胞表面LHRH受体的结合.
-
促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A对肿瘤细胞的靶向性作用
目的:探讨重组促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A(Luteinizing hormone releasing hormone-pseudomonmexotoxin A,LHRH-PE40)与肿瘤细胞和正常细胞膜表面受体特异性结合的差异.方法:常规培养Hep-2、A549及LO2细胞,通过细胞毒性试验观察LHRH-PE4.0对3种细胞的形态学影响及生长抑制作用；通过LHRH-Pe40与LHRH受体的结合试验及LHRH对LHRH-PE40竞争性抑制试验,测定LHRH-PE40在不同J细胞中膜表面受体结合的差异.结果:LHRH-PE40对Hep-2、A549细胞具有明显的杀伤作用,细胞收缩变圆,色暗,折光性差,裂解死亡,杀伤作用随LHRH-PE40浓度的增大而增强,IC50值分别为0.45和0.19 μmol/L,而对LO2细胞毒性作用较弱；LHRH-PE40可与Hep-2和A549细胞受体结合密切,A490值较高,与两种细胞的结合力随着时间的延长而增加,与LO2细胞结合较弱；LHRH可以竞争性拮抗抑制LHRH-PE40与Hep-2、A549细胞的结合,结合力随着LHRH浓度的增高而递减,对LHRH-PE40和LO2细胞结合影响较小.结论:LHRH-PE40可特异性结合癌细胞表面LHRH受体,从而发挥对肿瘤细胞的靶向杀伤作用.
-
达那唑诱导的雌性性早熟大鼠GnRH及其受体mRNA的表达
目的观察达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-靶腺轴及下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA表达的影响.方法 5天龄雌性大鼠皮下一次注射300 μg达那唑以诱导真性性早熟.从25日龄起观察和记录阴门开启鼠龄和从阴门开启日起进行阴道涂片以确定第一个动情周期.检查阴道涂片和体重及垂体、肾上腺、子宫、卵巢器官重量,观察雌激素依赖的阴道脱落细胞的周期性变化和主要器官的发育情况.RT-PCR法观察雌性大鼠下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达.结果 5日龄雌性大鼠给予皮下注射达那唑,可诱导大鼠阴门提前开启和建立性周期的时间提前,子宫和卵巢的重量明显增加,下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高.结论达那唑对雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴有多层次的作用,可诱导雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的功能提前启动.
-
LHRH离子电渗透皮给药系统的研究Ⅱ。离子电渗仪的研制和LHRH的大鼠药动学研究
设计了便携式离子电渗装置，采用石墨材料作电极，可以输出恒定的和不同频率、不同波形的脉冲直流电流，电渗时间和停药时间可以预先设置。研制了LHRH的PVA水凝胶贴片，进行了大鼠在体恒定和脉冲离子电渗透皮给药，结果表明离子电渗技术可以促进凝胶贴片中LHRH的透皮转运，持续实验的24 h内，血清中可以维持平稳的LHRH水平，从而诱导大鼠体内分泌的LH水平有较明显的提高。通过电场的反转和中断可以模拟体内周期性的LHRH分泌。
-
LHRH刺激雄性大鼠垂体LH分泌高峰时细胞形态变化的图象分析
应用ABC亲和组织化学顺序、MIS-I计算机图象处理系统测定外源性LHRH刺激雄性大鼠LH分泌高峰前后LH细胞面积、细胞内液泡面积和细胞形状等形态参数的变化.结果表明:雄性大鼠LH基础分泌时,LH细胞处于贮存状态:大细胞(＞340 μm2)占LH阳性细胞56.7%,小细胞(＜190 μm2)占2.2%,40%细胞内含有大量液泡,细胞形状大多偏向圆形.注射LHRH 30 min后,血中LH浓度显著升高,LH细胞平均面积明显减小;60 min时,血中LH释放达到高峰,相应的形态学特征是大细胞降低至4%,小细胞增加到66%.随着细胞内液泡的大量消失,52.6%的细胞偏向不规则形状.LH分泌高峰后,血液LH浓度逐渐恢复到基础分泌水平,但随着细胞内LH贮存的增加,细胞和细胞内液泡平均面积逐渐增加,大多数细胞又偏向圆形.结果提示,含大量液泡的偏圆形大细胞同LH大量贮存有关.而液泡的消失以及大量小细胞和不规则形状细胞的出现同LH大量释放有密切联系.由此作者认为:LH细胞内液泡的动态变化以及由此产生的细胞大小、细胞形状和细胞结构的变化可以作为促性腺激素分泌的重要形态学观察指标.
-
曲普瑞林联合腹腔镜治疗轻度子宫内膜异位症合并不孕54例
目的 观察促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)联合腹腔镜治疗轻度子宫内膜异位症(EMT)合并不孕的疗效.方法 选取108例子宫内膜异位症合并不孕的患者,随机分为两组,观察组在术前给予醋酸曲普瑞林3～4个月的治疗后行腹腔镜手术；对照组在术前给予3～4个月的安慰剂治疗后行腹腔镜手术,术后患者均给予醋酸曲普瑞林治疗2个月.结果 观察组有效54例(100.00)％,复发1例(1.85)％；对照组有效50例(92.59)％,复发6例(11.11)％；观察组妊娠40例(74.07％),对照组妊娠30例(55.56％).两组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 经GnRH-α联合腹腔镜治疗的患者效果显著,并且可以提高患者的妊娠率.
-
青春发育提前500例临床分析
目的 总结青春发育提前儿童的临床特点及治疗效果.方法 回顾500例青春发育提前儿童(女童475例,男童25例)的病史特点；420例女童(TannerⅡ期340例,TannerⅢ、Ⅳ期80例)予知柏地黄丸联合大补阴丸治疗3～6个月,部分无效者予促性腺激素释放激素(GnRHa)治疗,3～6个月复查盆腔B超、促黄体生成素释放激素(LHRH)激发试验,6～12个月复查骨龄.结果 青春发育提前女童:男童=19∶1；发病年龄以6～9岁为主；食用营养保健品、喜食动物性食品及饮料、常用成人洗护品、经常看电视、玩电脑、爱看情感类电视和书籍可能是儿童青春发育提前的诱因.知柏地黄丸联合大补阴丸治疗,TannerⅡ期有效300例,无效40例,有效率88.2％,TannerⅢ、Ⅳ期有效34例,无效46例,有效率42.5％,差异有统计学意义(P＜0.05).GnRHa治疗所有患儿性征均减退.结论 重视儿童早发育的灰色地带,预防、纠正不良饮食生活习惯,大多数早发育儿童能用中药控制,部分较晚诊断者,则需GnRHa控制.
-
LHRH及其受体对前列腺癌的作用研究进展
近50年来,激素治疗作为治疗前列腺癌的一种方法,在大多数病例中取得了显著疗效.对于LHRH类药物的研究取得了诸多进展,对LHRH及其受体自身的分布与功能也有多方面的发现,本文将国外近年来对LHRH及其受体的基础研究与前列腺癌的病理联系、临床上的药物匹配、与外科治疗及放疗的相互作用、新制剂及副作用等方面进行文献回顾.
-
LHRH药代动力学试验
目的:研究黄体激素释放激素(Luteinizing hormone-releasing hormone,LHRH)在大鼠体内的药动学规律.方法:用氯胺T法将125I标记到LHRH分子上(放化纯度96.2%),14只SD大鼠随机分为大剂量、小剂量组,每组7只,分别肌肉注射125ILHRH(小剂量组0.5mg.kg,大剂量组1.00mg.kg),给药后在21个不同时间点逐一取各鼠尾动脉血做放射性测定.结果:大鼠试验结果显示,大剂量组t1/2平均为67.83±20.84h;小剂量组半衰期平均为64.68±22.90h.LHRH的药-时曲线符合二室模型,大剂量LHRH和小剂量LHRH的主要药动学指标差别不大.结论:LHRH在大鼠体内的消除模式为二室模型,为一级动力学消除.
-
合浦珠母贝生殖腺及消化道GnRH及其受体的免疫组织化学研究
目的:观察合浦珠母贝生殖腺及消化道促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)及其受体的表达及分布,为进一步研究GnRH对合浦珠母贝生殖和消化功能的调控提供形态学依据.方法:利用免疫组织化学ABC法和SP法.结果:在消化道的上皮细胞,固有层细胞和生精小管上皮细胞,GnRH及其受体均呈阳性反应,阳性反应物分布在细胞质内,细胞核呈阴性反应,卵巢间质细胞均呈弱阳性反应.结论:合浦珠母贝生殖腺及消化道既能分泌GnRH又能表达其受体,说明GnRH可能通过自分泌或旁分泌作用来调节合浦珠母贝的繁殖及消化功能,这些发现为以后GnRH在合浦珠母贝人工育苗方面的应用奠定了基础.
-
人甲状腺肿瘤促性腺激素释放激素受体的免疫组化
目的探讨人甲状腺肿瘤是否存在促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)及细胞定位. 方法从我院普通外科收集病例标本,分为甲状腺腺瘤组和甲状腺癌组,以瘤旁甲状腺及正常甲状腺为对照,采用兔抗GnRH抗独特型多克隆抗体的免疫组织化学ABC法,确定GnRH-R在甲状腺肿瘤中的定位,并结合图像分析检测GnRH-R在两种肿瘤中相对含量的变化. 结果甲状腺腺瘤及甲状腺癌细胞均呈较强的GnRH-R免疫反应阳性,阳性物质分布在胞质,胞核呈阴性. 甲状腺瘤的阳性信号强于甲状腺癌. 瘤旁甲状腺及正常甲状腺滤泡上皮细胞免疫反应阳性较弱,胞质深染,呈棕褐色,胞核淡染,未见有阳性物质分布. 图像分析结果,甲状腺瘤组单位面积免疫反应阳性物质的相对含量为0.074±0.013,甲状腺癌组为0.033±0.011,甲状腺瘤组相对含量显著高于甲状腺癌组(P<0.05). 瘤旁及正常甲状腺组为0.018±0.007,其相对含量较肿瘤组低(P<0.05). 结论人甲状腺肿瘤中有GnRH-R存在. GnRH-R含量的多少可能与甲状腺肿瘤的分化程度相关. 我们推测GnRH可能参与甲状腺肿瘤发生的调节.
