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液相色谱与串联质谱在检验医学中的应用
1987年Bruins和Coney等发明了大气压离子化技术,由于该技术可在常温和常压下实现离子化过程,并对不易挥发、热不稳定性化合物,肽、蛋白质、核酸等生物大分子进行分析,当时即引起世界性轰动.1989年第一台商业化液相色谱串联质谱仪(LC-TMS)随即问世.尽管现在色谱和质谱技术已成为生物医学和蛋白组学研究的重要技术,但距临床检验应用仍有一段距离.这是因为色谱和质谱技术与自动化生化和免疫分析仪相比,操作技术条件要求高,出现的故障复杂有关.随着液相色谱串联质谱技术的不断完善和改进,该技术将会在检验医学领域中发挥更大的作用.
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遗传性代谢病的防治要同时考虑社会效益和经济效益
非常感谢读者对<中华儿科杂志>2005年5期325页刊出的"串联质谱技术在有机酸血症筛查中的应用研究"一文的关注.赵一鸣医师提出串联质谱仪是一种复杂的高科技设备,设备本身昂贵,维护成本高,对用于我国新生儿筛查的可行性和经济性提出疑问,尤其建议将串联质谱新技术的应用目标由人群筛查改为临床诊断与鉴别诊断.我们认为这一建议值得斟酌.
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基于液相色谱-串联质谱联用技术的临床代谢组学中样本前处理方法的研究进展Δ
代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学后的新兴“组学”研究方法，是系统生物学的重要组成部分［1］。作为一门研究生物体内源性代谢物整体及其变化规律的科学，代谢组学以组群指标分析为基础，以高通量检测和数据处理为手段，以信息建模与系统整合为目标，对某一生物或细胞在特定生理时期内所有低分子量（＜1000 Da ）代谢物同时进行定性和定量分析，具有较好的预见性和可靠性，可准确、有效地判定不良反应程度，是寻找新型可靠生物标记物的重要手段，在疾病的早期发现、机制研究以及药物安全性评价等方面发挥着重要作用［2-5］。临床代谢组学研究的样本包括生物液体和组织，由于尿液和血液收集简单、易于长期检测及包含大量的代谢信息，已成为代谢组学研究的常用标本。对样本进行适当的前处理，使检测的准确度、精密度、重现性等符合要求，是研究的基础。代谢组学的研究对象是生理、病理过程中的代谢产物，尽可能多地减少代谢产物的损失、获得更多的代谢产物是前处理的目标，同时，需兼顾方法重现性好、前处理步骤少、节约处理时间、尽量减少引起变异因素等。根据研究对象、研究目的等的不同，前处理具体步骤也不同。因此，做好生物样本的前处理是临床代谢组学研究的重要前提。初期，代谢组学研究主要采用核磁共振波谱法（ nuclear magnetic resonance spectroscopy ， NMR ）、质谱法（ mass spectrometry，MS）为核心的分析技术。近年来，不同类型串联质谱仪不断发展，其不仅可以实现高通量分析，还可同时获得分子离子和子离子的精确质量数，有利于获取分子式及代谢物的裂解特征信息、有效进行未知化合物的解析，因此非常适合寻找及鉴定标志物。由于其独特的研究角度和技术优势， MS已超过NMR成为应用广泛的代谢组学工具，并迅速应用于医学、药学及生物学的各个研究领域，取得了巨大的成就［6-9］。本文对基于液相色谱-串联质谱联用法（ liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS／MS）的临床代谢组学研究中生物样本前处理方法进行综述。
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氨基酸及肉碱非衍生化串联质谱法检测系统的性能验证
目的：按照 ISO15189‐2012《医学实验室质量和能力的要求》对 Waters 公司 ACQUITY TQD 串联质谱仪及其配套试剂、PerkinElmer 公司 NeoBaseTM Non‐derivatized MSMS kit 在测定氨基酸和肉碱方面进行性能验证。方法按照美国临床实验室标准化协会指南文件 EP15‐A2《用户对精密度和准确度性能的核实实验———批准指南》提供的方法，对检测系统进行正确度和精密度验证；按照卫生部行业标准 WS／T408－2012《临床化学设备线性评价指南》提供的方法，对其进行线性范围验证。结果6种氨基酸和7种肉碱的相对偏倚为0．13％～11．34％，均小于1／2允许总误差；批内精密度为0．55％～4．78％，均小于1／4允许总误差；期间精密度除缬氨酸低水平外，为2．52％～7．95％，小于1／3允许总误差；瓜氨酸、苯丙氨酸、游离肉碱在厂家给出的线性范围内呈一阶线性，缬氨酸呈二阶线性，其余呈三阶线性。结论氨基酸及肉碱非衍生化串联质谱法配套检测系统的性能特征验证通过，可按照常规临床化学检测系统进行管理和要求。
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串联质谱仪不同扫描方式对检测美国CDC酰基肉碱定值质控纸片检测结果的影响
目的 通过探讨串联质谱仪不同扫描方式对检测美国CDC酰基肉碱定值质控纸片结果的影响,寻找检测酰基肉碱的适扫描方式.方法 分别采用母离子扫描法(precursor ion,Prec)和多反应监测法(multiple reaction monitoring,MRM)对美国CDC提供的酰基肉碱定值纸片(包括4个浓度水平)进行检测.每天测定所有水平的酰基肉碱,连续测定5 d.计算不同扫描方式测得的酰基肉碱的批内、批间CV%和相对偏倚.结果 Prec 法检测C2的批内CV%高于MRM法检测的批内CV%(t=5.053,P=0.002);Prec法检测C6的批间CV%高于MRM法检测的批间CV%(t=2.737,P=0.034);Prec法和MRM法的相对偏倚均在美国CDC要求的范围之内.结论 与Prec法比较,MRM法在检测个别酰基肉碱时的精密度更好,但同时,优化MRM法也比较费时、繁琐.因此,建议将两种方法搭配使用,从而达到结果准确、省时省力、节约成本的综合效果.
