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形态学检查方法的标准化及其在细菌鉴定中的作用
形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义.痰标本涂片中的白细胞数和鳞状上皮细胞数决定了这个标本是否做培养.同时,菌体形态及是否在白细胞内等信息为痰标本培养出的微生物是否为致病菌提供了重要线索.
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真菌不同接触方式对自然杀伤细胞表面受体表达的影响
目的 本研究通过Transwell隔离培养体系探讨烟曲霉菌、白色念珠菌的不同菌体形态及不同接触方式对脐血来源细胞因子诱导自然杀伤(NK)细胞表面受体表达的影响,揭示NK细胞抗真菌与抗肿瘤作用机制的异同.方法 利用聚碳酯膜孔径0.4μm的Transwell隔离培养系统,将实验组分为直接混合培养组(即直接接触组)和隔离组(即间接接触组)；将NK细胞与真菌(烟曲霉菌孢子或菌丝、白色念珠菌孢子或菌丝)、K562细胞按10:1比例进行直接混合和隔离培养,每组3个重复孔；培养6h后通过流式细胞仪检测各组NK细胞胞膜受体NKG2D、TLR2及CD94/NKG2A的表达.结果 烟曲霉菌、白色念珠菌的孢子和菌丝的直接接触作用均可上调NK细胞表面受体TLR2的表达(P值均＜0.05),但间接接触作用对TLR2的表达无影响(P值均＞0.05),真菌的直接、间接接触作用对NKG2D、CD94/NKG2A的表达均无影响(P值均＞0.05)；与K562细胞的直接接触可上调NK细胞表面受体NKG2D的表达(P值＜0.05),但对TLR2、CD94/NKG2A的表达无影响(P值均＞0.05).结论 真菌可以直接接触作用的方式通过上调TLR2的表达激活NK细胞,这与肿瘤细胞激活NK细胞的方式不同；真菌及肿瘤细胞的刺激均对NK细胞胞膜受体CD94/NKG2A的表达无影响.
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药敏在细菌鉴定及抗感染治疗中的作用
细菌鉴定一般从标本来源、菌落形态、染色性、菌体形态、生化反应、生物编码或借助细菌鉴定仪等诸方面来鉴别细菌[1].随着抗菌药物在临床上的广泛应用,细菌常会出现耐药性,工作中发现部分细菌的某些药敏谱可有固定模式:呈天然耐药或高度耐药或高度敏感,其在细菌鉴定和抗感染治疗中起较大作用,现分述如下.
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肾病综合征患儿脑脊液、血液中检出浅白隐球菌1例
患儿男，9岁。因肾病综合征反复发作，连续服用强的松每日10mg4年，近日出现发热、头痛伴恶心，体温37.7℃，经抗炎、对症治疗病情无好转。查外周血WBC 8.2×10９／L，N 0.79，L 0.21，Hb 105g／L。脑脊液压力1.95 kPa，无色微混，潘氏试验阳性，WBC 0.1×10９／L，N 0.10，L 0.90，糖1.67mmol／L，墨汁涂片找到隐球菌。血液增菌培养，第4天增菌液混浊，瓶底呈现玫瑰红色。移种血平板，35℃培养48小时，见直径0.5～1mm酵母样菌落，不溶血、外观透明、粘稠；沙氏培养基、35℃培养48小时，见直径约1mm、圆形、突起、有粘稠感、奶油样菌落。葡萄糖肉汤中沉淀生长，无菌膜；血清中不形成芽管；吐温80玉米琼脂上不形成菌丝、无关节孢子。菌体形态为革兰氏阳性圆形或椭圆形孢子体，周围绕一圈透明荚膜，孢子内有反光颗粒。该菌株触酶阳性，氧化酶阴性，迅速分解尿素、淀粉样化合物形成。硝酸钾利用阳性。糖发酵试验：葡萄糖、乳糖、麦牙糖、蔗糖均阴性。同化试验：肌醇、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、棉籽糖、阿拉伯糖均阳性，乳糖、半乳糖阴性。属间鉴别：脲酶阳性除本菌属外还有红酵母菌，毛孢子菌属。本菌能同化肌醇不产生红色素，此系与红酵母的主要区别；不产生关节孢子，则有别于毛孢子菌。属内鉴别：根据本菌氧化酶阴性、利用硝酸钾、同化阿拉伯糖等可与新型隐球菌相鉴别；而非致病性隐球菌37℃不生长、无荚膜、不产生淀粉样化合物。综合菌落、菌体形态、培养特性及生化反应结果，该菌鉴定为浅白隐球菌。
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果脯蜜饯的细菌污染状况及污染菌相调查
果脯蜜饯是我国传统的美食之一,是旅游休闲的好食品.其色泽光亮透莹,肉质细腻致密,酸甜适中,爽口而有回味,因而深受广大消费者的喜爱.然而,它是直接入口的食品,为了了解果脯蜜饯的卫生状况,我们从杭州各超市随机抽取了10种果脯蜜饯,对其进行菌落总数和大肠菌群测定,并通过菌落形态、菌体形态、染色特性、生化试验等实验手段,对污染细菌进行菌相分析.
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血链球菌细菌素对白色念珠菌及热带念珠菌菌体形态影响的研究
目的:研究血链球菌细菌素对白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)的抑制作用及形态学影响.方法:通过低温高速离心,超声破碎等方法提取血链素,使血链素分别作用于单独及混合培养的C.a及C.t,于37℃下80r/min振荡培养.培养12h时,以平板菌落计数法测定不同浓度血链素的抑菌活性；每2h测1次各组菌悬液的A值,并绘制生长曲线,观察血链素对C.a及C.t生长曲线的影响.在血链素对C.a及C.t的作用过程中,利用光学显微镜及扫描电镜对菌体形态进行观察.结果:单独及混合培养的C.a及C.t在1 g/L血链素作用后菌落数低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).血链素作用后,C.a及C.t的生长曲线在6～14 h发生显著改变,对数生长期被推迟8h.血链素作用后,C.a及C.t的孢子及菌丝表面出现“盘状凹陷”形态.结论:血链素对单独及混合培养的C.a及C.t具有显著抑制作用.血链素使C.a及C.t的对数生长期推迟.血链素可导致念珠菌C.a及C.t的菌体形态发生改变.
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搅拌桨叶型式对庆大霉素产生菌菌丝形态及其生物合成的影响
六平叶圆盘涡轮桨搅拌产生的剪切力强烈,能达到有效混合,增强氧的传递,而六箭叶圆盘涡轮桨搅拌产生的剪切力较温和,基于庆大霉素产生菌对剪切力敏感的发酵过程特性,在相同的发酵工艺条件下,将六平叶圆盘涡轮桨变换为六箭叶圆盘涡轮桨,实验结果表明剪切力对庆大霉素产生菌棘孢小单孢菌的菌丝形态及其生物合成有显著的影响.在庆大霉素发酵过程中,剪切力相对温和的条件下,菌丝形态、菌体浓度及粘度均有明显的改善,增强了菌丝代谢活力,改变了发酵液的流变学特性,提高了粘度,使产素水平提高48.6%,达到1282μg/ml.
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变异念珠菌常见菌落和菌体形态
目的 研究白色念珠菌变异后菌落及菌体形态的变化特征.方法 用唑类抗真菌药物对白色念珠菌标准菌进行实验室诱导得到不同的变异株;不同培养环境下获得白色念珠菌自发变异株.从抗真菌药物治疗效果不佳的临床念珠菌感染患者标本中分离培养的念珠菌变异株.将以上变异株进行培养,革兰染色,镜下观察菌体形态.结果 氟康唑诱导变异株菌落呈黏液状,革兰染色为阳性长杆状;伊曲康唑诱导的变异株菌落呈水滴状,革兰染色为阴性球杆状;酮康唑诱导的变异株菌落呈灰白色,革兰染色为阳性葡萄状;白色念珠菌自发变异株和临床分离念珠菌变异株菌落多产红色、黄色等色素形态为革兰阳性球菌状、革兰阴性杆状,也可呈白色毛绒状、淡粉色粉末样菌落,革兰染色为阳性念珠菌.结论 常用抗真菌药物、生长微环境改变、体内某些因素极易诱发念珠菌发生变异,变异后念珠菌无论菌落和菌体可发生类细菌样改变,因此,容易造成实验室在诊断念珠菌感染时的误诊和漏诊.
