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081 利用微生物降解含汞废物的分子机制研究
由于含汞废物排放量大,对环境毒副作用强,因此近两年对含汞废物治理和回收的研究逐渐深入.随着分子生物学的发展,国内外学者都把目光投向利用微生物对含汞废物进行治理方面,尤其是对其抗性及重组体构建方面的研究进展较快.利用微生物在自然界形成的抗性,把各种抗性基因进行基因重组构建出耐毒性能更高的工程菌,可以把毒性大的含汞废物降解为毒性小、易回收的金属汞.鉴于此,本文对用来降解含汞废物的微生物的基因组成、抗性基因的转运机制、抗汞还原酶和裂解酶的作用机制等方面进行综述.
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三峡库区腹地首次检出麦氏弧菌
麦氏弧菌(V.metschnikovii)是11种致病性弧菌之一,因其氧化酶阴性,在检验中常被忽略.国内学者很少有相关报道.这次分离到的麦氏弧菌,从形态学、生物学特征以及系统生化反应上都符合麦氏弧菌的定义.但该菌致病的临床表现与霍乱弧菌引起的症状区别不大,且症状较为严重.为了提示医务工作者注意对该病的诊断和检测,现将结果报告如下.
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等温扩增荧光法(IAFT)快速检测食品中沙门菌方法的建立
沙门菌属一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类食物中毒的常见细菌之一。传统的沙门菌检测方法主要是经过增菌培养,分离琼脂平板培养等步骤后,通过形态学和染色法和各种生化指标,如硫化氢气体、赖氨酸脱羧酶、氧化酶、靛基质尿素和KCN等加以鉴定。
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复检人员血象的调查分析/60Coγ射线照射对BEP2D细胞的氧化损伤/辐射对大鼠肝细胞色素P450氧化酶的影响/辐射防护剂及化疗保护剂的研究和应用/毛发早期辐射生物剂量计的可行性探讨/放射作业人员眼晶体情况调查
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食品中SO2的三乙醇胺-副品红分光光度测定法研究
食品生产中常加入亚硫酸盐,因其具有还原性,可阻断微生物的正常生理氧化作用,并可抑制水果中氧化酶的活力,防止氧化酶对营养成分的破坏和颜色的改变,故用来漂白、脱色、抗氧化和防腐.
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吃红薯有讲究
秋季红薯陆续上市.在中医文献里,红薯有着“补虚乏,益气力,健脾胃,强肾阴”的功效,而现代医学也证明红薯是“抗癌第一先锋”.而食用红薯有哪些讲究呢?第一,蒸熟煮透.红薯淀粉含量高,不经过蒸熟煮透来破坏它的淀粉颗粒,就不容易消化.在蒸煮时,好能尽量延长些时间,使其中含有的氧化酶分解.这样吃起来就不会出现腹胀、烧心、打嗝、反胃、排气等不适.
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从一例腹泻患者中检出山夫登堡沙门菌
2002年8月北京市西城区一餐馆内3名民工食炒饼6 h后出现呕吐、腹泻等症状,采取3人未用药前粪便标本,经常规方法检测,结果从1例患者中检出一株山夫登堡沙门菌.将该患者粪便在亚硒酸氢盐培养基增菌18~24 h,转SS平板培养18~24 h,从SS平板上挑取单个菌落,接种三糖铁培养基,37℃培养18~24 h,反应为斜面产碱,高层产酸产气.H2S阳性,动力阳性.经生化鉴定邻硝基苯一半乳糖甙、脲素、色氨酸、肌醇、蔗糖、明胶、苦杏仁甙、氧化酶均阴性;精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、柠檬酸钠、硫化氢、丙酮酸盐、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、鼠李糖、阿拉伯糖均阳性.
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威隆气单胞菌引起严重腹泻一例
到目前为止,威隆气单胞菌(A.veronii)引起人类肠道致病极为罕见。我院于1999年9月17日从1例严重腹泻患者的脓血便中分离出该菌。 1.病历简介:患者男性,30岁。当天出现发热、腹痛、腹泻、恶心、呕吐,脓血便等症状;经大便镜检:红细胞(),白细胞();初诊为细菌性腹泻。 2.细菌学鉴定:将脓血便接种于血平板、麦康凯、SS培养基及碱性蛋白胨水增菌6~8 h后分离于4号琼脂平板35℃18 h培养。在4号平板上菌落生长快,大而纯,呈中心黑色,边缘无色菌落,并排除霍乱弧菌(埃尔托)。接种在6.5% NaCl中不生长。革兰氏染色为阴性杆菌;生化试验:触酶、氧化酶、动力试验阳性;分解蔗糖、甘露醇、葡萄糖(产气)、ONPG、水杨苷、七叶苷、吲哚、V-P、赖氨酸、鸟氨酸均为阳性;阿拉伯糖、肌醇、精氨酸双水解酶均为阴性;对O/129耐药。根据以上特征疑该菌为气单胞菌少见种,进一步用法国bioMerieux公司VIEK32型全自动微生物分析仪的GNI+快卡,API细菌学的专家系统鉴定,4 h结果显示30种生化反应,并经专家系统认可为威隆气单胞菌,鉴定百分率为99%。经上述分析仪的GNS-NT药敏鉴定卡试验,并经专家系统认可,再加MH-KB法药敏补充,得出该菌对氨苄西林、头孢唑啉耐药,对头孢他啶中敏,对头孢氨噻肟、头孢噻酚、庆大霉素、奈啶酸、奈替米星、呋喃妥因、氟哌酸、妥布霉素、复方磺胺甲恶唑、丁胺卡那霉素、环丙沙星、亚胺培南、哌拉西林(特治星)敏感。据此给予丁胺卡那霉素等治疗,4 d后痊愈。 3.分析:威隆气单胞菌为气单胞菌属中的一种肠道致病菌新种。该患者是会议集体用餐所导致的40多例腹泻患者中为严重的一例,因其他患者未做大便培养,所以,威隆气单胞菌是否与本次由食物引起的集体散发性腹泻有密切关系,这一结论尚需进一步确诊。结果显示:对于医院做大便常规培养时,一般只做沙门氏菌属、志贺氏菌属及霍乱弧菌的鉴定是不够的,对于经氨苄青霉素久治不愈者和严重腹泻患者(特别是脓血便)的大便培养中,应注意革兰氏阴性杆菌氧化酶阳性的优势菌的鉴定。
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人体的生理玄机
胆量取决于单一氧化酶人类在生理上有寻求刺激的倾向,喜欢探险者有之,追求非凡经历者有之,纵欲主义者有之,标新立异者也有之.从神经生理学和化学的角度分析,这是因为冒险者体内的单一氧化酶(一种抑制神经传导物的酶)比较少,致使其情感不易控制的结果.从另一个角度来看,这些人反而具备了像攀登者、赛车运动员一样的超群胆量.当然,具有积极因素的冒险应予鼓励,如勇气、好奇心、创造力等,但要使人们理解有积极意义的冒险行为与自我毁灭行为的不同之处,懂得什么才是真正的勇气和胆量.
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黄芩素对UVB诱导HaCaT细胞光老化及相关p38信号通路的影响
目的:研究黄芩素对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(HaCaT)光老化及相关p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响.方法:选择1×10-11,1 ×10-10,1×10-9,1×10-8,1 × 10-7,1×10-6,1 ×10-5,1×10-4,1×10-3 mol·L-19种浓度黄芩素作用于HaCaT细胞,噻唑蓝(MTT)法筛选出佳有效浓度.经预实验筛选出辐射强度为0.5 mW·cm-2的UVB,辐射时间为5 min建立光老化模型,筛选出佳有效浓度作用于光老化模型,另设空白组MTT法检测各组细胞活性.超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD,GSH-Px,CAT活性及MDA含量.实时定量荧光定量聚合酶连式反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组细胞中mRNA及蛋白表达.结果:筛选出1×10-7,1×10-6,1×10-5 mol·L-1黄芩素为佳有效浓度;与空白组比较,UVB组对HaCaT细胞无明显的增殖作用.与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5 mol· L-1黄芩素组对光老化模型无明显增殖作用.与空白组比较,UVB组SOD,GSH-Px及CAT活性明显的降低,MDA含量显著升高(P<0.01);与UVB组比较,1 ×10-7,1×10-6,1×10-5 mol· L-1黄芩素组SOD,GSH,CAT活性明显升高,MDA含量明显降低(P <0.05,P<0.01).与空白组比较,UVB组肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA及TNF-α,磷酸化p38(p-p38)蛋白表达显著升高(P<0.01);与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5 mol· L-1黄芩素组TNF-α mRNA及TNF-α,p-p38蛋白表达明显降低(P <0.05,P<0.01).结论:黄芩素对UVB诱导HaCaT细胞光老化保护作用主要是通过提高氧化酶活性以及阻断p38MAPK信号通路,抑制炎症因子产生.
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何首乌水培繁殖及生根相关生理生化特征的动态变化
目的:为何首乌人工繁育和更深一步研究何首乌生根机制提供理论依据和技术指导.方法:以何首乌嫩枝为材料,进行2号生根粉(ABT2)不同浓度的对比试验,研究水培繁殖及生根过程中内源激素吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷类(ZRs)、脱落酸(ABA)含量及吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、多酚氧化酶(PPO)活性的动态变化.结果和结论:50mg·L(-1)ABT2处理何首乌插条,平均生根率到达了94%,10,25 mg·L(-1)ABT2处理插条生根率为75%,88%,而对照只有46%生根.何首乌水培生根过程可分为根诱导期、露白期和伸长期3个阶段.内源激素含量、氧化酶活性的动态变化与插条不定根生长过程密切相关,不定根诱导期需要低含量的内源激素IAA,ZRs,ABA和较高活性的IAAO;不定根形成露白期需要高含量内源激素IAA、较高活性的PPO、低含量的ZRs,ABA和低活性的IAAO;不定根伸长期需要一定含量的IAA,ZRs,ABA和较高活性的PPO,IAAO.生根过程中,50mg·L(-1)ABT2的处理增加了插条内IAA含量和PPO活性,降低了插条内ABA,ZRs含量和IAAO活性.
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对巴尔通体感染的新认识
巴尔通体(Bartonella)是一群革兰染色阴性、氧化酶阴性、营养条件要求苛刻兼性细胞内寄生的需氧杆菌,作为新发及老传染病的病原体,从20世纪80 年代开始再次肆虐人类,并以新的以往人们未知的形式表现出来.由于巴尔通体感染表现出来的复杂的疾病谱,以及人们对其认识的改变和加深,人们对巴尔通体的研究逐渐重视起来.作者就巴尔通体分类学位置变化、自然历史、临床表现、流行病学等方面予以综述.
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蠕虫NADH-延胡索酸还原酶模型优化及沃特曼内酯F 的活性评价
目的 优化蠕虫 NADH-延胡索酸还原酶及哺乳动物NADH 氧化酶的高通量筛选模型,评价沃特曼内酯 F 的活性及选择性.方法 提取猪蛔虫和猪心线粒体,对温度、pH、NADH 浓度和线粒体浓度等参数进行优化,确定适宜反应条件.在佳反应条件下测定沃特曼内酯 F 对猪蛔虫 NADH-延胡索酸还原酶和猪心 NADH 氧化酶的抑制活性.结果 猪蛔虫 NADH-延胡索酸还原酶佳反应条件为37 ℃,pH 6.5,NADH 浓度为 0.18 mmol/L,线粒体浓度为0.025 g/L.沃特曼内酯 F 的 IC50 为 5.0 nmol/L;对于猪心NADH 氧化酶的 IC50 大于 6.2 μmol/L.结论 沃特曼内酯 F 是一种选择性猪蛔虫 NADH-延胡索酸还原酶的抑制剂,抑制活性达到了 nmol/L 级,具有成为新型抗蠕虫药物的潜力.
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催化甾体羟基化的P450氧化酶BM3的蛋白质工程的研究进展
甾体关键位点的羟基化在药用甾体的合成中发挥重要作用。为探究细胞色素 P450(CYP450)氧化酶 BM3在甾体羟基化合成中的潜在应用,基于细胞色素 P450 BM3的蛋白质工程逐渐发展起来。在取得的若干 P450 BM3突变酶的基础上,通过新一代测序技术和生物信息学分析等方法,筛选出催化甾体羟基化的相关 CYP450。根据易错 PCR等定向进化技术获得了突变位点信息,进一步采用(饱和)定点突变等进化技术对活性氨基酸位点进行分析,再经过筛选获得既高于亲本酶也高于易错 PCR技术得到的突变酶活力的新突变酶,并对突变体进行功能验证,进一步阐明甾体羟基化的可行性和重要性。此外,P450 BM3催化底物和生成产物的选择性可以通过迭代的组合活性位点突变而改变。本文旨在探究近年来科研人员在 P450氧化酶 BM3蛋白质工程催化甾体羟基化的改良领域中所做的尝试、获得的成果以及存在的问题,为 P450 BM3羟基化疏水性甾体的深入研究提供理论依据。
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线粒体细胞色素C氧化酶与肿瘤
线粒体是哺乳动物细胞质中惟一含有遗传物质的细胞器,其基本功能是通过氧化磷酸化,以ATP的形式为细胞提供能量,被称为细胞的"动力工厂".线粒体有自己的基因组,执行着各自的作用;基因组能够单独进行复制、转录及合成蛋白质,同时还受核基因的参与和控制.线粒体编码基因排列紧凑、无间隔区且部分区域存在重叠,游离于线粒体基质中,缺乏组蛋白保护,其损伤修复系统也不完善.因此,任何改变都可能累及到基因序列和编码产物中的重要功能区域,引起相关的疾病.线粒体细胞色素C氧化酶(mt-COX)是线粒体内呼吸链复合物Ⅳ,近年的研究显示,mt-COX与肿瘤的发生相关[1].一、mt-COX的基因结构和蛋白特性mt-COX定位于线粒体内膜,哺乳动物mt-COX由13个亚基组成,由亚基组装成有功能的全酶是一个复杂的过程[2],需要多种分子伴侣和装配因子的协助才能完成.
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四种血糖测定方法的比较
目的 了解四种血糖测定方法结果的差异及影响因素.方法 分别用己糖激酶法(HK)、氧化酶法(GOD-POD)法和手工比色法测定53例患者血清葡萄糖浓度,同时用血糖监测仪测定患者毛细血管血葡萄糖浓度,然后对四组测定结果进行配对资料t检验处理及相关性分析.结果 血糖正常时,HK法比GOD-POD法结果平均高0.13 mmoL/L(2.5%),比手工比色法结果平均高0.49 mmol/L(9.4%),比血糖监测仪结果平均高0.30 mmol/L(5.7%),分别对HK法与GOD.POD法、GOD-POD法与手工比色法、HK法与血糖监测仪进行相关分析,相关系数γ分别为0.99、0.94和0.68;高血糖时,HK法比GOD-POD法结果平均高0.20 mmol/L(1.7%),比手工比色法结果平均高1.84 mmol/L(15.7%),比血糖监测仪结果平均高1.5 mmol/L(12.9%),其相关系数γ分别为0.99、0.95和0.85.结论 血糖正常时,HK法与GOD-POD法、手工比色法、血糖监测仪所测结果均有显著性差异,P值分别为<0.01、<0.01及<0.05;高血糖时,HK法与GOD-POD法、手工比色法及血糖监测仪所测结果均有显著性差异,P值均<0.01.相关性分析表明,HK法与GOD-POD法呈高度直线正相关,GOD-POD法与手工比色法相关性良好,而HK法与血糖监测仪相关性较差.
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氧化酶对霍乱弧菌的筛选
中国误诊学杂志编辑部:我们于2004年秋季在1周内对3 000人进行了霍乱弧菌的普查工作,报告如下.1 材料和方法1.1 标本来源粪便均来自我区某村腹泻患者和健康人,采样后4 h送检.
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少动鞘氨醇单胞菌引起阴囊感染一例
少动鞘氨醇单胞菌(sphingomonas paucimobilis)原名为少动假单胞菌,本菌可引起创伤后的腿部溃疡.可从血液、脑脊髓液、尿液、伤口和脓肿中分离出来,也可从痰液、阴道和子宫拭子中分离到.可引起术后慢性蜂窝组织炎、败血症、急性脑膜炎等疾病[1].我院在2007年6月从1例高热、尿道狭窄、阴囊感染患者的阴囊引流液中分离出1株氧化酶阴性的少动鞘氨醇单胞菌,现报告如下.
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卡维地洛对压力负荷大鼠心功能及心肌线粒体能量代谢的保护作用
目的 探讨β受体阻滞剂卡维地洛对大鼠腹主动脉缩窄术后左室肥厚及机械功能减退的预防作用是否与线粒体呼吸链酶活性的有益影响有关.方法 雄性成年SD大鼠78只随机分成6组:腹主动脉缩窄组(A5指第5周时测定,A15指第15周时测定,以下同),假手术组(B5,B15),卡维地洛组(2 mg/kg·d)(C5,C15),每组13只,观察术后5周及15周大鼠血流动力学参数、心室重构指标;密度梯度法分离大鼠心肌线粒体,氧电极法测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化酶、琥珀酸氧化酶(SO)与细胞色素氧化酶(CCO)活性变化及卡维地洛的影响.结果 腹主动脉缩窄术后大鼠左室质量指数增加,A15组左室压力大上升和下降速率(±dp/dtmax)降低,卡维地洛降低左心室质量指数,增高±dp/dtmax.A5组CCO及NADH氧化酶活性均增高,卡维地洛降低二者活性.A16组NADH氧化酶、SO及CCO活性均降低,而卡维地洛增加CCO及SO活性.结论 肥厚心肌线粒体呼吸链酶活性发生改变,卡维地洛改善心肌肥厚和心功能的同时,调节线粒体呼吸链酶活性从而改善心肌能量代谢.
关键词: 心室重构 呼吸链 氧化酶 β肾上腺能受体阻滞剂 -
夏季菌类大荟萃,糖友健康享美味
食用菌类对大多数人来说都不陌生,它不仅味美,而且营养丰富.食用菌类是一个大家族,常见的品种有木耳、口蘑、金针菇、草菇、香菇、平菇等,这个家族的"兄弟姐妹"外表迥异,风味也各不相同,但它们都是高蛋白、低脂肪,富含维生素和矿物质元素的健康美味.不同的菌类还有各自的特性,下面让我们来了解几种常见的食用菌类.百步闻香之香菇香菇含有一种特别的香味物质,故得其名,干品香气更加浓郁,煮香菇的香气在百步之外就能闻到,其他的菌类都无法与之媲美.每100克新鲜香菇含有19千卡能量、2.2克蛋白质、0.3克脂肪、5.2克碳水化合物.香菇中的多糖物质具有抗癌活性;香菇含有干扰素诱导剂,能诱导机体产生干扰素,香菇还含有多种氨基酸,能增强人体免疫能力,预防感冒等.此外,香菇中含有胆碱、酪氨酸、氧化酶以及某些核酸物质,能起到降血压、调节血脂的作用,又可预防动脉硬化、肝硬化等.糖尿病、神经炎、神经衰弱等患者常吃香菇亦有好处.