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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞微小 RNA-206表达水平
目的：检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclearcell，PBMC）微小 RNA-206（microRNA-206，miRNA-206）表达水平，探讨其在 SLE 发病机制中的作用。方法选择2012年12月至2013年11月在沭阳县人民医院确诊的 SLE 患者，SLE 活动性判断采用 SLE 疾病活动指数（systemic lupus erythematosus diease activity index，SLEDAI）；将所纳入 SLE 患者分为非活动组（SLEDAI≤9分）和活动组（SLEDAI ＞9分）。采集 SLE 患者及健康对照者外周血标本，分离 PBMC。用实时荧光定量聚合酶链反应检测 PBMC 中 miRNA-206及锌指样转录因子4（Kruppel-like factor 4，KLF4）和孤儿核受体γt（orphan nuclear receptor γt，RORγt）mRNA 相对表达量。统计学处理采用 t 检验和 Spearman 相关分析。结果共纳入27例 SLE 患者（非活动组12例，活动组15例）和20名健康对照者。SLE 患者 PBMC 中 miRNA-206表达水平显著低于健康对照组，差异有统计学意义[（0．066±0．021）vs．（0．143±0．059），P ＜0．01]；SLE 活动组（0．034±0．015）显著低于非活动组（0．125±0．038）与健康对照组，差异均有统计学意义（均 P ＜0．01）。SLE 患者 KLF4和 RORγt mRNA 表达水平显著高于健康对照组[（0．637±0．186）vs．（0．104±0．028），P ＜0．01；（0．575±0．263）vs．（0．065±0．014），P ＜0．01]。SLE 活动组 KLF4 mRNA （0．973±0．231）显著高于非活动组（0．131±0．056）与健康对照组，且 RORγt mRNA（0．968±0．316）显著高于非活动组（0．094±0．019）与健康对照组，差异均有统计学意义（均 P ＜0．01）。直线相关分析显示，miRNA-206与 SLEDAI 呈负相关（r ＝－0．654，P ＜0．01），KLF4 mRNA 与 SLEDAI 呈正相关（r ＝0．673，P ＜0．01），RORγt mRNA 与 SLEDAI 呈正相关（r ＝0．719，P ＜0．01）；SLE 患者 miRNA-206与 KLF4、RORγt mRNA相对表达量均呈负相关（r ＝－0．627，P ＜0．01；r ＝－0．853，P ＜0．01），KLF4与 RORγt mRNA 呈正相关（r ＝0．684，P ＜0．01）。结论：SLE 患者 PBMC 中 miRNA-206表达水平下降，KLF4和 RORγt mRNA 表达水平升高，并与疾病活动性密切相关，提示 miRNA-206可能在 SLE 发生发展中起重要作用。
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微小RNA-206在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中表达的变化
目的 检测SLE患者PBMCs微小RNA (miR)-206表达的水平,探讨其在SLE发病中的作用.方法 收集SLE患者及健康对照外周血标本,分离PBMCs.采用实时定量(qRT)-PCR方法检测PBMCs中miR-206及锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)mRNA相对表达量.采用t检验和Spearman相关分析.结果 SLE患者PBMCs miR-206表达的水平显著低于健康对照组(0.066±0.021和0.143±0.059,t=3.136,P＜0.01),KLF4 mRNA、RORγt mRNA表达水平显著高于健康对照组(0.637±0.186和0.104±0.028,t=6.673,P＜0.01)、(0.575±0.263和0.065 ±0.014,t=7.386,P＜0.01),SLE患者PBMCs miR-206表达水平与KLF4、RORγt相对表达量均呈负相关(r=-0.627,P＜0.01)、(r=-0.853,P＜0.01).结论 SLE患者PBMCsmiR-206表达的水平下降,与疾病的发生发展关系密切.
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哮喘患儿外周血CD4+T细胞来源瘦素水平的变化
目的：检测哮喘患儿外周血CD4+T细胞瘦素表达的水平，探讨其在哮喘发生发展中的作用。方法收集27例哮喘患儿在发作期和缓解期以及25例健康对照儿童的外周血标本，分离外周血单个核细胞（PBMC），再用CD4+T细胞免疫磁珠分离CD4+T细胞，体外培养，酶联免疫吸附试验检测上清液中瘦素水平。采用实时定量PCR方法检测PBMC中孤儿核受体γt（RORγt）相对表达量。结果哮喘发作期、缓解期患儿以及健康对照儿童的CD4+T细胞培养液中瘦素水平分别为（68.46±13.08）pg/ml、（36.73±6.13）pg/ml及（32.82±5.79）pg/ml，三组间差异有统计学意义（P<0.01）；经两两比较，发作期高于缓解期和健康对照儿童，差异均有统计学意义（P<0.01）；而缓解期和健康对照儿童的差异无统计学意义（P>0.05）。哮喘发作期、缓解期患儿以及健康对照儿童的血浆瘦素水平分别为（16.64±3.53）ng/ml、（14.91±3.24）ng/ml及（13.72±5.79）ng/ml，三组间差异无统计学意义（P>0.05）。哮喘发作期、缓解期患儿以及健康对照儿童PBMC中RORγt的相对表达量分别为（0.341±0.175）（、0.089±0.028）及（0.068±0.018），三组间差异有统计学意义（P<0.01）；两两比较，发作期高于缓解期和健康对照儿童，差异均有统计学意义（P均<0.01）；缓解期和健康对照儿童的差异无统计学意义（P>0.05）。哮喘患儿发作期CD4+T细胞培养液中瘦素水平与PBMC中RORγt相对表达量呈正相关（r=0.681，P<0.01）。结论哮喘患儿CD4+T细胞瘦素水平升高，与疾病的发生发展关系密切。
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重症肌无力患者外周血单个核细胞中KLF4、RORγt与miR-206水平变化的临床意义
目的 检测重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)中锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)、microRNA-206的表达水平,探讨它们在重症肌无力患者发病中的作用.方法 采集重症肌无力患者及健康对照者清晨空腹外周血标本,梯度离心得到人PBMC.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中KLF4、RORγt mRNA、microRNA-206的相对表达量.结果 重症肌无力患者PBMC中KLF4 mRNA为0.594±0.181,健康对照者为0.089±0.025;重症肌无力患者PBMC中RORγt mRNA表达水平为0.570±0.266,健康对照者为0.067±0.016,重症肌无力患者均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).重症肌无力患者PBMC中microRNA-206表达水平为0.053±0.018,健康对照者为0.134±0.056,重症肌无力患者显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).重症肌无力患者PBMC中KLF4、RORγt相对表达量与microRNA-206表达水平均呈负相关(r=-0.675,P＜0.05,r=-0.806,P＜ 0.05).结论 重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA、RORγtmRNA的表达水平增高及microRNA-206表达水平下降,和疾病的发生和发展有密切的关系.
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类风湿关节炎患者外周血单个核细胞microRNA-206表达水平的变化及意义
目的：探讨外周血单个核细胞microRNA-206在类风湿关节炎发生中的作用。方法收集2012年12月～2013年11月确诊的类风湿关节炎患者27例及25例健康对照外周血标本，分离 PBMCs。采用实时定量 PCR（qRT-PCR）方法检测PBMCs中microRNA-206及锌指样转录因子4（KLF4）、孤儿核受体γt（RORγt）mRNA相对表达量。统计学处理采用非配对t检验和 Spearman相关分析。结果类风湿关节炎患者外周血单个核细胞 microRNA-206表达的水平显著低于健康对照组（0.056±0.019 vs 0.138±0.057，t＝3.103，P＜0.01），KLF4 mRNA和RORγt mRNA表达水平显著高于健康对照组（0.604±0.183 vs 0.098±0.027，t＝6.651，P＜0.01；0.583±0.271 vs 0.069±0.018，t＝7.438，P＜0.01），类风湿关节炎患者外周血单个核细胞microRNA-206表达水平与 KLF4及 RORγt相对表达量均呈负相关（r＝-0.639，P＜0.01；r＝-0.842，P＜0.01）。结论类风湿关节炎患者外周血单个核细胞 microRMA-206表达的水平下降，与疾病的发生发展关系密切。
