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骨髓干细胞归巢研究进展
干细胞已越来越多应用于各种组织器官损伤的再生治疗,包括缺血性心脏病的治疗.干细胞修复作用的前提是细胞归巢,即心肌梗死等细胞损伤坏死引起一系列信号分子的释放,内源性骨髓干细胞或移植的外源性干细胞定向趋化迁移至损伤处,发挥修复作用.
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CCL19在大鼠角膜移植中的作用研究
目的研究角膜移植后局部淋巴结内趋化因子CCL19mRNA表达的变化及其对树突状细胞的趋化作用,探讨CCL19在角膜移植中的作用.方法建立大鼠正位穿透角膜移植模型,RT-PCR法测定正常角膜0d及角膜移植后1d,3d,5d,7d,10d,14d的局部淋巴结内趋化因子CCL19 mRNA的表达变化,应用Boyden小室进行不同时相淋巴结组织液对体外培养树突状细胞的趋化实验.结果自体移植组术后局部淋巴结内CCL19 mRNA的表达升高,持续至术后3d(P＜0.05),以后恢复至正常水平(P＞0.05).同种异体移植组,局部淋巴结内CCL19 mRNA的表达术后1～3d与自体移植组差异无统计学意义(P＞0.05),以后持续上升至后期显著高于正常组及自体移植组,于7d达高峰(P＜0.01).其对体外培养树突状细胞的趋化作用增强(P＜0.05),这种趋化作用可被CCL19抗体所阻断(P＜0.01).结论大鼠角膜移植后局部淋巴结内CCL19 mRNA表达增高,促进树突状细胞的迁移可能是同种异体移植排斥反应启动与进展的重要因素.
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基质细胞衍生因子1对内源性神经干细胞的趋化迁移作用
背景：目前研究表明，基质细胞衍生因子1在参与趋化迁移内源性神经干细胞中起着非常重要的作用，但其具体迁移机制尚不明确。
目的：观察外源性基质细胞衍生因子1对大鼠内源性神经干细胞的趋化迁移作用及海马区神经干细胞的激活增殖情况。
方法：通过向SD大鼠海马区上大脑皮质内注射外源性基质细胞衍生因子1(注射量为5μL，质量浓度为500μg/L)建立动物模型，于3，7，14，21 d后灌注取脑，通过石蜡切片免疫组织化学检测大鼠皮质内注射区及海马区nestin阳性细胞表达情况，并设实验对照组与空白对照组。
结果与结论：石蜡切片免疫组织化学显示：实验组注射区周围及海马区nestin表达阳性细胞的数量随时间推移逐渐增多，3，7 d时注射区及海马区nestin表达阳性细胞少量表达，14 d时注射区及海马区nestin表达阳性细胞进一步增多，并向注射区形成明显的迁移趋势，21 d时注射区及海马区nestin表达阳性细胞更多。实验对照组及空白实验组未见上述表现。结果表明外源性基质细胞衍生因子1可能诱导海马区神经干细胞的增殖分化，参与内源性神经干细胞的趋化迁移过程。 -
芪丹通脉片促进骨髓间充质干细胞向缺血心肌趋化迁移
目的:研究芪丹通脉片对骨髓间充质干细胞向缺血心肌趋化迁移的作用.方法:SD大鼠,随机分为单纯移植组,益气组,活血组 芪丹通脉片组,各组大鼠灌服中药14天后,采用冠状动脉左前降支结扎法建立心肌梗死模型 经尾静脉注入DIO标记的骨髓间充质干细胞,3天后取缺血部位的心肌,应用流式细胞仪分析计算出每克心肌所含有的DIO阳性细胞数；行冰冻切片,采用荧光显微镜观察DIO阳性细胞；4周后采用多导生理记录仪记录大鼠平均动脉压(MAP)、左心室收缩峰压(LVPSP)、左心室内压大上升变化速率(+LVdp/dtmax)和大下降速率(-LVdp/dtmax).结果:芪丹通脉片组较益气组、活血组、单纯移植组,每克心肌所含有的DIO阳性细胞数增多,其差异有统计学意义;冰冻切片镜下观察,芪丹通脉片组阳性细胞数较益气组、活血组、单纯移植组增多,其差异有统计学意义；心功能检测示:芪丹通脉片组MAP、LVPSP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax较益气组、活血组、单纯移植组改善明显,差异有统计学意义:结论:芪丹通脉片具有促进骨髓间充质千细胞向缺血心肌趋化迁移的作用,益气与活血中药配伍应用优于单纯益气药或活血药.
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TNF-α基因转染增强树突细胞迁移及CCR7受体表达
为探讨腺病毒介导肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因转染诱导树突细胞(DCs)趋化因子受体差异性表达,分别用100 MOI的AdV-TNF-α和AdV-pLpA(无外源基因插入)感染小鼠树突细胞(mDCs),经流式细胞仪检测细胞表型变化,RNA酶保护实验检测其趋化因子受体表达,体内、体外细胞趋化试验分析比较其迁移差异.发现AdV-TNF-α感染mDCs后CD11b、CD40、CD86,ICAM-1以及CCR7受体表达较对照组明显增高,CCR2受体表达量却下调;体外细胞趋化试验表明DCTNF-a对MIP-3β(CCR7配体)迁移应答增强,体内细胞趋化试验显示DCTNF-α淋巴结趋化迁移效率较空白对照组和AdV-pLpA感染组分别增高7倍和3倍.提示:AdV-TNF-α感染促使mDCs成熟,增强其次级淋巴结趋化迁移效率.
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PDGF在骨髓问充质干细胞向胶质瘤趋化迁移过程中的作用
目的 观察血小板衍生生长因子(PDGF)和胶质瘤细胞条件培养基对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外迁移能力的影响,探讨PDGF在hMSCs向胶质瘤趋化迁移过程中的作用. 方法 全骨髓贴壁细胞法分离培养hMSCs,应用RT-PCR检测hMSCs中PDGF受体α(PDGFR-α)和β(PDGFR-β)的表达;利用聚碳酸酯膜小室建立体外趋化迁移模型,观察5、50、125 ng/mL PDGF和胶质瘤细胞条件培养基对hMSCs的体外趋化作用以及加入PDGF抗体后对hMSCs趋化迁移的影响. 结果 RT-PCR检测到hMSCs表达PDGFR-α和PDGFR-β;PDGF可以浓度依赖性促进hMSCs的趋化迁移.胶质瘤细胞条件培养基也可趋化hMSCs的迁移.与空白对照组相比迁移细胞数差异均有统计学意义(JP<0.05);PDGF抗体可消除50 ng/mL PDGF、减弱胶质瘤细胞条件培养基对hMSCs趋化迁移的作用. 结论 PDGF促进hMSCs的趋化迁移.在hMSCs向胶质瘤选择性迁移过程中发挥"趋化因子"样作用.
