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慢性肝炎患儿四项血清肝纤维化标志物的检测及其临床意义
目的为了解慢性肝炎患儿血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PcⅢ)和Ⅳ型胶原(cⅣ)的水平及诊断价值.方法用放射免疫法(RIA)分5个年龄组测定459名1～15岁健康儿童和180名慢性肝炎患儿的4项肝纤维化标志物.结果 4项标志物检测结果(x±s)如下:HA(58±16)μg/L,LN(115±17)μg/L,PC(146±27)μg/L,cⅣ(51±16)μg/L.这4种标志物的正常参考值以95%的上限x+1.645 s计算,分别为HA 85(58+16)μg/L,LN 142(115+16.6)μg/L,PC 190(146+27)μg/L,cIV 77(51+16)μg/L.HA、cⅣ与年龄不相关(r=-0.022,P＞0.05;r=0.070,P＞0.05),然而LN与年龄显著相关(r=0.128 2,P＜0.01),PC与年龄呈负相关(r=-0.669,P＜0.01).慢性表面抗原携带者与同龄对照组差异无显著性.轻度慢性肝炎患儿除HA显著性高于对照组(P＜0.05)外,其他3项均无差异.中度、重度及肝硬化儿童的4种血清标志物浓度均高于正常对照组(P＜0.01).在中度、重度和肝硬化患儿中,有2种或2种以上的标志物显著性增加.结论4项标志物在儿童期有其年龄特征.它们可反映慢性肝炎患儿肝纤维化的严重程度.因此,对慢性肝炎和早期肝硬化的诊断有临床应用价值.
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进行性系统性硬化症皮损中前胶原基因和SMAD mRNA的表达
目的 探讨进行性系统性硬化症(PSS)硬化皮肤组织中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原基因以及细胞内信号转导分子SMAD mRNA的表达情况,分析它们在发病机制中的作用.方法 用荧光实时定量聚合酶链反应法分别检测11例PSS患者硬化皮损及11例正常对照皮肤组织中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原基因以及不同类型SMAD(SMAD2、SMAD3、SMAD4、SMAD7)mRNA的表达水平.结果 Ⅰ型前胶原基因α1、Ⅲ型前胶原基因α1、SMAD4及SMAD7的mRNA在硬化皮损中的表达明显高于在正常皮肤组织的表达,差异有统计学意义(均P＜0.05).SMAD4 mRNA的表达与Ⅰ型、Ⅲ型前胶原基因α1mRNA的表达成正相关(r值分别为0.728和0.678,均P＜0.05).SMAD3 mRNA的表达与Ⅰ型前胶原基因α1 mRNA的表达成正相关(r=0.859,P＜0.01).结论 PSS硬化皮肤组织中存在有SMAD4mRNA的高表达,可能是导致Ⅰ型、Ⅲ型胶原在硬化组织中过度堆积的原因之一.
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用于骨靶向治疗的纳米羟基磷灰石溶胶的稳定性研究
目的:制备可用于靶向骨肿瘤治疗的高分散性且生物相容性好的纳米羟基磷灰石溶胶.方法:采用六偏磷酸钠为分散剂制备溶胶,采用MTT法和淋巴细胞实验测试细胞毒性.结果:获得纳米粒子含量为88%的高分散性溶胶,溶胶含量低于27.8 mg/L时,对于3T3细胞和淋巴细胞的增殖没有毒性.结论:该溶胶可以作为靶向药物载体安全用于给药体系.
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系统性硬皮病患者成纤维细胞转化生长因子β 1与Ⅰ型胶原mRNA表达的研究
目的探讨系统性硬皮病成纤维细胞自身分泌的转化生长因子(TGF)β1是否影响Ⅰ型胶原α1链(COLlA1)mRNA表达.方法采用核酸原位杂交和免疫印迹法分别测定培养的硬皮病和正常人成纤维细胞中COLlA1 mRNA的表达和TGF-β1蛋白质的含量.结果硬皮病组成纤维细胞COLlA1 mRNA(A值-x±s为905.09±20.36)表达较对照组354.17±30.89明显增高.硬皮病组和对照组成纤维细胞的COLlA1 mRNA表达均存在异质性,硬皮病组COLlA1 mRNA高表达的成纤维细胞数-x±s为27.33%±4.63%明显高于对照3.67%±1.20%,而对照组低COLlA1 mRNA表达的成纤维细胞数62.33%±3.53%明显高于硬皮病组14.33%±4.91%.硬皮病组内各细胞株间,高、中、低胶原表达的细胞数差异无显著性.硬皮病组和对照组成纤维细胞中TGF-β1蛋白质表达差异无显著性.结论硬皮病成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达增多,这种表达增多与成纤维细胞自身合成TGF-β1的水平可能无关.
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肺心病患者血清Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原及脯氨酸肽酶测定的临床意义
目的:研究肺心病患者血清中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)及脯氨酸肽酶(PLD)的含量变化及其临床意义.方法:采用放射免疫分析法检测血清中PCⅢ与CⅣ含量;用分光光度比色法检测血清中PLD含量.结果:肺心病患者血清中PCⅢ、CⅣ及PLD均显著高于对照组(P＜0.01),且其升高程度与病情相关.结论:肺心病患者血清PCⅢ、CⅣ及PLD水平可作为估价肺血管重建、肺动脉高压及患者病情的参考指标.
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肺心病患者血清Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原及脯氨酸肽酶含量的改变
目的:研究肺心病患者血中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)及脯氨酸肽酶(PLD)的含量变化及临床意义.方法:对30例肺心病患者和20例健康人采用放射免疫分析法检测血清中PCⅢ及CⅣ的含量;用分光光度比色法检测血清中PLD含量.结果:肺心病患者血清中PCⅢ及CⅣ含量明显增高,同时PLD含量亦增加,与健康对照组比较,差异有显著意义(P＜0.01).结论:肺心病患者血清PCⅢ、CⅣ及PLD的水平可作为反映肺血管重建和肺动脉高压的参考指标.
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慢性乙型肝炎肝纤维化分期与血清肝纤维化标志物的相关性分析
目的探讨血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘蛋白、Ⅳ型胶原等血清肝纤维化标志物与慢性肝炎肝组织炎症活动度及纤维化程度的相关性。方法 278例慢性肝炎患者经肝脏活检后常规病理检查，肝活检前同时采血检测血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘蛋白、Ⅳ型胶原，结果应用χ2检验及t检验进行统计学处理。结果肝组织纤维化程度与炎症活动度呈正相关关系，透明质酸可反映中度以上慢性肝炎炎症活动度及纤维化程度，且呈正相关；肝脏存在纤维化时层粘蛋白水平升高，与纤维化程度正相关；Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原水平升高与炎症活动度有关。结论血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、层粘蛋白、Ⅳ型胶原可不同程度反映肝组织纤维化程度，可作为血清肝纤维化检测指标，透明质酸更可反映肝硬化发展趋势。
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代偿性肝硬化无创性诊断指标的筛选及评价
目的比较肝纤维化血清标志物对慢性乙型肝炎(C H B)代偿性肝硬化的诊断评价,筛选可行的无创性诊断标志物.方法 3 5 0例C H B患者经皮肝脏穿刺活检术行病理组织学检查,B型超声波检查肝硬化图像,检测血清透明质酸(H A)、Ⅲ型前胶原肽(P CⅢ)、层黏连蛋白(LN)及Ⅳ型胶原(CⅣ)等肝纤维化标志物,用临床流行病学方法确定诊断截断值,并对各项指标作诊断评价分析,比较不同标志物的诊断评价指标.结果 8 5例C H B患者经肝脏活检术确认为代偿性肝硬化;81例经B型超声波检查有肝硬化图像;ROC曲线下面积以H A高;血清HA、PCⅢ、LN及CⅣ对代偿期肝硬化的诊断截断值分别为1 54.3 5μg/L、198.44μg/L、137.58μg/L和100.80μg/L,其对应诊断灵敏度分别为82.4%、63.5%、57.3%及70.6%,特异度为79.3%、54.0%、56.8%及68.3%,准确度为80.0%、56.3%、56.9%及68.9%;并联试验诊断虽可提高灵敏度,但相应降低特异度及准确度.与其他无创性诊断方法比较,H A有较高水平的诊断评价指标(u≥1.814,P＜0.05).血清H A诊断代偿性肝硬化的截断值以119.17μg/L较为恰当,其相应诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预告值及阴性预告值分别为87.1%、67.6%、72.3%、46.25%、94.7%.结论在现有肝脏纤维化血清标志物及超声波检查等无创性诊断指标中,血清H A是代偿性肝硬化好的诊断标志物.
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激光对瘢痕成纤维细胞胶原合成及前胶原基因表达的影响
目的:探讨激光对体外培养瘢痕成纤维细胞胶原合成的选择性抑制作用.方法:以不同能量密度(500 J/cm2、1000 J/cm2、1500 J/cm2和2000 J/cm2)Nd:YAG激光照射体外培养增生性瘢痕和正常成纤维细胞,照射后24 h分别用3H-脯氨酸掺入法和斑点杂交检测成纤维细胞胶原合成和Ⅰ型前胶原基因表达.结果:培养的增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞的胶原合成和Ⅰ型前胶原Mrna相对量在500 J/cm2激光照射后无明显改变(P>0.05),1500 J/cm2和2000 J/cm2照射后显著降低(P<0.001),1000 J/cm2能量密度激光照射后增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成与Ⅰ型前胶原基因表达显著下降(P<0.001),而正常皮肤成纤维细胞的胶原合成和Ⅰ型前胶原基因表达无变化.结论:以1000 J/cm2脉冲Nd:YAG激光照射能选择性抑制增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成和Ⅰ型前胶原基因表达.
