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  • 血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及与微血管生成的关系

    作者:张艳梅;杜金荣;姜影;付红

    目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的表达及其与血管生成和病理参数的关系.方法:采用S-P免疫组织化学染色法检测56例乳腺癌及10例癌旁正常组织的VEGF表达,并对血管进行Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色,记数微血管密度.对10例乳腺癌进行VEGF mRNA原位杂交检测.结果:乳腺癌组织VEGF表达阳性率高于其癌旁正常组织,差异有显著意义,P<0.05.VEGF的表达与乳腺癌的病理分级密切相关,P<0.01.有淋巴结转移的VEGF表达率明显高于无淋巴结转移,P<0.05;而且随着VEGF表达的增强,乳腺癌组织内微血管密度明显增高,P<0.01.结论:癌组织VEGF表达增强在肿瘤血管生成、生长及转移中起重要作用.

  • 雌孕激素受体和P-糖蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

    作者:李青山;吕喜英;赵晓明;金小平;胡建功;刘承一

    目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和P-糖蛋白(P-gp)在非小细胞肺癌中的表达与预后的关系.方法:应用S-P免疫组化法检测ER、PR和P-gp的表达情况.结果:ER、PR阳性率分别为45.2%和40.4%;腺癌中均为64.7%,明显高于其他组织类型,P<0.01.P-gp在肺癌组织阳性表达率为40.4%.ER、PR和P-gp的表达与性别、年龄、组织类型、细胞分化水平和TNM临床分期无关,P>0.05.P-gp阴性患者术后1、3年无瘤生存期明显高于P-gp阳性患者,P<0.01.肺癌组织中P-gp与ER和PR的表达具有明显相关性,r=0.323,P<0.05和r=0.308,P<0.05.结论:ER和PR不能作为预测肺癌患者预后的指标.P-gp可作为临床判断化疗疗效的参考指标及预测肺癌患者预后的指标.ER和P-gp均阳性的肺癌患者,辅于性激素治疗,疗效更好.

  • 十字饱碱逆转耐药性KB细胞多药抗药性的机制

    作者:雷蕾;王士勇;杨振君;魏群

    目的:研究蛋白激酶C抑制剂十字饱碱(staurosporine, ST)逆转耐长春新碱KB细胞(简称KB/VCR)的机制.方法:用MTT法比较ST作用前后KB/VCR细胞耐药性的改变,用流式细胞术观察KB/VCR药物代谢的变化,用RT-PCR法和免疫组织化学方法研究耐药膜糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein, MRP)和肺耐药蛋白(lung cancer resistance related protein, LRP)在细胞mRNA水平和蛋白水平上的表达.结果:1 ng/mL ST使KB/VCR细胞耐药性下降了158倍.亲本株KB/S细胞几乎不表达P-gp,而KB/VCR细胞却近100%强表达P-gp,P=0.004;ST使KB/VCR细胞的P-gp表达强度明显降低,但阳性率未见明显改变.MRP在两种细胞的基因转录水平和蛋白水平均呈现弱表达,ST也不影响其表达.1 ng/mL ST作用24 h后,KB/S和KB/VCR细胞的LRP在mRNA水平及蛋白水平上表达指数均明显地高出用药前,P=0.006.结论:ST可通过降低P-gp表达强度和药物外排功能来逆转肿瘤细胞的多药抗药性,但这种作用可部分地被LRP蛋白表达增强所抵消.

  • 大肠癌组织中MMP-3的表达及其临床意义

    作者:于秀文;程慧;王静芬

    目的:探讨基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)在大肠腺瘤及大肠癌组织中的表达及其与临床各病理参数之间的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测MMP-3在20例大肠腺瘤和60例大肠癌组织中的表达.结果:MMP-3在20例大肠腺瘤及60例大肠癌组织中,阳性表达率分别为10.0%(2/20)和41.7%(25/60),组间差异有统计学意义,P=0.031;在大肠腺癌组织中,MMP-3的阳性表达与淋巴结转移呈正相关,P=0.008,与患者5年生存率呈负相关,P=0.003.结论:MMP-3的上调表达可能参与了大肠癌的发生与发展,对临床上判断预后具有较大的意义.

  • 非小细胞肺癌组织中FHIT基因表达缺失与临床病理因素的相关性研究

    作者:李鹏;李道堂

    目的:研究FHIT基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达缺失及其与临床病理因素的关系.方法:用免疫组织化学检测46例非小细胞肺癌组织及正常的肺支气管黏膜组织12例石蜡标本中脆性组氨酸三联体基因(fragilehistidinetriad,FHIT)基因在各组织中的表达.结果:FHIT基因在NSCLC中的表达缺失率为76.1%,明显高于正常的肺支气管黏膜组织16.7%,差异有统计学意义,x2=14.548,P=0.000.FHIT基因的表达缺失率与NSCLC组织的分化程度(x2=4.271,P=0.039)、淋巴结转移(x2=9.176,P=0.002)及吸烟史(x2=12.026,P=0.001)密切相关.而与患者年龄(x2=1.155,P=0.283)、性别(x2=0.450,P=0.503)、肿瘤大体类型(x2=2.974,P=0.085)及病理类型(x2=0.726,P=0.394)无关.结论:FHIT基因的表达缺失可能是NSCLC发生的一种生物学标志,检测FHIT基因的表达缺失对判断NSCLC恶性程度、淋巴结转移趋势有重要价值.

  • 食管鳞癌组织垂体瘤转化基因表达及其临床意义的研究

    作者:杨福俊;张海霞;闫晓红;许进秀

    目的:探讨食管鳞癌组织中垂体瘤转化基因(PTTG)mRNA及其蛋白的表达?与肿瘤临床病理特征的关系.方法:采用RT-PCR技术检测30例食管鳞癌及相应的30例癌旁组织中PTTG mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测标本中PTTG蛋白的表达.结果:在食管鳞癌组织中PTTGmRNA的阳性表达率(93.3%)及平均表达水平(0.69±0.06)显著高于相应的癌旁正常组织(70.0%和0.32±0.06),两组比较差异有统计学意义,P<0.01.PTTG蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达(83.3%,25/30)明显高于在癌旁组织中的阳性表达(20.0%,6/30),P<0.01;并与淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关.结论:PTTG基因异常表达可对食管鳞癌的发生和发展起重要作用,可能为食管鳞癌的早期诊断和基因治疗提供新的靶点.

  • 溃疡性结肠炎结肠粘膜固有层淋巴细胞亚型的分布特征及其作用

    作者:李琪佳;徐敏;宫恩聪

    目的 探讨溃疡性结肠炎免疫学发病新观点。方法 应用抗T淋巴细胞(CD45RO)、抗B淋巴细胞(CD20)、抗T辅助淋巴细胞(OPD4)以及抗巨噬细胞(CD68)表面抗原的单克隆抗体,通过免疫组织化学技术,对50例溃疡性结肠炎患者结肠粘膜活检标本(32例活动期,18例非活动期)及5例对照组进行了淋巴细胞亚型分析。结果  T淋巴细胞及T辅助淋巴细胞的数量在溃疡性结肠炎活动期均高于非活动期及对照组(P<0.01),而固有层内B淋巴细胞的数量在3组之间无显著性差异(P>0.05);巨噬细胞的数量在活动期高于非活动期及对照组(P<0.01)。结论  T淋巴细胞尤其是T辅助淋巴细胞及巨噬细胞的活化与溃疡性结肠炎的活动密切相关,说明细胞免疫在溃疡性结肠炎免疫发病机制中占有相当的比重,参与溃疡性结肠炎活动期结肠粘膜的损伤,并已成为其免疫调节网络中重要的组成成分。

  • 顺铂对豚鼠耳蜗毛细胞损害的形态及机理研究

    作者:路虹;刘砚星;薛丽华;杨逸;刘辉;张喜琴

    目的观察顺铂对豚鼠耳蜗毛细胞的损害,并阐述一氧化氮(nitric oxide,NO)在其耳毒性机制中的作用.方法将20只豚鼠随机分成两组,试验组腹腔注射顺铂 0.5 ml,对照组给予同等量的生理盐水,5天后做听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测听,此后处死动物,取出耳蜗,应用免疫组化技术、光镜及扫描电镜观察耳蜗毛细胞的损害.结果试验组动物测试ABR听阈明显提高,光镜下见耳蜗毛细胞明显变性,诱导型一氧化氮合酶阳性染色,电镜下见毛细胞的纤毛散乱、倒伏甚至散失.结论顺铂对豚鼠耳蜗毛细胞有明确的损害作用,而NO在其耳毒性机制中发挥着重要作用.

  • 子宫腺肌症雌二醇表达的研究

    作者:杨永滨;张杰英;张祥宏;吴文新;严霞;王俊灵;王凤荣

    目的探讨雌激素在子宫腺肌症(adenomyosis,AM)发生过程中的作用.方法以免疫组织化学染色方法配对对比观察了AM原位和相应肌间异位子宫内膜、正常增殖期宫内膜和AM异位宫内膜雌二醇表达的情况.结果AM原位宫内膜和其相应肌间异位宫内膜雌二醇的阳性表达率分别为21.7%和43.5%.多数病例(12/23)原位和异位宫内膜雌二醇表达相同;在表达不同的11例中,8例为异位宫内膜呈阳性表达而原位宫内膜呈阴性表达,有3例为原位宫内膜呈阳性表达而异位宫内膜呈阴性表达.异位宫内膜雌二醇的表达略高于原位宫内膜,但无统计学意义(P>0.05).正常增殖期宫内膜和异位宫内膜雌二醇阳性表达率无明显差异(31.4%,40.0%).结论AM时子宫原位及肌间异位宫内膜及正常增殖期宫内膜中雌二醇的表达无明显差异(P>0.05).

  • 大肠癌组织p27及增殖细胞核抗原的表达及其意义

    作者:任鹏涛;王凤安;闫庆辉;宋伟庆;张苑

    目的研究p27、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在大肠癌组织中的表达,并探讨其生物学意义.方法利用免疫组织化学方法对50例大肠癌患者肿瘤组织和50例正常人大肠组织p27、PCNA表达进行检测.结果 p27和PCNA在癌组织及正常组织中的表达均有显著性差异(P<0.05),且p27、PCNA表达与大肠癌的分化程度、淋巴结转移和Dukes'分期显著有关.结论 p27表达与大肠癌的临床病理学特征密切相关,可能是预测大肠癌预后的重要指标之一;PCNA是反映细胞增殖活性的重要指标.

  • 4例食管癌肉瘤临床病理分析

    作者:何春年;李红民;翟金萍

    食管癌肉瘤比较少见,一般是鳞状细胞癌与不同类型的肉瘤共存,故称癌肉瘤.但食管癌肉瘤在命名与组织起源等方面,目前文献上意见还不统一,需要更多的资料报道、研究及探讨.本文4例结合文献进行分析和探讨,现报告如下.

  • 免疫组化染色中洗涤方法的点滴体会

    作者:朱振龙;张钰;张荣;陈永军;王玲巧

    免疫组化的实验操作过程相当复杂而费时,其中洗涤过程就是一个多次重复的繁杂程序,如按照文献中所介绍的免疫组化ABC法洗涤时间约需65 min左右,如果再加上胰酶消化后的洗涤时间,那么整个时间就更要延长.正因免疫组化染色如此费时,多年来人们一直在寻找一些既能缩短时间又不影响染色效果的洗涤方法.我们根据自己多年来的实际操作经验,摸索总结出了一套冲洗加浸洗的洗涤方法,该法既能缩短整个染色时间,同样也能获得满意的染色效果(图1、2).具体方法如下.

  • 电针对成年脑缺血大鼠缺血侧神经干细胞巢蛋白表达的影响

    作者:刘喆;赖新生

    目的:观察电针治疗对成年大鼠脑缺血后缺血侧神经干细胞特异性标记物巢蛋白表达的影响.方法:实验于2003-06/2004-03在广州中医药大学实验动物中心进行.取清洁级SD雄性大鼠72只,随机分为两组,即模型组(n=36)与电针组(n=36),均采用开颅热凝闭法制作大鼠局灶性脑缺血模型,按缺血时间3,7,14和21 d将模型组与电针组又各分为4组,即8个亚组(n=9).对电针组采用1寸毫针针刺大椎、百会,联接G6805-1型电针治疗仪,选择5~10 Hz频率的等幅疏密波,刺激强度以大鼠身体轻微颤动为宜,持续30 min.模型组大鼠只予以同等条件抓取,但不实施电针治疗处理.观察不同时相脑缺血情况,采用巢蛋白免疫组化法记录大鼠巢蛋白表达阳性细胞的数量,其数量增加表明神经干细胞的增殖.结果:①模型组脑缺血后不同时相(3,7,14和21 d)巢蛋白在缺血侧脑皮质、海马齿状回均有阳性表达细胞[(5.20±1.70,14.16±3.95,9.26±3.29,6.70±2.27),(13.58±2.33,20.34±2.73,13.12±2.25,8 64±1.56)],其中7 d的阳性细胞数量比其他时相明显增加,差异显著(P<0.05);②电针组在不同时相的巢蛋白阳性细胞数量均较同时相模型组有明显的增加(缺血侧脑皮质:11.50±3.39,26.40±4.65,18.16±3.03,12.66±2.57;海马齿状回:20.04±3.60,29.26±3.16,18.78±2.24,13.52±2.10),差异显著(P<0.05).结论:电针具有促进大鼠脑缺血后巢蛋白在缺血侧阳性表达保持在较高水平的作用.

  • 慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢的影响

    作者:李丹;杨文;范哲;孙波;李广生

    目的:探讨过量氟对大鼠心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响.方法:将Wistar大鼠随机分成5组(每组8只):常规食对照组、常规食加氟组(加氟100 mg·L-1)、低钙偏食对照组、低钙偏食加低量氟组(加氟50 mg·L-1)和低钙偏食加高量氟组(加氟100 mg·L-1).采用苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜观察以及免疫组织化学法检测氟中毒大鼠心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达.结果:图像分析显示苦味酸-天狼星红染色、偏振光显微镜下显示的Ⅰ型、Ⅲ型胶原面积百分比,各加氟组其Ⅰ型、Ⅲ型胶原均较其对照组稍有增高趋势,但差异无显著性(P>0.05).免疫组化观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达量0%~10%,各加氟组与其对照组相比差异亦无显著性(P>0.05).结论:慢性氟中毒对大鼠心肌胶原代谢无明显影响,心肌胶原可能不是氟化物作用的靶子.

  • 大鼠附睾9型水通道表达

    作者:杨柯;赵丹;杨宝学;王蔚东;赵雪俭;徐桂香

    目的:观察大鼠附睾9型水通道(aquaporin 9,AQP9)的表达.方法:取12周龄大鼠的附睾头部和尾部提取总RNA和总蛋白进行AQP9 Northern blotting分析和Western blotting分析.结果:12周龄大鼠附睾存在AQP9的表达,且附睾头部表达强于尾部.结论:12周龄大鼠附睾头部AQP9表达强于尾部,反映附睾不同部位对水的重吸收功能的差异.

  • 核心蛋白聚糖mRNA及其蛋白在结直肠癌中的表达

    作者:操海萍;舒振波;张桂珍

    目的:研究核心蛋白聚糖(DCN)mRNA及其蛋白在结直肠癌中的表达.方法:采用原位杂交及免疫组织化学方法检测DCN mRNA及其蛋白在30例结直肠癌及20例相对正常大肠组织中的表达.结果:30例结直肠癌患者,DCN mRNA表达阳性率为66.67%(20/30);20例相对正常大肠腺细胞中,DCN mRNA表达阳性率为85.00%(17/20),两者比较差异无显著性(P>0.05).在30例结直肠癌癌细胞及20例相对正常大肠腺细胞内未发现DCN蛋白表达.结论:DCN mRNA在结直肠癌癌细胞及相对正常大肠腺细胞中均有表达.

  • 改良手工免疫组化在病理诊断中的应用

    作者:成克伦

    目的 探讨改良手工操作免疫组织化学方法在病理诊断中的应用效果. 方法 应用即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒检测方法并加以适当改良,对常见肿瘤的常用抗体进行标记检测. 结果 抗原定位准确,背景清晰.假阳性、假阴性低,非特异性染色和掉片少. 结论 改良手工免疫组化染色效果良好,能满足常规病理诊断的需要,可以在中小型基层医院病理科推广应用,亦可用于样本量小的科研工作.

  • 食管鳞癌中PTEN和Ki-67蛋白的表达

    作者:李俐;卜晓东;樊克武

    目的:探讨食管鳞癌中PTEN和Ki-67蛋白表达情况及其临床意义.方法:采用SP免疫组织化学法对65例食管鳞癌标本进行了检测.结果:65例食管鳞癌中PTEN蛋白的阳性率为58.46%(38/65),高、中分化组与低分化组相比,有显著性差异(P<0.05).并且,食管鳞癌中PTEN与Ki-67蛋白表达之间存在显著的负相关关系(P<0.05).结论:PTEN基因的缺失或突变在食管鳞癌的发生发展中可能起重要作用,且与肿瘤恶性分化程度及细胞增殖情况密切相关.

  • 乳头隐匿性分泌液中CEA的检测在乳腺肿瘤鉴别诊断中的意义

    作者:杨峂;刘颖斌;李克强;俞吉霞;傅庆国;李旭军;和钢

    目的 分析检测乳头隐匿性分泌液中CEA的表达及其在乳腺肿瘤鉴别诊断中的意义.方法 对34例乳腺癌患者,26例乳腺良性疾病患者作乳头分泌液CEA检测;将硝酸纤维膜贴附于乳头上24小时,取下后低温保存,使用免疫组化方法对吸附于膜片上的CEA进行检测.结果 34例乳腺癌患者中12例膜片中出现CEA染色,而良性疾病患者26例中仅1例.两组差异有显著性(P<0.01).结论 硝酸纤维膜可吸附乳头分泌液中的微量抗原,对其中CEA的检测有可能作为一种乳腺良、恶性肿瘤鉴别诊断的辅助方法.

  • 血管内皮生长因子-C和环氧合酶-2表达与口腔鳞癌淋巴结转移的关系

    作者:冯振中;徐锦程;承泽农

    目的 研究环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及相关性,探讨其与肿瘤淋巴转移的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测60例OSCC、23例癌前病变19例良性病变中COX-2、VEGF-C,结合临床病理因素进行分析.结果 OSCC中VEGF-C和COX-2表达明显高于口腔癌前病变和良性病变(P<0.05).OSCC中VEGF-C蛋白表达与淋巴结转移有明显关系(P<0.01);COX-2表达与淋巴结转移、临床分期明显相关(P<0.05),而与患者年龄、性别、部位、组织学分级无关.VEGF-C和COX-2的表达呈正相关(r=0.519,P<0.01).结论 COX-2可能参与VEGF-C淋巴管生成通路,在OSCC淋巴结转移中发挥重要作用.

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