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反义寡核苷酸逆转卵巢癌细胞对拓扑替康耐药性的研究
背景与目的:研究表明乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)在卵巢癌拓扑替康(topotecan,TPT)耐药株A2780/TPT中存在高表达,它可能在卵巢癌耐药中起着重要的作用.本研究拟探讨BCRP反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)片段对A2780/TPT细胞耐药的逆转作用.方法:人工合成包含BCRP mRNA翻译起始位点的ASODN片段,并合成相应的正义寡核苷酸(sense oligonucleotide,SODN)片段作为对照.用脂质体Lipofect-2000将ASODN及SODN分别转染进A2780/TPT细胞,分别用RT-PCR法、流式细胞仪及MTT法检测A2780/TPT细胞经体外转染后,BCRP mRNA的表达、胞内罗丹明荧光强度及对TPT耐药指数的改变.结果:将ASODN/Lipofect-2000转染进A2780/TPT耐药细胞后,细胞内BCRP mRNA的表达较未转染细胞下降了59.42%(P＜0.05),胞内罗丹明荧光强度由转染前的5.42增加到16.63(P＜0.05),耐药指数由25降到5.而转染SODN/Lipofect-2000的A2780/TPT细胞中,上述指标无显著性变化.结论:转染ASODN/Lipofect-2000可部分逆转BCRP介导的卵巢癌细胞耐药.
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P－糖蛋白在大鼠癫痫持续状态表达的动态变化及其意义
目的：研究戊四氮诱导的大鼠癫痫持续状态模型（ status epilepticus ， SE ）中， P－糖蛋白（ P-glycoprotein ， P-gp ）在72 h 内表达的动态变化，为下一步抑制P-gp 的表达选定佳检测时间点。方法：用免疫组化、RT-qPCR 和 Western blot 检测建模后不同时点（0、3、6、12、24、48、72 h）海马组织中 P-gp 表达的变化情况。结果：免疫组化结果：海马组织中P-gp蛋白在SE 24 h组的平均光密度值为0．3251±0．0082，比对照组增加（P ＜0．05），SE 48 h 组的平均光密度值为0．3963±0．0168，显著高于对照组（P ＜0．01）；RT-qPCR 结果：MDR1a 基因在 SE 24 h 组比对照组增加（P＜0．05），SE 48 h 组显著高于对照组（P＜0．01）；Western blot 结果：P-gp 蛋白在 SE 48 h 组比对照组增加（P ＜0．05）。这些结果显示，SE 模型中海马组织内P-gp 表达在24 h 后开始升高，并在48 h 达高峰。结论：SE 后48 h P-gp 的表达达高峰，此时可能为减少SE后产生耐药的佳检测时间。
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耐药蛋白介导的鼻咽癌多药耐药机制及其逆转剂研究进展
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是中国南部及东南亚地区常见的恶性肿瘤之一.绝大多数鼻咽癌分化程度低,浸润生长快,容易发生癌细胞的早期远处转移和局部治疗的不彻底.
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AC-T序贯化疗方案对三阴性乳腺癌患者乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白表达的影响
目的 探究AC-T序贯化疗方案对三阴性乳腺癌患者乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2)、P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法 选取南通市妇幼保健院2012年3月至2013年3月收治的80例不可手术的分子分型为三阴性乳腺癌患者为观察对象,采用随机数字表法分成观察组(n=40)和对照组(n=40),观察组采用4个周期AC-T序贯化疗方案,对照组采用四个周期FAC化疗方案,两者化疗后均采用三维适形放射治疗,对两组化疗后的无病生存期(DFS)、总生存率(OS)及患者乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白表达情况进行比较.结果 化疗期间观察组和对照组均出现1例患者死亡.化疗后,观察组患者1年、3年的DFS分别为92.5％、82.5％,对照组为87.5％、77.5％;观察组OS为87.5％,对照组为85.0％,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).观察组和对照组患者化疗前BCSCs微球体数目分别为(2±1)个和(2±1)个、直径为(112.3±4.5)μm和(113.3±4.0)μm,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);化疗后,观察组和对照组BCSCs微球体直径均较化疗前显著增大,分别为(259.7±5.8)μm和(261.3±5.9)μm,组内比较差异有统计学意义(P<0.05);而BCSCs微球体数目分别为(2±1)个和(2±1)个,组内比较差异无统计学意义(P>0.05).化疗前,两组患者BCSCs微球细胞ABCG2、P-gp、CD44+、CD24-蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),化疗后两组患者ABCG2、P-gp、CD44+蛋白表达显著升高,CD24-蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且观察组ABCG2、P-gp、CD44+蛋白表达显著低于对照组,CD24-蛋白表达显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 AC-T序贯化疗方案进行新辅助化疗治疗乳腺癌与FAC方案疗效相当,但出现肿瘤耐药程度轻于FAC化疗方案.AC-T序贯化疗方案治疗乳腺癌确实会下调癌细胞ABCG2、P-gp表达,从而减轻患者的耐药性.
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RNA干扰survivin基因对K562细胞化疗敏感性的影响及机制
目的 应用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制survivin基因的表达,观察其对K562细胞化疗敏感性的影响,为临床白血病治疗提供理论依据.方法 实验分为RNA干扰组、脂质体对照组、空白对照组.转染48 h后用RT-PCR法,免疫组化法分别检测survivin在mRNA及蛋白水平的表达;MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的药物浓度;免疫组化法检测K562细胞中3种耐药相关蛋白P-gp、TOPO-2、GST-π的表达.结果 ①RNA干扰组K562细胞的survivin基因表达水平明显下降;②RNA干扰组K562细胞对阿霉素敏感性增高;③RNA干扰组K562细胞中阿霉素浓度增高;④RNA干扰组K562细胞耐药蛋白GST-π表达水平下降, 而P-gp,TOPO-2的表达与对照组比较无显著差异.结论 特异性siRNA能够有效抑制survivin基因的表达,并可能通过降低耐药蛋白GST-π的表达增加K562细胞对阿霉素的敏感性.
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一种新的肿瘤相关耐药蛋白--乳腺癌耐药蛋白
乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是1998年才发现的一种与多药耐药(MDR)相关的肿瘤耐药蛋白,它与P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)同属ABC转运蛋白超家族成员.本文就BCRP近两年的研究情况作一综述.
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肺耐药相关蛋白和卵巢恶性肿瘤
化学药物治疗是妇科恶性肿瘤治疗的主要方法，并起着越来越重要的作用，但各种化疗都面临着耐药问题。耐药发生的机制复杂，相关因素也较多，研究较多的有多药耐药基因-1(MDR 1基因)及P-糖蛋白(P170蛋白)。多药耐药蛋白基因(MRP基因)及多药耐药蛋白(MRP蛋白)，这两种蛋白同属膜转运蛋白超家族成员，具有药泵功能，能将化疗药物(蒽环类、生物碱、表鬼臼毒类)泵出肿瘤细胞外，从……
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ABCG4种V-ATPase在非小细胞肺癌中的表达及相关性临床意义
背景与目的 多药耐药是肺癌化疗治疗失败的重要原因.ABC介导药物外排是耐药的主要因素,寻找该家族中新的耐药蛋白并阐明其耐药机制十分重要.ABCG4有望成为耐药候选基因;耐药性与细胞内外pH值可能有关,而V-ATPase在调节pH值起主要作用.本研究通过检测ABCG4和V-ATPase在非小细胞肺癌中的表达,分析其与病理分级和TNM分期间的关系以及两蛋白表达的相关性,为研究ABCG4、V-ATPase在肿瘤表达及耐药相关性提供基础.方法 采用免疫组化EnVinsion法、免疫荧光法检测在肺鳞癌、腺癌中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位和共定位,用统计学分析表达差异性和相关性.结果 ABCG4在肺鳞癌、腺癌中高表达,两者差异性显著(P=0.001);鳞癌Ⅱ和Ⅱ-Ⅲ组间、腺癌不同分化组间差异性显著;鳞癌和腺癌TNM分期秩和检验差异性显著.V-ATPase在鳞癌、腺癌中也为高表达,两者差异性非常显著;鳞癌Ⅱ和Ⅱ-Ⅲ组间、腺癌不同分化组间差异性显著;在鳞癌和腺癌TNM分期秩和检验差异性均不显著.ABCG4和V-ATPase蛋自在鳞癌、腺癌、鳞癌Ⅱ和Ⅱ-Ⅲ、中分化腺癌各组中的表达相关性检验P<0.01.相关系数rs分别为0.771、0.765、0.714、0.777、0.865;而低分化腺癌组中的相关性检验p值为0.048,相关系数rs为0.350.ABCG4主要定位在胞膜上和胞质中,两蛋白有共定位现象.结论 ABCG4和V-ATPase在非小细胞肺癌中高表达.表达的高低与病理分级、TNM分期有关;两蛋白在鳞癌、腺癌及其分级间表达都存在相关性,可能存在相互作用的现象.这为研究ABCG4和V-ATPase在肿瘤中的表达及可能耐药作用提供了实验依据.
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ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达及临床意义
目的:检测耐药蛋白ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达,分析其表达率与病理分级和临床分期间的关系,为研究ABCG4在肿瘤表达及耐药相关性提供基础.方法:采用免疫组织化学EnVinsion法、免疫荧光法检测ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达和激光共聚焦显微镜观察其荧光定位.结果:ABCG4在肺鳞癌、腺癌中高表达,鳞癌总阳性率67.3%、腺癌总阳性率为81.4%,两者差异性显著(P=0.001);中分化、低分化鳞癌阳性率分别为41.7%、92.O%,差异性非常显著(P=0.000);腺癌中分化阳性率76.7%、低分化腺癌92.3%,差异性显著(P=0.033);鳞癌和腺癌的各临床分期的Kruskal-Wallis秩和检验差异性显著,P值分别为0.039、0.048.ABCG4主要定位在胞膜上和胞质中.结论:ABCG4在肺鳞癌、腺癌中高表达,表达的高低与病理分级、临床分期有关,为进一步研究ABCG4在肿瘤中的表达及可能耐药作用提供实验依据.
