首页 > 文献资料
-
POKemon、p14ARF基因链在大肠癌细胞系的表达及其临床意义
目的 研究POKemon、p14ARF基因在结直肠癌细胞系中的表达情况.方法 采用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫化学技术检测POKemon、p14ARF在5种人类结直肠癌细胞中的表达.结果 POKemon在SW480、SW480/M5、LOVO、SW620中阳性表达,在HCT116阴性表达;p14ARF在HCT116阳性表达,其余细胞均阴性表达.结论 结直肠癌细胞系中存在POKemon的表达,且与p14ARF作用呈负相关.
-
胶质瘤中p14ARF甲基化分析及其与p53表达的相关性研究
目的:探讨p14ARF甲基化与胶质瘤发生和预后的关系,及其与突变型p53 (mutant type p53,mtp53)蛋白表达的相关性.方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction, MSP)法检测33例胶质瘤和12例正常脑组织中p14ARF的甲基化状况.免疫组织化学法检测58例胶质瘤和12例正常脑组织中p14ARF和mtp53蛋白的表达.结果: 胶质瘤与正常脑组织中p14ARF甲基化率分别为39.4%(13/33)和0(0/12),2组间差异有统计学意义(P<0.01).低级别组胶质瘤甲基化率(6/15)与高级别组(7/18)间差异无统计学意义(P>0.05).p14ARF甲基化情况与患者预后无明显相关性.mtp53蛋白在胶质瘤和正常脑组织中的阳性率分别为56.9%(33/58)和8.3% (1/12),2组间比较,差异有统计学意义(P<0.01),其表达在肿瘤高级别组中明显高于低级别组(P<0.05).胶质瘤中mtp53蛋白表达与p14ARF甲基化呈负相关(P<0.05).结论:p14ARF甲基化与胶质瘤发生密切相关,为胶质瘤发生的早期事件,检测p14ARF甲基化情况可作为胶质瘤早期诊断的分子生物学指标.
-
P14ARF基因联合氟尿嘧啶对人结肠癌LOVO细胞的作用
目的观察p14ARF基因转染联合氟尿嘧啶对人结肠癌LOVO细胞的作用.方法采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后LOVO细胞中p14ARF基因的表达.四唑蓝比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比在不同浓度的氟尿嘧啶作用下转染前后LOVO细胞的增殖情况.结果LOVO细胞呈现p14ARF基因缺失变异.RT-PCR和Western blot法证实转染后LOVO细胞中有p14ARF基因的表达.p14ARF基因转染后细胞增殖受抑,流式细胞仪显示p14ARF基因诱发凋亡.在氟尿嘧啶0.1 g/mL的作用下,未转染的LOVO细胞的增殖速度未受影响,而转染后LOVO细胞较未用药时的抑制率增加;氟尿嘧啶1、10、100 μg/mL时,对转染前后LOVO细胞均有增殖抑制作用,且呈剂量相关性.氟尿嘧啶对转染后LOVO细胞的抑制率明显高于未转染的LOVO细胞.结论p14ARF基因转染可抑制LOVO细胞增殖.p14ARF基因和氟尿嘧啶联合用于LOVO细胞能够加强氟尿嘧啶的增殖抑制作用,明显提高LOVO细胞对氟尿嘧啶的敏感性.
-
银屑病角质形成细胞p14ARF基因甲基化的研究
目的:检测银屑病皮损角质形成细胞p14ARF基因启动子区甲基化,探讨其与银屑病发病的关系.方法:利用甲基化特异性PCR技术检测37例银屑病及35例正常人角质形成细胞p14ARF基因启动子区甲基化状态.结果:37例银屑病皮损角质形成细胞p14ARF基因启动子区甲基化阳性率为43.2%(16/37),显著高于正常对照(χ2=13.5,P＜0.05).结论:p14ARF基因启动子区甲基化与银屑病角质形成细胞过度增殖具有一定的关系.
-
非小细胞肺癌中p14ARF基因的表达及意义
①目的检测p14ARF基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达情况,并探讨其在NSCLC发生、发展过程中的作用.②方法应用蛋白印迹方法检测了28例NSCLC组织标本p14ARF蛋白的表达水平.③结果肺鳞癌和肺腺癌中p14ARF蛋白阳性率分别为61.5%和80.0%,与癌旁正常组织(100%)比较差异有显著性(χ2=12.27、6.02,P<0.05);p14ARF表达异常与肿瘤分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移情况无显著相关性;p14ARF蛋白在Ⅰ期病例中强阳性占阳性比例为62.5%,在Ⅲ期病例中强阳性占阳性比例为16.0%.④结论 p14ARF基因在NSCLC发生、发展过程中起重要作用,特别在肿瘤早期可能起更为重要的作用.
-
幽门螺旋杆菌和 p14ARF 在蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中的表达变化及意义
目的：探讨幽门螺旋杆菌（Hp）和抑癌基因 p14ARF在蒙古族、汉族胃癌患者癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达变化及意义。方法采用免疫组化 SP 法、改良的 Warthin-Starry（W-S）银染色法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测 Hp 和 p14ARF在27例蒙古族胃癌患者和30例汉族胃癌患者癌组织、癌旁组织和正常组织中蛋白和 mRNA 表达。Spearman 相关性分析汉族、蒙古族胃癌患者癌组织中 Hp 与 p14ARF 表达的关系。结果p14ARF在蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中的表达低于癌旁组织和正常组织，差异有统计学意义（P 均＜0．05），癌旁组织低于正常组织，差异有统计学意义（P ＜0．05），p14ARF 在蒙古族、汉族人群各组织中的表达差异无统计学意义（P 均＞0．05）。蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中 Hp 阳性率较高，两民族感染率比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。汉族胃癌患者 p14ARF mRNA 相对表达量在癌、癌旁、正常组织中两两比较差异均有统计学意义（P 均＜0．05）。蒙古族胃癌患者 p14ARF mRNA 相对表达量在癌、癌旁、正常组织中两两比较差异均有统计学意义（P 均＜0．05）。蒙古族、汉族胃癌患者 p14ARF mRNA 相对表达量在癌、癌旁和正常组织中差异无统计学意义（P 均＞0．05）。Spearman 相关性分析显示，汉族、蒙古族胃癌患者癌组织中 Hp 与 p14ARF 阳性表达呈负相关（r 分别为－0．406、－0．433，P 均＜0．05）。结论蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中 p14ARF均呈低表达，Hp 阳性率均较高，Hp阳性与 p14ARF表达呈负相关关系；Hp 与 p14ARF在蒙古族、汉族胃癌中的发病机制可能相同，二者可能共同促进胃癌的发生。
-
姜黄素对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞的去甲基化作用研究
目的 观察姜黄素作用于皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞后E-cadherin和p14ARF基因甲基化状态及基因表达的改变情况,为姜黄素的临床应用提供理论依据.方法 用不同浓度(10μmol/L、20 μ mol/L、40 μmol/L)的姜黄素处理皮肤鳞癌细胞株SCL-1,MTT法检测细胞增殖情况,甲基化特异性PCR(MSP)法检测E-cadherin和p14ARF基因甲基化状态的改变,RT-PCR法检测E-cadherin和p14ARF基因的表达情况.结果 姜黄素可抑制SCL-1细胞的增殖,且呈现时间-剂量依懒性;当姜黄素浓度增至40 μmol/L时,SCL-1细胞的E-cadherin和p14ARF基因甲基化减弱、表达增强.结论 姜黄素可明显抑制SCL-1细胞增殖,适当浓度的姜黄素对SCL-1细胞的E-cadherin和p14ARF基因有一定的去甲基化作用,并可以调控E-cadherin和p14ARF基因的表达.
关键词： 姜黄素 DNA甲基化 SCL-1细胞 E-cadherin基因 p14ARF基因 -
应用5-氮杂胞苷对甲状腺乳头状癌细胞株P14ARF基因启动子区去甲基化干预的研究
目的 观察5-氮杂胞苷对PTC细胞株P14ARF基因甲基化状态的影响.方法 用不同浓度梯度的5-氮杂胞苷培养PTC细胞株;分别采用实时定量PCR、Western-bloting检测不同浓度5-氮杂胞苷处理甲状腺乳头状癌细胞株后P14ARFmRNA及其蛋白的表达情况;采用甲基化特异性PCR检测不同浓度5-氮杂胞苷处理PTC细胞株后P14ARF基因的甲基化情况;采用CCK8法检测5-氮杂胞苷处理后的PTC细胞株的增殖情况.结果 实时定量PCR检测随着5-氮杂胞苷浓度增加及处理时间的延长,PTC细胞株P14ARFmRNA表达水平逐步上调(P＜0.05);P14ARF蛋白的表达升高(P＜0.05);甲基化特异性PCR检测经5-氮杂胞苷处理后的PTC细胞株中P14ARF基因的甲基化情况下降,出现去甲基化(P＜0.05);采用CCK8法检测经5-氮杂胞苷处理后的PT℃细胞株增殖速度减慢(P＜0.05).结论 P14ARF在PTC是存在甲基化的,5-氮杂胞苷可以逆转P14ARF的甲基化状态,抑制PTC细胞株的增殖,发挥抗肿瘤作用,为临床靶向治疗甲状腺乳头状癌提供分子生物学的依据.
-
p14ARF和p27KIP1基因甲基化与鼻咽癌的临床相关性研究
目的 探讨鼻咽癌组织中p14ARF和p27KIP1基因启动子区甲基化状态在鼻咽癌早期分子诊断和治疗中的作用.方法 应用甲基化特异性PCR方法对65例鼻咽癌组织(鼻咽癌组)和30例正常鼻咽上皮组织(对照组)中的p14ARF和p27 KIP1基因启动子区甲基化状态进行检测.结果 鼻咽癌组中p14ARF和p27KIP1基因启动子区甲基化阳性率分别为18.5％(12/65)和61.5％ (40/65),两者总检出率为67.7％ (44/65)；而对照组中均未检测到p14ARF和p27KIP1基因启动子区甲基化；鼻咽癌组中p14ARF和p27KIP1基因启动子区甲基化与其临床分期和病理特征均无明显相关性(P＞0.05).同时,p14ARF基因甲基化和p27 KIP1基因甲基化无明显相关性(r =0.05,P＞0.05).结论 p14ARF和p27KIP1基因甲基化可能是鼻咽癌早期分子事件,可作为鼻咽癌发生的早期诊断指标及甲基化基因治疗的靶点.
-
p14ARF基因在肺癌中的表达及意义
目的:探讨p14ARF基因在肺癌中的表达及意义.方法:采用免疫组化S-P法,检测60例肺癌及20例正常肺组织中p14ARF蛋白的表达情况.结果:p14ARF在肺癌组织中的阳性率为43.3%,显著低于正常肺组织的95%,两组间差异有显著性(P<0.05);p14ARF与肺癌患者的性别、年龄、组织学类型、分化程度及淋巴结转移等无相关性(P>0.05).结论:p14ARF的表达缺失在肺癌的发生发展中起重要作用,可作为肺癌基因诊断和治疗的靶点.
