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胶质瘤的DNA甲基化研究新进展
DNA甲基化主要指DNA的5'-胞嘧啶甲基化,是真核生物DNA的一种常见的修饰方式,也是一种重要的表遗传学机制.近年来,DNA甲基化与胶质瘤相关性研究表明,许多肿瘤相关基因启动子区域CpG岛高甲基化与胶质瘤的形成关系密切.
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一种快速检测CpG胞嘧啶甲基化的方法
脊椎动物基因5'端的CpG岛甲基化状态能够调控基因的转录,几乎所有的看家基因和近一半的组织特异性表达基因的表达受CpG岛甲基化调控.在正常生理条件下,大部分CpG岛处于非甲基化状态.DNA修复基因、肿瘤抑制基因都是看家基因,在肿瘤组织中其CpG岛常常处于异常甲基化状态,导致基因转录失活.肿瘤抑制基因的异常甲基化成为继基因结构变异之外的又一种重要基因失活方式.
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用变性高效液相色谱检测CpG岛胞嘧啶甲基化
目的:建立一种新型的CpG岛胞嘧啶甲基化快速检测方法。方法:用亚硫酸氢钠处理DNA,再用链特异性聚合酶链式反应(PCR)对错配修复基因hMLH1启动子含CpG位点的靶序列进行扩增;利用变性高效液相色谱(DHPLC)在部分变性温度下测定靶序列的保留时间,并与亚硫酸氢钠-酶切法测定结果进行比较。结果:用DHPLC对结肠癌细胞株RKO和胃癌细胞株PACM82的hMLH1启动子进行测定,发现RKO细胞PCR产物的保留时间明显长于PACM82细胞(6.7 min比6.2 min)。RKO细胞PCR产物保留时间延长是亚硫酸氢钠处理后的模板中胞嘧啶和岛嘌呤含量较PACM82高所致。从此结果分析,可以判断出RKO的hMLH1启动子已甲基化,而PACM82细胞未甲基化。此结论与酶切法结果完全一致。结论:新方法可以快速检测CpG岛胞嘧啶甲基化。
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结直肠癌DNA甲基化研究的现状
DNA胞嘧啶甲基化的改变包括基因组DNA低甲基化和基因启动子区域CpG岛过甲基化.我们曾经对肿瘤DNA甲基化作过较详细的综述[1].结直肠癌的DNA甲基化研究较深入,进展较快.现对近年来结直肠癌DNA甲基化的一些研究现状作一简介.