首页 > 文献资料
-
CDX2基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的研究进展
目的:观察分析CDX2基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的状态。方法选取该院在2011年3月—2015年7月期间收治的450例结直肠锯齿状病变患者(136例TSA,122例SSA/P,192例HP),并选取82例正常组织作为对照组,采用METHYLIGHT方法分析结直肠锯齿轮病变中CDX2基因甲基化状态,并采用免疫分析法分析CDX2基因的表达情况,收集相关的临床资料,分析CDX2基因甲基化状态在结直肠锯齿状病变中的状态和相关因素情况。结果正常对照组CDX2基因甲基化率53.38%(44/84),SSA/P组75.41%(92/122),HP组72.97%(140/192),TSA组80.88%(110/136);HP组与正常对照组相比,差异有统计学意义(P=0.009);TSA组与与正常对照组相比,差异有统计学意义(P=0.005);SSA/P组与正常对照组相比,差异有统计学意义(P=0.002)。结论结直肠锯齿状病变中CDX2基因启动子CpG岛中上游区域基化程度高,蛋白表达阳性率高,两者相关性不强,极少部分甲基化状态有可能有诱导CDX2蛋白表达下调的作用。
-
粪便DNA甲基化分析对结直肠癌早期诊断的意义
目的 探讨人粪便中分泌武警战型卷曲相关蛋白 2(SFRP2)基因甲基化分析用于结直肠癌(CRC)早期诊断的可行性.方法 从30例结直肠癌人及30例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异件PCR(MSP)技术分析其SFRP2基因甲基化状态.结合临床病理对照,用统计学方法计算该检测的敏感度,特异性.确证粪便SFRP2基因甲基化分析可望成为CRC早期无创诊断或CRC高风险人群筛查的新途径.
-
卵巢癌ES-2、SK-OV3和JHOS-3细胞系TSLC1基因启动子区甲基化状态与表达
TSLC1(tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)属肿瘤抑制基因,研究发现,恶性肿瘤中存在TSLC1基因表达降低或缺失,并且与肿瘤侵袭转移密切相关[1];并且TSLC1基因表达缺失多与启动子甲基化状态相关[2].卵巢癌是女性常见生殖系统肿瘤,较早发生侵袭和转移,严重威胁妇女的健康.本研究旨在探讨TSLC1基因在卵巢癌细胞系中CPG位点的甲基化状态及该基因的表达情况,为寻找卵巢癌基因治疗的靶点提供理论依据.
-
乳腺癌发生模型MCF10 抑癌基因NOEY2启动子区甲基化及mRNA表达
DNA甲基化是常见的表观遗传学变化[1].越来越多的证据表明,抑癌基因启动子区CpG岛甲基化可使其转录沉默,从而解除其抑癌作用,导致肿瘤的发生和发展.NOEY2是近年来发现的抑癌基因,表达于正常乳腺导管上皮细胞和卵巢生发上皮细胞,但在乳腺癌和卵巢癌细胞中表达显著减少或不表达[2, 3].在本实验中检测乳腺癌发生模型MCF10[4]中不同阶段的细胞系NOEY2基因启动子区CpG岛Ⅰ甲基化状态,并与mRNA表达水平进行比较,以研究乳腺癌的发生机制和早期诊断.
-
DNA甲基化测定法引物的网上设计
人类基因组计划完成之后,人类基因组外遗传计划正式启动.DNA甲基化是其中一个为人熟知的基因外遗传信号.研究发现,DNA甲基化与大多数肿瘤的发生有关.在肿瘤发生的早期已发现许多基因启动子的甲基化状态发生改变.因此,DNA甲基化测定有可能成为一个新的肿瘤分子标志物.因而,建立一种快速、准确的检测DNA甲基化的方法非常必要.
-
胰癌组织p15、p16抑癌基因CpG岛甲基化
目的:检测胰腺癌中p15、p16基因CpG岛的异常甲基化情况,分析其与胰腺癌发生、发展的关系;探索其在临床早期基因诊断和治疗中的意义以及与胰腺癌病理生理特征的相关性.方法:运用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP),对29例胰腺癌和3例慢性胰腺炎的石蜡组织、2例正常肝组织、以及12例正常成人外周血白细胞DNA的p15、p16抑癌基因启动子区CpG岛甲基化状态进行了检测.结果:对照组p16、p15基因CpG岛甲基化扩增均呈阴性,非甲基化扩增均阳性.胰腺癌中p16、p15基因CpG岛甲基化阳性率分别为37.9%和27.5%,p16、p15基因CpG岛甲基化总检出阳性率为:44.8%.癌组织中同时存在p16、p15基因CpG岛异常甲基化为6例.结论:胰腺癌p15、p16基因CpG岛甲基化是早期事件,可试作为早期基因诊断的分子标志,有可能尝试进行基因治疗.p16、p15基因CpG岛异常甲基化,同患者的病理特征无明显的相关关系.
-
胃癌DNA甲基化谱研究进展
肿瘤的发生与多基因的异常有关,其中,DNA甲基化作为基因表达调控的一种方式,其甲基化状态的改变与基因的异常表达相关.胃癌的发生亦系多因素、多阶段、多基因异常累积的过程.本文就与胃癌有关的肿瘤抑制基因(p14ARF、pi6INK4a、APC、pS2、p15INK4b和RASSF1等)、DNA修复基因(MGMT和hMLHl)和其他与肿瘤转移和侵袭有关的基因(CDHl和TIMP-3)的CpG岛甲基化情况作一综述,说明了胃癌的发生与DNA甲基化的关系,揭示了胃癌的形成与DNA甲基化有一定的关系,探讨利用基因甲基化的检测作为胃癌早期诊断的生物学标记的可能性.
-
hMSH2在胃癌组织中的表达及其与DNA甲基化之间的关系
目的:分析胃癌组织中DNA甲基化酶Dnmtl和hMSH2表达情况的相关性及与肿瘤生物学行为之间的关系.方法:以real-time RT PCR法检测28例胃癌组织中Dnmtl和hMSH2 mRNA的表达,亚硫酸氢钠变性后测序分析hMSH2启动子区甲基化状态.结果:在28例胃癌组织中有9例(32%)DNMT1 mRNA的高表达,10例hMSH2(35.7%)的低表达,在hMSH2低表达的胃癌组织中有2例存在DNA启动子区的高甲基化.两个基因mRNA的表达与胃癌生物学行为包括肿瘤大小、淋巴结转移、组织学类型均无明显相关性.结论:胃癌组织中存在Dnmtl的高表达,DNA甲基化在一定程度上参与了hMSH2基因表达的缺失.
-
大肠癌组织微卫星不稳与hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化状态
目的:探讨大肠癌组织微卫星DNA不稳与hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化状态的关系.方法:采用PCR为基础的方法检测微卫星DNA不稳;采用甲基化特异性PCR方法检测hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态.结果:正常大肠黏膜未见hMLH1和hMSH2基因启动子区的高甲基化.76例大肠癌中检出hMLH1高甲基化8例,占10.5%,而且均为去甲基化和高甲基化并存,未见有hMSH2高甲基化者.检出MSI 20例,检出率为26.3%.将MSI分为高频率MSI(MSI-H,≥2个位点)10例、低频率MSI(MSI-L),仅为1个位点10例和MSI阴性(MSS)56例三组,结果右侧大肠癌hMLH1高甲基化检出率(23.1%)显著高于左侧大肠癌(4.0%,P<0.05).MSI-H组hMLH1高甲基化的检出率(8/10)显著高于MSI-L(2/10)和MSS组(6/56,P<0.01-0.001).结论:hMLH1高甲基化与右侧大肠癌的发生有关,可能参与了MSI病理途径,而hMSH2甲基化状态可能与MSI途径无关.
-
肺癌组织中DNA错配修复基因hMLH1及hMSH2启动子区异常甲基化的研究
DNA错配修复基因hMLH1及hMSH2启动子区(cpG岛)异常甲基化可导致抑癌基因失活,促进肿瘤发生[1].本研究中检测肺癌组织中hMLH1及hMSH2 CpG岛异常甲基化状态并分析特异性甲基化酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肺癌A549和PG细胞中hMLH1及hMSH2 mRNA表达的影响,探讨肺癌的发生机制,寻找新的治疗方法.
-
结直肠癌中微卫星不稳定检测的临床意义
微卫不稳定(microsatellite instbility ,MSI)又称复制错误( replication error ,RER),其意义是肿瘤细胞与同一个体的正常组织细胞DNA相比,肿瘤细胞的基因组DNA中单个、二个、三个或四个核苷酸组成的重复序列长度发生了改变[1-2]。初的研究认为, MSI 是遗传性非息肉病性结直肠癌( hereditary nonpolyposis colorectal cancer ,HNPCC )特征性的分子变化,与人类错配修复基因(mismatch repair,MMR)的种系突变有关。而后续研究发现一小部分的散发性大肠癌也存在着MSI现象,但这种MSI大都与hMLH1基因的启动子区高甲基化状态有关。
-
半巢式MSP在急性白血病患者p15基因甲基化检测中的应用
传统的观点认为,基因的缺失和突变是基因失活的主要方式,近研究显示,基因异常甲基化所导致的基因沉默亦是基因失活的方式之一.在多种恶性血液病中,p15基因发生异常的主要途径是基因异常甲基化和缺失.目前国内文献上p15基因甲基化的检测方法主要集中在甲基化敏感限制性酶切和Herman等[1]总结的甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法.我们通过优化MSP方法,设计了p15基因的半巢式-MSP(Hn-MSP)引物对85例急性白血病(AL)患者进行了p15甲基化状态的检测.
-
真性红细胞增多症患者WT1基因甲基化状态的初步研究
真性红细胞增多症(PV)是一种克隆性干细胞疾病,以全血容量增多,血液黏稠度增高及脾肿大为主要表现.而再生障碍性贫血(AA)系多种病因引起的造血功能衰竭,以全血细胞减少为主要表现的一组综合征.两种红细胞疾病一种是红细胞增多,一种为红细胞减少,其表观遗传学是否有联系值得研究.在红细胞疾病的研究中,国外有学者报道[1],阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者WT1基因的mRNA表达增加且明显高于AA患者,并且WT1基因的mRNA表达与PNH单核细胞表面的CD16b缺失率呈正相关,推测WT1基因产物的表达增多可能与PNH的克隆扩增机制有关.
-
胆管癌TMS1/ASC基因甲基化及其临床意义
肿瘤发生是多基因协同作用、多因素共同参与、综合发展的结果.研究发现肿瘤抑制基因失活与其启动子区域表遗传性改变即CpG岛甲基化状态直接关联;因此CpG岛甲基化在肿瘤发生、发展过程中发挥着关键作用.
-
膀胱癌DBCCR1、p16、p15、p14基因甲基化检测的意义
膀胱肿瘤患者9号染色体改变占60%以上,该染色体上分布着候选抑癌基因DBCCR1和抑癌基因p16、p15、p14.我们对4种基因5'CpG岛甲基化状态进行了研究,现报告如下.
-
胰腺癌中微卫星不稳定性与错配修复基因表达的相关性研究
本研究检测35例胰腺癌标本中的5个微卫星位点,用单链构象多态性(SSCP)法对标本进行微卫星不稳定(MSI)分析,进一步检测胰腺癌及正常胰腺组织中hMSH2和hMLH1的蛋白表达及启动子CpG岛甲基化状态,分析MSI与胰腺癌错配修复基因表达之间的联系,探讨MSI致癌的可能机制.
-
血清DNA定量及基因甲基化状态检测在卵巢上皮性癌诊断中的应用
卵巢恶性肿瘤是病死率高的女性生殖系统肿瘤,其中90%为卵巢上皮性癌(卵巢癌),而70%的患者诊断时已达Ⅲ期或Ⅳ期,5年生存率仅为15%~20%[1].因此发现新的既敏感又特异的肿瘤标志物,对卵巢癌的早期诊断、提高生存率具有重要意义.近年的研究发现,作为表观遗传的主要方式之一,DNA异常甲基化是肿瘤发生的早期事件,可早于基因及其表达产物的改变[2].而且,肿瘤患者血清DNA含量明显升高,虽然其来源尚未十分明确,但其具有与肿瘤DNA类似的遗传学和表观遗传学改变[3].因此,血清DNA的异常甲基化用于肿瘤的早期诊断具有明显的优势和极大的潜力.本研究通过定量检测卵巢癌患者血清DNA含量,以及基因EGFLAM、CDKN2A和LSM2的启动子区胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤二核苷酸岛(CpG island,CGI)甲基化状态,探索新的可用于辅助卵巢癌早期诊断的血清DNA甲基化标志物.
-
p15、p16和HIC-1基因启动子区甲基化在葡萄胎发生及恶变中的作用
葡萄胎是由于胎盘绒毛滋养细胞过度增殖而形成的一种病理变化,易发牛恶变而形成侵蚀性葡萄胎或绒毛膜癌,后两者属于妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic neoplasm,GTN).葡萄胎在我国发病率较高,其恶变机制尚不清楚.p15、p16基因是细胞周期的负性调节因子,可抑制细胞增殖,呈现抑癌基因的作用;HIC-1基因是重要的生长调节基因,其缺失或失活与多种肿瘤的发生有密切关系[1].目前,国内外关于葡萄胎中p15、p16和HIC-1基因启动子区甲基化状态的研究报道较少.
-
急性髓性白血病p15INK4B基因表达和基因甲基化状态的研究
p15INK4B(p15)基因被认为是一个重要的肿瘤抑制基因,对细胞周期起负调控作用[1].p15基因的启动区中有一CpG岛,许多血液系统恶性病变表现为CpG岛异常的高甲基化状态[2].虽然有关急性白血病p15基因启动区中CpG岛甲基化异常已有不少的研究报道,但主要见于成人,CpG岛异常甲基化与该基因表达水平的关系研究则较少见.本研究同时检测儿童急性髓性白血病(acute myeloid leukemia, AML)p15基因表达水平和甲基化状态,以探讨两者之间的相互关系以及在急性白血病发病中的作用.
-
DNA甲基化与大肠癌发生的研究进展
DNA甲基化由于影响基因突变、基因表达调控、基因组稳定性等方面,因此在肿瘤的发生和演进过程中扮演着一定的角色.近来,DNA甲基化机制及其与大肠癌发生关系的研究进展很快,现对近3年这方面的进展作一简要介绍.1 DNA甲基化的概念DNA甲基化主要指在胞嘧啶的5位碳上加上一个甲基基团,该反应由S-腺苷蛋氨酸(SAM)提供甲基,由DNA甲基转移酶(DMT)催化,形成5甲基胞嘧啶(5 mC).5 mC是真核细胞中唯一天然存在的修饰碱基,约占整个胞嘧啶的3%,而90%的5 mC存在于CpG序列中.哺乳动物DNA中50%~90%的CpG序列中C呈甲基化状态,即有5mCpG.当DNA分子每1 0 0 Kb中有0.5 Kb~5 Kb的5 mCpG序列时,称为5 mCpG岛,其余散在分布的5 mCpG称为甲基化CpG位点[1].