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黄芪百合颗粒对高原低氧模型小鼠肠黏膜屏障的保护作用
目的 观察黄芪百合颗粒对高原低氧环境下小鼠肠黏膜及肠道菌群稳态的保护作用.方法 使用高压氧舱建立高原低氧模型小鼠.60只昆明小鼠随机分为空白组、模型组及黄芪百合颗粒制剂低、中、高剂量[1.75、3.5、7g/(kg.d)]组.常规饲养3d后灌胃给药,空白组、模型组给予等量双蒸水,1次/d,连续17d.除空白组外,第15天起各组小鼠每日灌胃30min后于低压氧舱中模拟高海拔环境进行低氧暴露,连续3d.第18天出舱后取小鼠新鲜粪便抹片观察菌群的变化,HE染色观察肠组织的病理形态学改变,免疫组化法检测肠组织中缺氧诱导因子lα(HIF-lα)蛋白的表达变化.结果 模型组小鼠肠道球菌及革兰阴性菌百分比(分别为65.2％±2.4％、56.7％±3.3％)明显高于空白组(分别为24.7％±1.2％、23.2％±1.5％,P＜0.05),小肠和结肠肠黏膜坏死水肿病理评分(分别为3.10±0.99、3.30±0.67)及炎性细胞计数(分别为15.93±3.30、16.40±3.97/HP)明显高于空白组(分别为0.70±0.67、0.80±0.78、4.07±2.12、4.28±2.16/HP,P＜0.05),肠组织HIF-lα表达水平明显高于空白组(P＜0.05).与模型组相比,黄芪百合颗粒中、高剂量组肠道球菌百分比(分别为46.7％±2.0％、32.0％±2.6％)及革兰阴性菌百分比(分别为34.2％±1.6％、28.0％±2.8％)明显下降(P＜0.05),小肠和结肠肠黏膜坏死水肿病理评分(小肠分别为2.30±1.33、2.10±0.94,结肠分别为2.50±1.08、1.90±0.99)明显降低(p＜0.05),炎性细胞计数(小肠分别为13.26±2.34、10.93±3.67/HP,结肠分别为14.40±2.02、11.33±2.96/HP)明显降低(P＜0.05),肠组织HIF-1α的表达水平明显增高(P＜0.0l).结论 黄芪百合颗粒制剂对高原低氧环境下小鼠肠道微生态及肠黏膜屏障具有一定保护作用.
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黄芪百合颗粒对高原低氧模型小鼠脑氧化应激损伤的影响
目的 探讨黄芪百合颗粒对高原低氧模型小鼠脑组织氧化应激损伤的影响.方法 将60只SPF级昆明小鼠随机分为对照组、模型组、黄芪百合颗粒低、中、高(1.75、3.5、7 mg ·kg-1)剂量组.常规饲养3d后,灌胃给药,每日1次,连续17 d.从第14日起每日灌胃30 min后除对照组外其余各组小鼠于低氧舱中模拟高海拔低压低氧环境进行暴露,持续暴露3d,眼球采血后处死小鼠.采用比色分析法测定脑组织中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量及总抗氧化能力,HE染色在显微镜下观察脑组织的形态变化进行病理评分并计数炎细胞数量.结果 与对照组比较,模型组小鼠脑质量明显增加,超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力明显降低,脑丙二醛含量、脑组织病理评分和炎细胞数量均明显增加(P＜0.01).与模型组比较,黄芪百合颗粒中、高剂量组小鼠的脑组织超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力均升高,丙二醛含量、病理评分及炎细胞数均降低(P ＜0.05或P＜0.01).结论 黄芪百合颗粒对高原低压低氧环境下小鼠脑损伤具有良好保护作用,可能是通过增强脑组织自由基清除能力实现的.
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黄芪百合颗粒对常压缺氧小鼠脑组织的保护作用
目的 探讨黄芪百合颗粒对常压缺氧损伤小鼠脑组织的保护作用及其初步机制.方法 将70只昆明种雄性小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、黄芪百合颗粒低、中、高[1.75、3.50、7.00 g·(kg·d-1]]剂量组.常规饲养3d后灌胃给药,每日1次,连续30 d.进行小鼠常压耐缺氧实验,检测小鼠缺氧存活时间,采用比色分析法测定脑组织中超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及过氧化氢酶(CAT)水平,HE染色观察各组小鼠脑组织的病理形态学变化.结果 与空白对照组比较,阳性对照组及黄芪百合颗粒组小鼠缺氧存活时间明显延长,脑组织中T-SOD、GSH、GSH-PX及CAT水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01),各组小鼠脑组织病理形态学未见明显改变.结论 黄芪百合颗粒对常压缺氧损伤小鼠的脑组织具有良好保护作用,这与体内抗氧化酶系的作用有直接关系.
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基于G1-熵权法和正交设计优选黄芪百合颗粒的提取纯化工艺
目的 基于G1-熵权法和正交设计优选黄芪百合颗粒的提取纯化工艺,为其工业化生产提供参考.方法 采用基于G1-熵权法的主客观组合赋权法和L9(34)正交设计,以提取次数、提取时间和加水量为考察因素,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、粗多糖、醇浸出物提取量及出膏率为评价指标,优选黄芪百合颗粒的佳水提工艺;以多通道管状陶瓷超滤膜的膜孔径、操作压强和滤过温度为考察因素,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、粗多糖、醇浸出物保留率及除杂率为评价指标,优选其佳超滤纯化工艺.结果 黄芪百合颗粒的佳水提工艺为用总量20倍的水加热回流提取2次,每次提取75 min;佳超滤工艺为膜孔径50 nm,操作压强0.10 MPa,滤过温度45℃.在此条件下,3批验证试验数据组间均无明显差异.结论 优选的提取、纯化工艺稳定可行,可为黄芪百合颗粒的工业化生产提供实验依据.
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基于Box-Behnken响应面法结合G1-熵权法的黄芪百合颗粒浸膏减压干燥工艺研究
目的 优化黄芪百合颗粒浸膏的减压干燥工艺,并对浸膏粉进行质量评价.方法 以干燥温度、真空度和物料厚度为自变量,以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、粗多糖和醇浸出物含量与干燥速率的综合评分为响应值,采用Box-Behnken设计-响应面法结合G1-熵权法优化黄芪百合颗粒浸膏的减压干燥工艺,并比较浸膏干燥前后的化学指纹谱相似度.以相对均齐度指数、松密度、振实密度、颗粒间孔隙率、压缩度、Hausner比、休止角、含水量和吸湿率9个物理指标对浸膏粉粉体学性质进行综合表征,建立相应的物理指纹谱,评价不同批次浸膏粉的质量一致性.结果 浸膏减压干燥的佳工艺条件为干燥温度68℃,真空度0.07 MPa,物料厚度6mm.在此条件下,浸膏减压干燥的平均综合评分为91.05,模型预测值为91.87,相对误差为0.89％,浸膏干燥前后化学指纹谱相似度均大于0.91,3批浸膏粉的化学指纹谱和物理指纹谱相似度均大于0.99.结论 优选的黄芪百合颗粒浸膏减压干燥工艺稳定、可行.
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黄芪百合颗粒对亚硝酸钠中毒致缺氧性损伤小鼠的保护作用
目的 观察黄芪百合颗粒对亚硝酸钠致缺氧性损伤小鼠的保护作用.方法 72只小鼠随机分为空白组,阳性对照组,模型组,黄芪百合颗粒低、中、高剂量组(1.75、3.5、7 mg/kg),各实验组小鼠灌胃给予相应药物30 d.末次给药1h后,各组(除空白组外)小鼠腹腔注射亚硝酸钠(100 mg/kg),1h后采血,比色法测定高铁血红蛋白(MetHb)含有量,ELISA法测定硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含有量,HE染色观察小肠病理学变化,免疫组织化学法检查脑组织中脑红蛋白(Ngb)表达.结果 与空白组比较,模型组MetHb、TBARS含有量显著提高(P＜0.01),小肠黏膜上皮大量脱落,炎细胞浸润数量、Ngb表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,黄芪百合颗粒各剂量组和阳性对照组MetHb、TBARS含有量显著降低(P＜0.05,P＜0.01),小肠黏膜上皮少量脱落,炎细胞浸润数量显著减少(P ＜0.05,P＜0.01),Ngb表达显著增加(P＜0.01),胞浆、胞核均可见棕黄色颗粒状免疫反应阳性产物.结论 黄芪百合颗粒可通过降低MetHb含有量、抑制膜脂过氧化水平、改善小肠病理程度、提高Ngb表达来显示对亚硝酸钠致缺氧性损伤小鼠的保护作用.
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黄芪百合颗粒干法制粒工艺研究
目的:研究黄芪百合颗粒干法制粒的佳工艺条件.方法:采用单因素试验考察送料变频、压片变频、制粒变频和干膏粉含水量对颗粒一次成型率的影响,再通过L16(45)正交试验优选黄芪百合颗粒干法制粒工艺条件.结果:佳制粒工艺条件为:送料变频9 Hz、压片变频13 Hz、制粒变频10 Hz、干膏粉含水量2.0％.结论:黄芪百合颗粒干法制粒优化后的工艺稳定、可行,为以后该产品产业化应用提供了可靠依据.
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黄芪百合颗粒对高原低氧模型小鼠肺自由基代谢及肺病理形态学改变的影响
目的:研究黄芪百合颗粒对高原低氧模型小鼠肺自由基代谢及其病理学形态改变的影响,探讨黄芪百合颗粒预防高原反应的效应机制.方法:将SPF级小鼠采用随机数字表法分为空白对照组,模型组,黄芪百合颗粒低、中、高剂量组.灌胃给药,每天1次,连续14 d.除对照组外,第15天起各组小鼠每天灌胃30 min后于低氧舱中模拟高海拔环境进行低氧暴露72 h.末次出舱称重后处死小鼠.比色法检测各组小鼠过氧化脂质降解产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量及总抗氧化能力(total antioxidantcapacity,T-AOC)、过氧化物歧化酶(super-oxide dismutase,SOD)的活性.HE染色法观察小鼠肺组织形态学改变情况.结果:与空白对照组比较,模型组小鼠体质量下降;肺脏、肾脏及心脏指数均升高;肺MDA的含量明显升高,SOD及T-AOC的活性明显下降;小鼠肺病理评分结果和肺炎性细胞数量均明显升高(P＜0.01).与模型组比较,黄芪颗粒中、高剂量组小鼠有效体质量升高,肺脏、肾脏及心脏指数均降低;肺MDA含量下降,SOD及T-AOC活性均升高;小鼠肺病理评分结果和肺炎性细胞数量均下降(P＜0.05).结论:黄芪百合颗粒通过调节自由基代谢明显增强了其抗高原肺水肿的作用.
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黄芪百合颗粒对亚硝酸钠中毒小鼠增强缺氧耐受力的作用及机制
目的 观察黄芪百合颗粒对亚硝酸钠(NaNO2)中毒小鼠存活时间、肺、心脑组织病理形态学、过氧化氢酶(CAT)和三磷酸腺苷(ATP)的影响.方法 将60只SPF级KM种雄性小鼠常规饲养3 d后随机分组,空白组和模型组均灌胃生理盐水,阳性对照组给予红景天枸杞胶囊液,黄芪百合颗粒低、中、高剂量组分别按照 1.75 、3.5 、7 mg/(kg·d)剂量灌胃,1 次/d,连续 30 d.末次给药 1 h后,除空白对照组外,其余各组按200 mg/kg腹腔注射亚硝酸钠,注射量为0.2 mL.记录小鼠存活时间;HE染色观察肺、心、脑组织的病理形态学改变;采用比色分析法测定肺、心、脑组织中过氧化氢酶(CAT)活性和三磷酸腺苷(ATP)含量.结果 与空白组比较,模型组小鼠存活时间明显降低[(9.64 ± 1.60)min,P＜0.05];肺泡组织出现扩张、融合,肺间质内红细胞渗出,肺泡壁受压变窄;心肌间质血管扩张充血严重,心外膜下局部细胞水肿变性;脑组织出现脑神经细胞坏死,核固缩,且出现核周空泡现象,组织疏松,血管及神经细胞周围间隙增宽;肺、心、脑组织CAT活性降低(P＜0.05),ATP 含量降低(P＜0.05 );与模型组比较,黄芪百合颗粒低[(12.78±2.20)min]、中剂量组[(13.22±2.10)min]小鼠存活时间明显延长(P＜0.05),黄芪百合颗粒低、中、高剂量组小鼠肺泡组织扩张、肺间质红细胞渗出均不同程度减轻,心间质血管扩张充血不同程度减轻,脑组织神经细胞、核固缩现象不同程度减轻;肺、心、脑组织CAT活性增强(P＜0.05 )、ATP 含量升高(P＜0.05 ).结论 黄芪百合颗粒对小鼠 NaNO2中毒性缺氧损伤具有保护作用.
