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低剂量电离辐射对7721细胞细胞周期及p53、Ku70和Ku80表达的影响
目的观察电离辐射对7721细胞(人肝癌细胞)细胞周期和p53、Ku70和Ku80基因表达的影响.方法以人肝癌细胞株7721为研究对象,通过克隆形成实验拟合出7721细胞的剂量存活曲线;用流式细胞技术检测75 mGy X射线照射后7721细胞周期变化;用原位杂交方法检测7721细胞p53、Ku70和Ku80基因在75 mGy X射线照射前、后的表达情况.结果与对照组相比,75 mGyX射线照射后0.5～6 h,7721细胞S期延长(P＜0.05).p53、Ku70和Ku80基因的表达照射前与照射后比较差异无显著性.结论7721细胞在75 mGy X射线照射后,未出现G1期阻滞,p53、Ku70和Ku80基因在照射前、后表达无明显变化,是由于这些基因自身存在缺陷或激活机制存在缺陷所致.
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同型半胱氨酸对肝癌细胞基因mRNA表达的影响
目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对人肝癌细胞株-7721细胞固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)基因mRNA表达的影响.方法用反转录多聚酶联反应法(RT-PCR)不同浓度(0.2,1和5 mmol/L)、不同时间(2,4,8,24 h),Hcy对7721细胞SREBP-1基因mRNA表达的影响作用.结果Hcy可使7721细胞SREBP-1基因mR-NA表达上调,在Hcy浓度为5 mmol/L,作用18 h SREBP-1的mRNA表达相对较高.结论Hcy使7721细胞SREBP-1基因mRNA表达上调.
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Ras癌基因及nm23抑癌基因对细胞膜磷脂酶D活性的影响
目的为研究ras癌基因和nm23抑癌基因的高表达对细胞膜磷脂酶D (PLD)活性的影响.方法用ras癌基因和nm23抑癌基因构建的重组质粒,分别转染人肝癌细胞株7721,建立了高表达ras癌基因和nm23抑癌基因的H-ras/7721和nm23-H/7721细胞株,测定7721、mock细胞(空载体转染的7721细胞)、H-ras/7721和nm23-H/7721四种细胞中,细胞膜PLD酶活性和PLD酶蛋白表达量.结果在H-ras/7721细胞中,PLD酶活性比7721、mock细胞中PLD酶活性显著升高.nm23-H/7721细胞中,酶活性却显著降低.但在两种细胞中,PLD酶蛋白的量未见显著变化.结论 ras癌基因和nm23抑癌基因的高表达对PLD酶活性的影响,可能主要是通过影响PLD酶活性的调节因素来实现的.
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GSTθ高表达对肝癌7721细胞的生长及侵袭性的影响
目的 探讨增加GSTθ表达水平对人类肝癌7721细胞生长及侵袭能力的影响.方法 通过脂质体LipofectAMINE将pcDNA3 -GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的7721稳定转染细胞；采用RT-PCR检测GSTθ mRNA的表达水平；采用细胞记数法测定细胞的生长；采用Boyden小室方法观察细胞侵袭能力的改变.结果 GSTθ高水平表达对7721细胞的生长无明显影响,但使7721细胞的侵袭能力下降.结论 本实验证实了在7721细胞中,GSTθ高水平表达可以降低细胞的侵袭能力.
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人肝癌细胞系7721与原代人胎肝细胞用于体外培养HCV的对比研究
目的 研究丙型肝炎病毒（HCV）在体外培养原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系7721中复制和表达的异同，探讨HCV体外培养条件。方法 原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系7721分别与HCV感染血清共孵育后，用逆转录-聚合酶链反应、原位杂交、免疫组化检测细胞和培养上清中的HCV RNA和抗原表达。结果 从孵育的第2～3天，即可在细胞内和/或培养上清中间断地检出HCV RNA（其中HCV在7721细胞株中的复制至少可达66 d，HCV在人胎肝细胞中的复制持续25 d）；HCV抗原可在感染细胞内得到稳定表达，感染细胞内存在HCV负链 RNA杂交信号，且多位于细胞浆。结论 两种肝细胞对HCV易感，尤其是7721细胞可以稳定地支持HCV体外复制，可用于HCV体外长期培养的靶细胞。
