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β和γ射线照射肿瘤细胞的生物效应比较
目的比较低剂量率β射线和高剂量率γ射线照射诱发肿瘤细胞生物效应特点.方法采用32P β射线和60Co γ射线照射人宫颈癌HeLa细胞系,用台盼蓝排除法和X-gal衰老细胞染色法比较两种照射肿瘤细胞死亡方式的差异.结果32P β射线(0.375 cGy/min)和60Co γ射线(206 cGy/min)照射HeLa细胞后72 h的结果表明,低剂量率β射线抑制细胞增殖为渐进性,使多数的细胞在一个或几个细胞倍增周期后死亡,以增殖性死亡为主;高剂量率γ射线对细胞的抑制作用直接、迅速,细胞坏死比例高,增殖性死亡(衰老)比例低于持续低剂量照射方式.结论不同的辐射方式对细胞的杀伤方式不同,了解其放射生物学机理有助于临床治疗方案的选择.
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体外培养系统中IL-18诱导的快速肿瘤杀伤效应影响因素的研究
目的:应用rhIL-18在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)中诱导快速肿瘤杀伤效应,并对这种快速杀伤效应的影响因素进行了探讨.方法:采用Stem SepTM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突状细胞(DCs),流式细胞仪分析细胞表型,125I-UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性.结果:rhIL-18在CCs中能够诱导快速肿瘤杀伤效应,这种杀伤效应与rhIL-18含量呈剂量依赖关系,DCs和T细胞的存在与否对这种杀伤效应无明显影响,同时这种快速杀伤效应无抗原特异性、不受MHC的限制.结论:在体外培养系统中只要有rhIL-18和NK细胞的存在,即能产生对肿瘤细胞的快速杀伤效应,即这种快速杀伤效应细胞为NK细胞.
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IFN-γ对体外培养系统中IL-18诱导的肿瘤快速杀伤效应的影响
目的:建立体外培养系统(CCs),应用rhIL-18在CCs中诱导肿瘤快速杀伤效应,探讨IFN-γ在快速杀伤效应中的作用.方法:采用Stem SepTM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突状细胞(DCs);流式细胞仪分析细胞表型;细胞毒实验检测杀伤活性;ELISA方法检测IFN-γ的产生量.结果:在CCs中,rhIL-18能单独诱导一种快速肿瘤杀伤作用,其杀伤作用随rhIL-18浓度的增加而增高;rhIL-18能够诱导CCs产生IFN-γ,并促进mRNA的表达,但其作用不如rhIL-12+rhIL-18明显;抗IFN-γ单抗对rhIL-18诱导的快速肿瘤杀伤效应无明显影响.结论:IL-18能够在CCs中有效地诱导快速肿瘤杀伤效应,且这种杀伤效应不依赖IFN-γ无关途径.
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体外培养系统中各细胞组分在IL-18诱导的肿瘤特异性CTL中的作用
应用rhIL-18在体外培养系统(coculture system in vitro,CCS)中诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxie T lymphocyte,CTL),探索不同细胞在IL-18起动和促进肿瘤特异性免疫应答方面的作用.采用StemSepTM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突细胞(DC),流式细胞仪分析细胞表型,125I-UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性.结果表明,在肿瘤抗原存在的条件下,CCS中rhIL-18能够诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应;并且,在rhIL-18诱导肿瘤特异性CTL的过程中,rhIL-18、NK细胞、DC及T细胞均起着十分重要的作用,缺少任一组份,均对诱导肿瘤特异性CTL有明显差异(P＜0.01).提示在CCS中,rhIL-18诱导的NK细胞快速杀伤效应及DC的抗原提呈作用,在肿瘤特异性CTL产生过程中,均起着决定性的作用.
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HPV-16E7负载DC激活CIK细胞增强宫颈癌细胞杀伤效应的研究
目的 观察人乳头瘤病毒(HPV)-16 E7特异性高表达的树突状细胞(DC)对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞激活及宫颈癌细胞杀伤效应的影响.方法 采用流式细胞术检测HPV-16 E7载体转染DC后其细胞表型,流式细胞术检测HPV-16 E7负载DC与CIK细胞共培养后CIK细胞的细胞表型.ELISA法检测HPV-16 E7负载DC-CIK细胞、阴性对照负载DC-CIK细胞、DC-CIK细胞、单纯CIK细胞中CIK细胞分泌的IL-12、IFN-γ、TNF-α等细胞因子的表达水平,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CIK细胞对宫颈癌Hela细胞的杀伤活性.结果 HPV-16 E7负载可促使DC成熟,细胞表面标志物CD83、CD86及HLA-DR的表达上调,CD14表达下调.经过HPV-16 E7负载DC共培养的CIK细胞,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例均上调,细胞因子IL-12、IFN-γ、TNF-α的水平亦均上调,CIK细胞表现出更强的宫颈癌Hela细胞杀伤活性.结论 HPV-16 E7负载DC不仅能激活CIK细胞,还可增强CIK细胞的宫颈癌细胞杀伤效应.这为宫颈癌的细胞免疫治疗提供新思路.
关键词： 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 人乳头瘤病毒 宫颈癌 肿瘤杀伤效应 -
IL-18在体外培养系统中诱导肿瘤快速杀伤效应及肿瘤特异性CTL
目的应用rhIL-l8在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)中诱导快速肿瘤杀伤效应及诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL).方法采用StemSepTM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突细胞(DCs),流式细胞仪分析细胞表型,125I-UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性,ELISA方法检测IFN-γ的产生量.结果在CCs中,rhIL-18诱导出快速肿瘤杀伤效应,这种杀伤效应无抗原特异性、不受MHC限制,DCs和T细胞的存在与否对其无明显影响.在同一培养系统中,肿瘤抗原存在的条件下,96h后,rhIL-18能够诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应.结论 rhIL-18能够在体外培养系统中相继诱导肿瘤快速杀伤效应及肿瘤特异性CTL.
