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酶解血粉功能特性的研究
目的:本文对酶水解血粉进行了研究,对工艺进行了探讨,达到充分利用的目的 .方法:通过甲醛滴定法和凯氏定氮法研究了酶浓度、底物浓度、PH值、反应时间、反应温度对血粉水解度的影响,结果:通过实验得出了佳工艺条件为:底物浓度为6%,反应时间为4h ,加酶量为1.5 ml,pH为7.0,反应温度为65℃.结论:佳条件下水解后的血粉添加到肉制品中,可以增加营养价值.
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蛋白酶活力及血浆蛋白在肉制品中的应用
目的:提高血浆蛋白利用率,方法:正交实验和血粉水解液添加到火腿中口感、色泽、组织结构综合评分,结论:将在佳条件下水解后的血粉添加到肉制品中,可以增加营养价值,改善产品组织结构和口感.结果:添加10ml水解液于火腿中来代替4g瘦肉效果佳.
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蛋清的蛋白酶解物清除自由基能力的研究
目的 研究胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及Alcalase碱性蛋白酶对蛋清蛋白的水解效果以及其酶解物对自由基的清除能力.方法 采用茚三酮法分析五种蛋白酶对蛋清蛋白的水解效果;通过Fenton体系和邻苯三酚自氧化体系测定五种蛋白酶水解产物对羟自由基及超氧阴离子的清除能力.结果 五种蛋白酶在其适反应条件下,水解度大小依次为:alcalase碱性蛋白酶>胰蛋白酶>木瓜蛋白酶>中性蛋白酶>胃蛋白酶;羟自由基清除能力强弱依次为:木瓜蛋白酶>alcalase碱性蛋白酶>胰蛋白酶>中性蛋白酶>胃蛋白酶;超氧阴离子清除能力强弱依次为:木瓜蛋白酶>alcalase碱性蛋白酶>中性蛋白酶>胃蛋白酶>胰蛋白酶.木瓜蛋白酶水解3h的产物对两种自由基清除能力强,对羟自由基的清除率为65.63%,对超氧阴离子的清除率为38.40%.结论 蛋清的蛋白酶解物具有清除羟自由基及超氧阴离子的能力,且对羟自由基的清除能力大于超氧阴离子.
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复合型絮凝剂的特征参数B的研究
特征参数B是无机高分子絮凝剂的重要质量指标,老直接决定着絮凝剂产品的化学结构形态和特性.本文从数学及化学原理出发,首次提出了单一型絮凝剂及复合型絮凝剂通用的特征参数公式:B总=nOH-/n总,并在实践中得到应用.
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鹿骨保健食品原料的工艺研究
以鹿骨初酶解产物为研究对象，以水解度为特征性指标，采用甲醛滴定法检测酶解进程，分析对比不同酶解条件对样品水解度的影响，确定了碱性蛋白酶和胰蛋白酶分步水解为佳酶解条件。结果：采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶分步水解的佳，条件为酶底比1∶200和1∶240，料液比为1∶40，起始pH值为9.0，碱性蛋白酶45℃酶解1.5h后，加入胰蛋白酶37℃下酶解2h，水解度为21.37%。
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大豆蛋白质酶解前处理方法的研究
目的 研究提高大豆蛋白质水解度的方法.方法 比较加热、超声波、酸、碱处理对大豆蛋白质水解的影响,探讨大豆蛋白质酶解前处理的可行性.结果 经加热、超声波、酸、碱处理,大豆分离蛋白质的水解度都有所增加,经加热和超声波处理的水解度增加尤为明显,比不经前处理酶解的水解度提高7%～8%.结论 酶解前处理合理可行.
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牡蛎酶解工艺的研究
目的 获得佳牡蛎蛋白的酶解工艺及以期提高酶解液水解度和蛋白回收率.方法 综合考虑蛋白回收率、水解度和腥、苦味及澄清度,进行佳酶的筛选;正交试验确定酶的佳水解条件;以水解度和蛋白回收丰为指标,研究热处理、超声处理和微波处理对酶解的影响.结果 与结论菠萝蛋白酶比较适合牡蛎蛋白质的水解,其佳条件为:pH6,温度55℃,料水比为1:3,加酶量为800U/g,酶解时间4h,在此条件下酶解产物水解度为29.86%,蛋白回收率为67.55%;热处理、超声处理和微波处理不利于牡蛎蛋白的水解.
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红非鲫(Oreochromis niloticus)鱼皮胶原蛋白酶解条件的研究
目的研究单酶和复合酶水解红非鲫鱼皮胶原蛋白制备具有抑制血管紧张素转换酶(ACE)生物活性的寡聚肽的工艺条件.方法根据6种单酶的水解产物对ACE抑制作用的测定结果,确定了两种酶即菠萝蛋白酶和alcalase 2.4L碱性蛋白酶组成复合水解酶.采用正交试验确定了这两种酶单独水解鱼皮胶原蛋白的适酶解条件.结果与结论菠萝蛋白酶和alcalase2.4L蛋白酶的适酶解温度,pH,酶/底物,时间,底物浓度分别为45℃,pH4.5,4000U·g-1,4h,6%和55℃,pH7.5,6000U·g-1,2h,4%.在此基础上,进行复合酶水解实验,结果表明先采用菠萝蛋白酶水解,再用alcalase 2.4L蛋白酶水解,效果更佳.采用该双酶复合水解工艺,所得水解产物的水解度为30.43%,体外对ACE的抑制率达68.6%.
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鹿角盘蛋白酶解工艺优化及其水解物抗氧化活性研究
目的 优化鹿角盘蛋白酶解工艺,测定其酶解物抗氧化活性.方法 以水解度为指标通过正交实验,优化鹿角盘蛋白酶解工艺.选取具有代表性的羟自由基、DPPH·、超氧阴离子3种自由基体系,以不同浓度水解物的抗氧化作用为指标,评价酶水解物的抗氧化活性.结果 酶解的优工艺为温度50℃,pH 8.5,酶与底物比([E/S])4％,水解时间5h.胰蛋白酶水解物对羟自由基的半抑制浓度( IC50)为0.38mg/ml,对DPPH·的IC50为1.89 mg/ml,对超氧阴离子的IC50为0.70 mg/ml.结论 筛选出鹿角盘蛋白酶解优工艺,其酶解物具有较好的抗氧化活性.
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北冬虫夏草活性多肽的制备工艺研究
目的 通过酶解法制备北冬虫夏草活性多肽并筛选出佳酶解条件.方法 分别用胃蛋白酶和胰蛋白酶对北冬虫夏草进行单酶酶解,然后先加胃蛋白酶后加胰蛋白酶进行双酶酶解.按时间,加酶量和底物浓度不同条件采用正交试验,通过茚三酮比色法检测水解度优化佳酶解工艺,采用MTT法检测单酶酶解液和双酶酶解液对PC12细胞活性的影响.结果 胃蛋白酶和胰蛋白酶水解度测定吸光度大值分别为0.899和0.788,对应酶解时间、加酶量和底物浓度都是5h、2.5％和12％;双酶酶解在此条件下的吸光度值为0.875.酶解液对PC12细胞修复率影响大值为139.59％,对应样品为胃蛋白酶酶解原液稀释10-6倍.结论 胃蛋白酶酶解效果高于胰蛋白酶和双酶.
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全蝎粉酶解工艺佳用酶的初步筛选
目的 从四种蛋白酶中选出酶解全蝎粉的佳用酶,来制备抗肿瘤多肽.方法 以蛋白质的水解度、对肺腺癌细胞A549细胞的抑制率为指标,同时以全蝎粉水提物作为对照组,评价胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶对全蝎粉的水解效果.结果 胃蛋白酶对全蝎粉的水解度为8.47％,且不同的药物浓度对肺腺癌A549细胞的抑制率比对照组低,其IC50为14.7427 mg/ml;胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶的水解度分别为25.12％、12.37％、11.13％,不同的药物浓度对肺腺癌A549细胞的抑制率比对照组高,其IC50分别为0.6878 mg/ml、0.7073 mg/ml、0.8306 mg/ml;对照组的IC50为5.9386 mg/ml.结论 全蝎粉酶解工艺的佳用酶是胰蛋白酶,其次是胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶,而胃蛋白酶可以去除.
关键词： 蛋白酶 全蝎粉 水解度 肺腺癌A549细胞株 半数抑制率 -
Box-Behnken响应面法优化鹿角蛋白双酶解工艺研究
目的:采用响应曲面法优化鹿角蛋白双酶解工艺.方法:以鹿角蛋白冻干粉为原料,水解度和酶解物抗氧化活性为衡量佳双酶的指标,筛选出(风味蛋白酶∶碱性蛋白酶)佳双酶组合.在单因素实验的基础上,以蛋白水解度及酶解物对O2-·抑制率双目标,选取酶解pH、酶解温度、酶添加比例3个因素,进行Box-Behnken实验设计和响应曲面法分析,优选佳双酶解工艺.结果:双酶解的佳工艺为酶解pH=7.5,酶解温度51.6℃,风味蛋白酶∶碱性蛋白酶比例为7∶3,在此条件下鹿角蛋白水解度21.11％,酶解产物抑制率55.63％.结论:该双酶解工艺高效可行,可用于鹿角蛋白双酶解.
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离体外翻肠囊法研究消化酶对阿胶的肠吸收作用
目的:研究胃蛋白酶及胰蛋白酶在体外对阿胶的酶解作用及酶解对阿胶在小肠部位吸收的影响.方法:采用茚三酮法测定阿胶酶解物的水解度.建立大鼠离体外翻肠囊模型,通过测定在120mim内羟脯氨酸、甘氨酸及总氨基酸的吸收情况,并计算其累积吸收量及吸收速率Ka,评价阿胶在小肠部位的吸收情况.结果:阿胶经胰蛋白酶酶解或胃一胰蛋白酶酶解120min后水解度分别为5.66％、6.26％,可以显著提高阿胶在整个小肠部位的吸收,差异具有统计学意义(P＜0.01);而经胃蛋白酶酶解后的阿胶水解度仅为1.24％,对阿胶在小肠部位的吸收无明显促进作用,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胰蛋白酶水解作用是影响阿胶小肠部位吸收的关键步骤.
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野生与养殖全蝎酶解后主要成分含量及抗肿瘤作用的对比研究
目的 观察比较野生与养殖全蝎酶解后主要成分变化及抗肿瘤作用效果.方法 分别采用改良Lowrry法测定蛋白质含量;阿利新蓝法测定糖胺聚糖含量;半微量凯氏定氮测定水解度;MTT法测定对A549和Hep-2细胞的抑制率.结果 对所得含量用t-检验:双样本等方差假设分析所得实验数据,比较两者间差异,其中蛋白质含量、糖胺聚糖含量差异均无统计学意义;野生全蝎的水解度为16.87％,养殖全蝎为16.46％;两者对A549细胞和Hep-2细胞的抑制作用均成剂量关系,随药物浓度的升高抑制率呈现上升趋势,且养殖全蝎酶解后其抑制效果总体优于野生全蝎酶解后的效果.结论 经过两者间几个主要成分含量的比较以及对肿瘤抑制作用的比较,野生与养殖全蝎酶解后主要化学成分含量变化不大,但养殖全蝎酶解后肿瘤细胞的抑制作用优于野生全蝎.
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蜈蚣粉酶解工艺佳用酶的初步筛选
目的 分别利用胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶对蜈蚣粉进行酶解并选取佳用酶来制备抗肿瘤多肽.方法 利用4种酶对蜈蚣粉进行酶解,采用MTT体外抗肿瘤实验方法,以蛋白质的水解度及酶解提取液对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率为指标,同时以蜈蚣粉的水溶性蛋白质含量为标准,评价4种酶对蜈蚣粉的酶解效果并筛选出佳用酶.结果 胃蛋白酶对蜈蚣粉的水解度为10.44％;胰蛋白酶对蜈蚣粉的水解度为28.29％,在0.125 mg·mL-及0.25 mg·mL-1的较小浓度下对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率低于对照组,但随浓度的增大抑制率逐渐增大,在0.5～2 mg·mL-浓度时,胰蛋白酶在4种酶中达到大抑瘤效果;胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶的水解度分别为50.45％、44.16％,当浓度＞0.5 mg·mL-时其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率高于对照组,在浓度为0.5mg·mL-时抑制率分别为2.86％、36.37％,且随浓度增大抑制率增大.结论 蜈蚣粉酶解工艺佳用酶为胰蛋白酶,其次是胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶,而胃蛋白酶活性较低可以去除.
关键词： 蜈蚣粉 蛋白酶 水解度 乳腺癌MCF-7细胞株 细胞抑制率 -
蛴螬粉酶解工艺佳用酶的初步筛选及体外抗肿瘤活性的研究
目的 评价蛴螬粉不同酶解产物的体外抗肿瘤活性,初步确定佳用酶,为蛴螬抗肿瘤多肽的制备提供新思路.方法 以蛴螬水提液为对照组,在茚三酮显色法测定水解度的基础上,采用MTT法研究4种蛋白酶水提液对肺腺癌细胞株A549的抑制作用,初步确定佳用酶.结果 蛴螬水提液不同药物浓度对肺腺癌细胞株A549的生长有一定抑制作用;弹性蛋白酶、胰蛋白酶的水解度(DH)分别为7.65％、6.10％,对肺腺癌细胞株A549的抑制均呈剂量依赖性;胃蛋白酶的DH为3.14％,对肺腺癌细胞株A549几乎无抑制作用;胰凝乳蛋白酶的DH小为2.56％,对细胞的抑制作用明显比无酶的高.结论 胰蛋白酶和弹性蛋白酶水提液具有较高的DH和体外抗肿瘤活性,初步筛选为佳用酶.
