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管花肉苁蓉苯乙醇总苷在狗胃肠道内的生物转化
目的研究苯乙醇苷类化合物在狗胃肠道内的代谢规律.探讨中药有效部位体内转化的研究方法.方法用反相HPLC,对ig苯乙醇总苷的狗粪便中的化合物进行分离,并以含量高的3个化合物为标准,比较不同时间胃肠容物及粪便中的含量.结果从粪便中分离得到4个苯乙醇苷类化合物,分别为松果菊苷(echinacoside, I)、类叶升麻苷(acteoside, II)、异类叶升麻苷(isoacteoside, III)和2′-乙酰基类叶升麻苷(2′-acetylacteoside, IV);经HPLC分析发现,各成分在胃及小肠运行期间相对比例未发生明显变化,但在粪便中变化很大,其中松果菊苷由总苷中的48.0%降低到16.0%,而类叶升麻苷由11.0%升高为34.7%.结论苯乙醇苷类成分的代谢主要发生在大肠,其中松果菊苷经脱糖反应转化成类叶升麻苷.
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pPB修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的制备研究
目的:采用三种方法制备pPB修饰的肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体,并对其体外性质进行考察.方法:分别采用薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制备肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体,并对不同方法制得脂质体的粒径、电位、包封率进行比较.结果:薄膜分散法、二次包封法、逆相蒸发法制得的脂质体粒径分别为(209.20±1.77)nm、(212.70±1.27)nm、(196.40±1.56)nm,ξ电位分别为(–43.35±2.17)mV、(–37.85±0.68)mV、(–47.95±2.62)mV左右,包封率分别为(28.55±5.61)％、(38.46±7.85)％、(33.88±3.50)％.结论:三种方法制得的脂质体的包封率之间有显著性差异,其中二次包封法所得脂质体的包封率高,因此选择二次包封法作为pPB修饰的肉苁蓉总苷脂质体的制备方法.
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鲜品肉苁蓉渣和汁有效成分的比较
目的 鲜品肉苁蓉渣和汁有效成分量比较及其药用研究初探.方法 采用硫酸-苯酚法测定肉苁蓉多糖的量;采用大孔树脂-紫外分光光度法测定了苯乙醇苷的量;采用<中国药典>肉苁蓉项下HPLC方法,测定了松果菊苷和毛蕊花糖苷的量.结果 以肉苁蓉多糖、苯乙醇总苷、松果菊苷和毛蕊花糖苷主要有效成分的量为综合评价指标,鲜品肉苁蓉渣中除多糖的量与汁中相差不明显,其余有效成分的量均明显高于其汁,大相差依次为8、785、230倍.鲜品肉苁蓉渣部分经冷冻后多糖的量显著升高,苯乙醇总苷的量明显下降.结论 鲜品肉苁蓉渣部分与其汁相比药用性更高,为鲜品肉苁蓉科学用药及其保健食品开发提供依据.同时,鲜品肉苁蓉渣部分经冷冻后有效成分的量明显改变,为鲜品肉苁蓉的储存提供了参考.
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肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体对大鼠T6肝星状细胞凋亡的影响及作用机制研究
目的 探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(phenylethanol glyco-sides from cistanche tubuiosa,CPhGs)脂质体对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)凋亡的影响及其抗肝纤维化的相关分子机制.方法 培养HSC-T6,取生长状态良好的对数生长期细胞用于实验,采用重组大鼠血小板衍生生长因子BB(rrPDGF-BB)刺激HSC-T6,构建体外肝纤维化模型.MTT法测定CPhGs脂质体(29.45、14.72、7.36 mg·L-1)对HSC-T6增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染试剂标记后,流式细胞仪检测CPhGs脂质体不同浓度组的细胞凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测 α-SMA、Collagen I、CollagenⅢmRNA的表达水平;Western blot法检测CPhGs脂质体对p-JNK蛋白表达的影响.结果 不同浓度CPhGs脂质体均可抑制rrPDGF-BB诱导的HSC-T6的增殖;CPhGs脂质体(29.45、14.72 mg·L-1)组凋亡率明显升高;qRT-PCR结果显示,CPhGs脂质体不同浓度组均可下调α-SMA、Collagen I、CollagenⅢmRNA水平的表达,并能降低p-JNK蛋白的表达.结论 CPhGs脂质体能抑制大鼠HSC-T6的增殖并诱导其凋亡,其作用可能与抗肝纤维化有关.
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前体饲喂和真菌诱导子对肉苁蓉悬浮培养细胞次生代谢产物的影响
目的:研究前体饲喂和真菌诱导子对肉苁蓉悬浮培养细胞生长、苯乙醇总苷(PeGs)和松果菊苷(Echin)含量的影响.方法:悬浮培养联合加入前体和真菌诱导子.结果:前体化合物L-苯丙氨酸+L-酪氨酸与番茄霉菌联合作用,肉苁蓉悬浮细胞干重、PeGs及Echin含量均达到大值,分别为14.69 g DW/L、50.55 mg/g和23.86 mg/g,是对照的1.81、4.18和3.99倍.结论:前体和诱导子联合作用能显著提高肉苁蓉细胞悬浮培养体系中次生代谢物的含量.
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管花肉苁蓉不同部位中苯乙醇总苷含量的测定
目的:考察苯乙醇总苷在管花肉苁蓉不同部位的分布情况.方法:采用UV法测定管花肉苁蓉不同部位中苯乙醇总苷的含量.结果:苯乙醇总苷在管花肉苁蓉不同部位分布为根部>中部>顶部,同一株管花内苁蓉中顶部和根部的大差异达到8.7倍.结论:管花肉苁蓉不同部位苯乙醇总苷含量的差异很大,且大部分的有效成分分布在根部,这些数据将为更加合理科学地使用开发管花肉苁蓉提供依据.
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管花肉苁蓉不同部位有效成分含量的考察比较
目的 考察新疆和田地区不同产地的管花肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷和苯乙醇总苷的含量.方法 分别采用高效液相色普法(HPLC)和紫外分光光度(UV)法检测管花肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷和苯乙醇总苷的含量.结果同一株管花肉苁蓉中松果菊苷在根部与顶部的含量差异大达22.4倍,毛蕊花糖苷在根部与顶部的差异大达到16.7倍,苯乙醇总苷在根部与顶部的差异大达到8.7倍.结论 管花肉苁蓉各部位有效成分含量的差异悬殊,有效成分主要分布在根部,实验结果将为更加合理科学地使用开发管花肉苁蓉提供依据.
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管花肉苁蓉中活性成分提取纯化工艺研究
目的 考察从管花肉苁蓉中提取、纯化苯乙醇总苷类物质的佳工艺和条件.方法 通过正交试验优化管花肉苁蓉中苯乙醇总苷的提取工艺,并通过筛选大孔吸附树脂、洗脱液,选择适树脂和佳纯化条件.结果 苯乙醇总苷的佳提取工艺为:12倍60%乙醇,超声提取3次,每次30 min,提取率95%以上,从8种大孔吸附树脂中选出纯化效果佳的DM130树脂,大静态吸附量为344.49 mg/g,用60%乙醇洗脱,解析率达96%,纯度达97%.结论 该方法 简单易行,周期短,成本低,所得苯乙醇总苷纯度高,对工业生产具有指导意义.
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肉苁蓉苯乙醇总苷对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤的保护作用
目的 研究肉苁蓉苯乙醇总苷(PhGs)对Aβ1-42蛋白诱导致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)损伤的保护作用.方法 将培养的PC12细胞随机分为空白组、模型组、不同浓度的PhGs药物干预组(5、25、50μg/mL),药物干预细胞模型后,采用MTT比色法测定细胞存活率,酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)渗漏率.结果 Aβ1-42损伤模型佳损伤条件为0.5μmol/L造模浓度损伤48h;建模过程中发现Aβ1-42蛋白诱导损伤细胞稳定高效,通过不同剂量肉苁蓉苯乙醇总苷干预,能明显改善Aβ1-42对PC12细胞模型造成的细胞损伤,与模型组比较,肉苁蓉苯乙醇总苷可提高PC12细胞存活率,减少LDH漏出量,差异有统计学意义(P<0.05).结论 肉苁蓉苯乙醇总苷对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用.
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肉苁蓉苯乙醇总苷抗肝癌作用的实验研究
目的:研究肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)的抗肝癌作用,并探讨其可能的作用机制.方法:采用前肢右侧腋部皮下注射法建立小鼠肝癌H22荷瘤模型,实验设空白对照组、肝癌H22荷瘤模型组、肝复乐阳性治疗组(1 351.5 mg/kg)、CPhGs高剂量组(500mg/kg)、中剂量组(250 mg/kg)、低剂量组(125 mg/kg),共6组,每组10只.除空白对照组和模型组外,其余各组分别灌胃给予肝复乐或CPhGs,连续10d.期间监测小鼠的一般状况,观察各组H22荷瘤小鼠瘤体生长情况,实验结束时,摘眼球取血,酶联免疫(ELISA)法检测血清白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和甲胎蛋白(AFP)含量;分离脾脏、肝脏,称质量,计算脏器系数;完整剥取瘤体,计算各组小鼠的肿瘤抑制率;HE染色观察瘤体病理组织学变化.结果:荷瘤模型组动物腋下肿瘤出现早且生长快,CPhGs低、中剂量组次之,高剂量组和阳性治疗组瘤体生长较慢.与模型组比较,CPhGs中、高剂量组瘤质量均明显降低(P＜0.05),各剂量组抑癌率随CPhGs剂量增加依次升高(P＜0.05);阳性治疗组和CPhGs各剂量组脾脏系数均明显升高及肝脏系数均明显降低(P＜0.05);CPhGs中、高剂量组和阳性治疗组IL-2含量均明显升高(P＜0.05),而AFP含量均明显降低(P＜0.05);CPhGs各剂量组和阳性治疗组TNF-α含量均明显降低(P＜0.05).病理结果发现CPhGs各剂量组小鼠肝癌细胞生长受到抑制、数目较少、异质性降低、并伴有大量坏死细胞.结论:CPhGs能降低肝癌H22荷瘤小鼠肝脏损伤,并对其肿瘤生长有抑制作用,可能与CPhGs降低荷瘤小鼠血清中AFP含量及提高荷瘤小鼠免疫能力有关.
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一阶导数紫外分光光度法测定御苁蓉口服液中苯乙醇苷类成分的含量
目的采用一阶导数紫外分光光度法测定御苁蓉口服液中苯乙醇苷类成分的含量.方法用AB-8大孔吸附树脂分离口服液中的苯乙醇总苷,然后用一阶导数紫外分光光度法测定.结果测定平均回收率为99.2%,RSD=1.02%(n=4).结论本法简便,可以用于御苁蓉口服液的质量标准.
