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川芎提取物对缺氧神经小胶质细胞的保护作用
目的 研究川芎提取物对缺氧状态下神经小胶质(HM)细胞的保护作用.方法 用无糖低氧方法建立缺氧HM模型,用蛋白免疫印迹法验证缺氧模型建立.实验分为空白组、模型组、对照组和实验组.空白组在DEME培养基,正常条件下培养;模型组在DEME培养基,缺氧状态下培养;对照组在正常培养基中加入200 μg·mL-川芎提取物处理,正常条件下培养;实验组在正常培养基中加入200μg·mL-1川芎提取物后,再进行缺氧处理.用CCK-8法观察缺氧细胞活力,用酶联免疫吸附实验法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放,用流式细胞检测细胞增殖周期.结果 缺氧48 h后,模型组的细胞增殖力较对照组明显下降为(0.556±0.011 vs0.607±0.008),而实验组的细胞增殖力较模型组明显升高(0.676±0.015 vs0.556±0.011),差异均有统计学意义(均P＜0.01).川芎提取物能抑制缺氧HM细胞LDH的释放(0.276±0.026 vs0.548±0.007,P＜0.01).流式FACS结果显示,川穹提取物能增加缺氧HM细胞G2+S期的比例.结论 川芎提取物对缺氧的神经小胶质细胞有明显保护作用.
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终末糖基化产物对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响
目的:研究终末糖基化产物(AGEs)对神经小胶质细胞白细胞介素-1β(IL- 1β)、白细胞介素-6(IL -6)表达的影响.方法:以不同浓度、不同时间AGEs刺激体外培养的小鼠小胶质瘤细胞(BV -2细胞),观察细胞形态的变化,应用逆转录聚合酶链反应( RT - PCR)检测细胞内IL- 1β、IL -6 mRNA水平,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清液中IL - 1β、IL -6的蛋白含量.结果:与空白组和AGEs对照物组比较,AGEs组细胞活化呈阿米巴样,胞核大而圆,核仁明显,胞浆内颗粒物增多,以300 mg/L作用18 h组效果显著.与空白组和AGEs对照物组比较,作用时间相同时,AGEs浓度为50 mg/L时即可见细胞的IL- 1β、IL-6 mRNA水平明显增加(P＜0.05或P＜0.01),浓度为150 mg/L时,细胞培养上清液中IL- 1β、IL -6的蛋白含量明显增加(P＜0.05)；作用浓度相同时,2h即可见细胞的IL -1β mRNA水平明显增加(P＜0.05),6h见细胞的IL -6 mRNA水平和细胞培养上清液中IL-1β、IL -6的蛋白含量明显增加(P＜0.05或P＜0.01),其中以300 mg/L作用18 h组效果显著(P＜0.05).结论:AGEs刺激可使小胶质细胞内IL - 1β、IL -6高表达.
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天麻素对不同浓度葡萄糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β,IL-6表达的影响
研究天麻素对高糖所致的神经小胶质细胞损伤的保护作用.选择不同浓度的葡萄糖细胞培养液(30,35,45 mmol/L)培养神经小胶质细胞,观察添加天麻素(50 mg/L)培养24 h后细胞形态变化,用逆转录聚合酶链反应方法评价IL-1β、IL-6mRNA表达改变,并用酶联免疫吸附法测定细胞培养上清液IL-1β,IL-6的浓度.研究表明在葡萄糖培养的小胶质细胞中加入天麻后,细胞突触减少,当葡萄糖浓度为35 mmol/L时,天麻素对IL-1β、IL-6表达抑制率分别为47.9％和29.9％,当葡萄糖浓度为45 mmol/L时,抑制率分别为35.6％和44.5％.由此表明,天麻素降低了高糖对神经小胶质细胞的损伤,并抑制葡萄糖上调的神经小胶质细胞IL-1β、IL-6的表达.
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同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响
目的：研究同型半胱氨酸（HCY）对神经小胶质细胞（bv-2细胞）白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）表达的影响。方法：在细胞培养液中加入HCY、半胱氨酸（DL-CY）、空白对照组及溶剂对照组干预后，用细胞计数试剂盒（CCK8法）观察各组细胞增殖活性，并用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定细胞培养上清液IL-1β、IL-6浓度，用实时荧光定量核酸扩增检测系统（QPCR）的方法评价IL-1β、IL-6 mRNA表达改变。结果：实验各组中细胞增殖活性差异均无统计学意义（P＞0.01），而HCY组IL-1β、IL-6的mRNA表达及上清液中蛋白表达与其他各组相比均有显著增加（P＜0.01）。结论：HCY上调神经小胶质细胞IL-1β、IL-6的表达。
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高糖对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6蛋白及其基因表达的影响
目的 探讨不同浓度葡萄糖对神经小胶质细胞IL-1 β、IL-6蛋白及其基因表达水平的影响.方法 将体外培养的小鼠小胶质细胞随机分为:正常对照组(NC组)和葡萄糖浓度为30mmol/L组(G1组)、35 mmol/L组(G2组)、45mmol/L组(G3组),并观察各组细胞形态变化,同时测定细胞培养上清液中IL-1 β、IL-6蛋白和小胶质细胞IL-1 β、IL-6mRNA水平.结果 G2组和G3组培养24h后与NC组比较,神经小胶质细胞易于聚集,胞体、胞核变大,枝状突起明显,胞质内颗粒物增多,且随着葡萄糖浓度升高其作用更为明显;G1组培养上清液中IL-1 β、IL-6蛋白水平和NC组的差异均无统计学意义(均P>0.05),G2组和G3组培养上清液中IL-1 β、IL-6蛋白水平均较NC组明显增高(均P<0.01);高浓度葡萄糖各组IL-1 β和IL-6mRNA的表达水平均较NC组明显增加(均P<0.01),且G2组和G3组的基因表达水平均较G1组显著增高(均P<0.01).结论 高糖可上调神经小胶质细胞IL-1 β、IL-6的蛋白及mRNA表达水平.
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姜黄素对弓形虫感染小胶质细胞NO的产生及iNOS表达的影响
目的 研究姜黄素(curcumin)对弓形虫PRU虫株(type II基因型)感染的BV-2细胞一氧化氮(NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响.方法 用弓形虫PRU虫株(5×105)感染BV-2细胞,同时用姜黄素进行干预,观察细胞形态;MTT检测细胞增殖;用Griess法检测细胞上清中NO的含量;Western blotting检测iNOS蛋白的表达.结果 与对照组相比,感染弓形虫的小胶质细胞胞体变圆,突起减少,姜黄素可以减轻这种改变.弓形虫感染的小胶质细胞iNOS的表达增强,NO释放量增加,且随着时间延长逐渐增高,姜黄素能抑制iNOS的表达和NO的产生.结论 姜黄素可以抑制弓形虫感染的BV-2细胞iNOS蛋白表达和NO的产生,提示该药对弓形虫脑病具有潜在的治疗价值.
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氯硝柳胺抑制小胶质细胞炎症作用研究
目的:探讨氯硝柳胺对脂多糖(L PS)诱导小胶质细胞炎症作用的影响.方法:建立脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞系BV2炎症反应模型;采用Griess 法检测细胞上清中 NO 释放量, MTT 法检测细胞活性;实时定量 PCR(qPCR)检测促炎症因子iNOS、COX-2、TNF-α和IL-6的表达量.分析氯硝柳胺对小胶质细胞炎症的影响.结果:氯硝柳胺能够显著抑制LPS激活的BV2细胞中NO释放量;qPCR结果显示,与正常细胞组相比,LPS组BV2中促炎因子的表达水平明显升高;氯硝柳胺显著降低LPS诱导的BV2细胞中促炎因子表达.结论:氯硝柳胺对LPS诱导的小胶质细胞炎症反应有明显抑制作用.
