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广西1999年医药卫生科研进展(下)
1.结核病快速诊断方法的建立:广西区卫生防疫站采用磁性粒子免疫捕获PCR(MIPCR)40~60%,检出率达80%,而且发现MIPCR检出与病变范围大小呈正相关.该法灵敏度高,特异性较强,能快速作出诊断.
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免疫捕获凝集试验用于人布氏菌病血清学诊断的评价
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免疫捕获乳酸脱氢酶活性测试在恶性疟诊断中的初步应用
近来发现,疟原虫乳酸脱氢酶(LDH)与宿主红细胞LDH在理化、免疫学特性和酶学方面差异较大.在催化乳酸生成丙酮酸的反应中,疟原虫LDH能迅速利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)类似物3'-乙酰吡啶NAD(APAD)作辅酶,而红细胞LDH在存在时参与反应速率较慢[1,2].这一特性为利用疟原虫LDH活性检测疟原虫提供了依据.另外,基于疟原虫LDH为检测靶抗原的免疫层析试剂盒-OptiMAL法,其实验室和现场检测均作了评估,与传统镜检法相比,其诊断恶性疟的敏感性和特异性分别为88%和99%,对间日疟分别为94%和100%[3].因此,疟原虫LDH具有重要的诊断应用价值.本研究利用业已制备的抗恶性疟原虫LDH单抗[4],结合其酶学特性,建立检测恶性疟原虫的免疫捕获LDH活性测试法,评价其疟疾诊断应用价值.
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免疫捕获PCR快速检测阳性血培养瓶中的金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌(S.aureus)是引发社区感染和院内感染的重要致病菌,其所致感染常以急性、化脓性为特征.以其引发菌血症而致的脓毒血症为严重.作者采用免疫捕获PCR法(Immunocaptured PCR,icPCR)检测S.aureus,即应用抗体包被微量PCR管免疫捕获阳性血培养瓶中的S.aureus,再用PCR法快速检测ssa基因和mecA基因,以期建立一种快速准确地检测阳性血培养瓶中S.aureus的方法.
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免疫捕获法多重PCR技术检验和鉴定霍乱弧菌
[目的]应用免疫捕获法和多重PCR技术检测霍乱弧菌,探讨其方法的敏感性与特异性.[方法]霍乱弧菌McAb包被微量PCR管,捕获标本中霍乱弧菌;裂解后用多重PCR检测菌体抗原和肠毒素的编码基因,以检测霍乱弧菌.[结果]用凝胶电泳法,检出限低于100 cfu/ml,可直接检测霍乱弧菌的血清群别和肠毒素基因(ctx),扩增片段序列与引物设计模板一致.[结论]该方法敏感性高、特异性好、简便快捷,适于各种标本霍乱弧菌的快速检测方法.
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相思子毒素磁性纳米颗粒免疫捕获法的建立
目的 建立一种灵敏度高,特异性强的相思子毒素(abrin)检测方法.方法 使用包被abrin单克隆抗体(mAb)7D1的Fe3O4磁性纳米颗粒(MNP)和辣根过氧化物酶标记的abrin单克隆抗体(HRP-mAb),建立了abrin的免疫捕获检测法.同时将方法结果和传统双抗体夹心ELISA进行系统比较.结果 本方法的线性范围为2.5 ~ 60 ng/mL,检测限为2.5 ng/mL,线性回归方程为y =0.012x-0.015.蓖麻毒素对检测结果无干扰,表明方法特异性良好.该方法能用于污染水样、饮料、牛奶等基质中abrin的检测,相对标准偏差为5.18% ~ 8.67%,具有较好的重现性.与建立的双夹心ELISA相比,提高了检测灵敏度,减少了反应时间.结论 成功建立了免疫捕获法检测abrin,适用于微量abrin样品的分析.