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亳菊POD酶的酶学特性研究
酶促褐变是导致花类药材品质裂变的主要原因之一.菊花采收加工过程中,处理不当易发生褐变,严重影响菊花的外观和质量.POD(Peroxidase)酶是引起新鲜菊花酶促褐变的一类氧化还原酶.该实验对菊花POD的酶学特性进行了研究,分别考察了不同反应底物种类和浓度、pH缓冲液反应体系以及反应温度对POD酶活性的影响.研究结果表明:亳菊POD酶的佳底物为愈创木酚,亳菊POD酶的适底物浓度为50 mmol·L-1,适反应pH 4. 4,适反应温度在30～35 ℃.亳菊POD酶促反应动力学符合米氏方程,Km=0. 193 mol·L-1,Vmax=0. 329 D·min-1.此外,POD酶热稳定性考察结果表明,80 ℃高温处理4 min或者100℃高温处理2 min,均可抑制亳菊POD酶的活性.以上研究结果对揭示菊花酶促褐变机制、控制酶促褐变及提升菊花药材的品质具有现实意义,同时也可为多酚类药材的采收加工提供依据.
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前列腺素E2合酶的研究进展
目录一、前列腺素E2合酶的分类二、胞质型前列腺素E2合酶三、膜结合型前列腺素E2合酶-1(mPGES-1)(一)mPGES-1的结构及酶学特性(二)mPGES-1与COXs偶联(三)mPGES-1的生理及病理生理作用四、膜结合型前列腺素E2合酶-2五、μ族谷胱甘肽S转移酶六、展望
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漆酶纯化及部分性质研究
目的:研究三色革裥菌(Lenzites tricolor)所产漆酶的纯化及其部分酶学特性.方法:利用盐析、层析等方法纯化漆酶;测定漆酶的活力及不同金属离子对其的影响.结果:培养第6d时生长快,漆酶活力强.层析缓冲体系应选择:缓冲液Na2HPO4-C6H8O7;pH值5.0;反荷离子强度范围0.4~0.5 mol/L较合适.漆酶的Km值约为60.4 μmol/L.Na+ 、Ba2+对漆酶活力无明显影响,Cu2+、Mn2+、Zn2+、Mg2+对漆酶有不同的抑制作用,而Ca2+对漆酶有明显的激活作用.经75% (NH4)2SO4盐析、Sephadex G-150层析后得到较好的纯化漆酶.结论:三色革裥菌所产漆酶经盐析、层析得到较好的纯化效果,不同金属离子对漆酶活力具有不同的影响.
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免疫捕获乳酸脱氢酶活性测试在恶性疟诊断中的初步应用
近来发现,疟原虫乳酸脱氢酶(LDH)与宿主红细胞LDH在理化、免疫学特性和酶学方面差异较大.在催化乳酸生成丙酮酸的反应中,疟原虫LDH能迅速利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)类似物3'-乙酰吡啶NAD(APAD)作辅酶,而红细胞LDH在存在时参与反应速率较慢[1,2].这一特性为利用疟原虫LDH活性检测疟原虫提供了依据.另外,基于疟原虫LDH为检测靶抗原的免疫层析试剂盒-OptiMAL法,其实验室和现场检测均作了评估,与传统镜检法相比,其诊断恶性疟的敏感性和特异性分别为88%和99%,对间日疟分别为94%和100%[3].因此,疟原虫LDH具有重要的诊断应用价值.本研究利用业已制备的抗恶性疟原虫LDH单抗[4],结合其酶学特性,建立检测恶性疟原虫的免疫捕获LDH活性测试法,评价其疟疾诊断应用价值.
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紫杉二烯合成酶
紫杉二烯合成酶是第一个被详细研究和目前所发现的重要的紫杉醇合成代谢酶,它催化紫杉醇生物合成途径中的第一个定向的、慢速的步骤,然而该步骤并非限速步骤.文章综述了紫杉二烯合成酶的酶学特性、催化机理、cDNA克隆和表达,以及对紫杉醇合成代谢通量的影响等方面的研究进展,指出紫杉醇生物合成途径中的限速步骤位于距环化步骤较远的下游处.
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脂肪酶微乳液的凝胶固定化研究
系统研究了由正庚烷、水、琥珀酸二辛酯磺酸钠(AOT)所构成的油包水微乳液的百分组成、pH值、[H2O]/[AOT]的比值(ω0)等对以此微乳液为基底的明胶固定化脂肪酶的活性及机械强度的影响,制备出了具有超高活性的微乳液凝胶固定化脂肪酶.此外,还对固定化酶的一些酶学特征进行了初步表征.佳酶活对应的pH为7.17,ω0为16左右.在恒定ω0值下,酶活随AOT百分比的增加而提高,但机械强度正好相反.酶以酶粉形式直接加入微乳液中所得固定化酶的活性要比酶以酶液形式加入到AOT的正庚烷中所得的活性要高.微乳液凝胶固定化脂肪酶的活力大约是水固定化酶的10倍,且在4℃下其活性半个月内无明显变化.对中长链的脂肪醇或酸同系物,该固定化酶所显示出的底物选择性差异不大.
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里氏木霉β-葡萄糖苷酶的研究进展
本文系统介绍里氏木霉β-葡萄糖苷酶的概况、酶学特性、结构、催化机理,以及近年国内外的应用现状和研究前景.
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棘托竹荪锰过氧化酶酶学特性及其分布特征研究
以愈创木酚为底物,采用分光光度法,对棘托竹荪锰过氧化物酶酶学特性及不同生长期不同组织中锰过氧化物酶的分布进行研究.结果 表明:棘托竹荪锰过氧化酶适反应pH为4.5,适反应温度为50℃;棘托竹荪菌盖中锰过氧化物酶含量高,菌托中低;棘托竹荪菌盖锰过氧化物酶提取液的适pH为6.0.
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中药菊花过氧化物酶酶学特性及炮制工艺的研究
目的 探讨中药菊花过氧化物酶酶学特性及炮制工艺.方法 以愈创木酚为底物,采用分光光度法测定菊花过氧化物酶的酶学特性,并比较不同加工工艺下菊花过氧化物酶学特性及总黄酮含量.结果 菊花反应时间不宜超过2 min,适pH 7.0,适温度36℃,100℃处理30 s后,过氧化物酶活性完全丧失.过氧化物酶催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数Km=1.58×10-2 mol/L,Vmax=14.278 U/min.四种炮制工艺比较过氧化物酶的抑制效果为水蒸汽>微波干燥>80℃热风干燥>自然阴干.分光光度计法测定样品总黄酮含量,蒸制干燥>微波干燥>80℃热风干燥>自然阴干.结论 菊花过氧化物酶适应温度范围广,20~80℃,相对耐热性好.本研究可为中药菊花炮制工艺的改善提供理论参考.
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蛇毒纤溶酶的性质及应用研究
蛇毒中含有许多不同生物活性的酶类,包括金属蛋白酶、凝血酶、丝氨酸蛋白酶、磷脂酶、磷酸二酯酶、透明质酸酶、精氨酸酯酶等.其中,在蝰亚科、蝮亚科和眼镜蛇科等蛇毒中存在着一类能直接溶解纤维蛋白(原)的酶,称为纤维蛋白(原)溶酶(简称纤溶酶,Fibrinolytic enzyme,FLE)[1].纤维蛋白原是由Aα、Bβ、γ三对肽链组成.纤维蛋白则是A、 B两对肽链从Aα、Bβ两对肽链上水解下来后,剩下的(αβγ)2通过氢键聚合形成的不溶性纤维蛋白多聚体.纤溶酶对两者都有水解作用.自1976年Ouyang和Huang首次从尖吻蝮蛇毒中获得纯化的纤溶酶以来,迄今已从不同科属的至少15种蛇毒中获得了25种以上的纯化纤溶酶,并对其分子结构、酶学特性及出血活性的关系进行了深入的研究[2,3].纤溶酶是一种具有溶栓、抗栓等作用的药物,已成为蛇毒蛋白领域的一个研究热点.
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立止血的酶学特性及其作用机理
立止血是从蛇毒中分离得到的、以止血作用为主的酶制剂.其中含有两种成分:巴曲酶(Batroxobin),亦称巴特罗酶(Batroase)、爬虫酶(Reptilase),及微量的凝血因子X脂依赖性激活剂(Phospholipid-depending Factor X Activator,FXA,简称X因子激活物)[1,2].由于立止血具有速效、高效、长效、安全、方便且不受血浆凝血酶抑制剂影响的诸多优点,因而广泛用于治疗和预防各种出血性疾病.本文将就其酶学特性及作用机理作一综述.
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米黑毛霉UV-LiCl-6凝乳酶酶学特性研究
以米黑毛霉凝乳酶为研究对象,研究反应温度、pH值、脱脂乳浓度、金属离子对凝乳酶活力的影响.结果表明,米黑毛霉凝乳酶适反应温度为75℃,在35℃~45℃稳定性较好;米黑毛霉凝乳酶的适pH值为6.0,在pH值为7.0~10.0时较为稳定;脱脂乳浓度为20.0%时,相对凝乳酶活力达到大值;Mn2+、Mg2+、Na+对凝乳酶的凝乳活力有促进作用,K+、Sn2+、Cu2+对凝乳酶的凝乳活力有抑制作用.
