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自拟补肾清心汤治疗肾虚型卵巢功能早衰临床研究
目的 评价自拟补肾清心汤治疗肾虚型卵巢功能早衰(premature ovarian failure, POF)的疗效.方法 将符合入选标准的120例POF患者采用随机数字表法分为2组,每组60例.对照组采用激素替代疗法治疗,观察组口服自拟补肾清心汤.2组均治疗3个月,随访3个月.采用全自动化学发光仪检测血清雌二醇(estrogen, E2)、黄体生成素(luteotropic hormone, LH)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH),观察治疗前后症状、体征的变化,评价临床疗效.结果 观察组总有效率为86.7%(52/60)、对照组为60.0%(36/60),2组比较差异有统计学意义(x2=9.588,P=0.002).治疗后及随访期间,观察组腰膝酸软、畏寒肢冷、情志不舒、多梦盗汗的改善情况明显优于对照组(x2值分别为16.464、16.214、11.525、9.938,P值均<0.001).治疗后,观察组血清E2[(88.32±9.35)pmol/L比(62.10±7.22)pmol/L,t=17.848]水平高于对照组,血清 FSH[(32.33±4.60)U/L 比(46.82±5.47)U/L,t=15.704]、LH[(24.80±3.37)U/L 比(32.16±4.02)U/L,t=10.868]水平低于对照组(P<0.01).随访3个月,观察组复发率为3.8%(2/52)、对照组为16.7%(6/36),2组比较差异有统计学意义(x2=4.231,P=0.040).结论 自拟补肾清心汤可有效缓解POF患者的临床症状,改善血清性激素水平,调节内分泌,恢复卵巢功能.
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桃核承气汤治疗子宫内膜异位症89例临床疗效观察
子宫内膜异位症是妇科常见病,指具有生长功能的子宫内膜组织,出现在子宫腔被覆黏膜以外的其他部位.一般认为与卵巢的周期性变化有关.抑制卵巢孕三烯酮具有较强抗孕激素及弱雄激素活性,可抑制子宫内膜使异位病灶萎缩消失[1,2],但长期服用副反应多.2003年12月至20l0年8月,我院探讨用桃核承气汤为主治疗子宫内膜异位症,取得较好效果,现报告如下.
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针灸配合推拿治疗慢性附件炎疗效观察
附件炎是致病微生物侵入生殖器官后引起输卵管、卵巢感染的常见疾病。临床常表现为下腹坠胀、疼痛，或痛连腰骶部，伴低热、易疲劳，白带增多，月经不调，甚至不孕等。笔者采用电针配合推拿治疗慢性附件炎，现报告如下。
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调周法在治疗不孕症中的临床用药经验
不孕症在我国的发病率约为7%～10%，其中女性因素约占40%，排卵障碍者占25%～35%[1]。卵巢功能异常的不孕症患者经间期顺利受孕不仅需要行经期除旧生新、经后期顺利阴长，更需要经前期阳长充足以养胎，故质量好的胚胎顺利形成需要4期时间。所以调周法[2]在不孕症中的应用较为重要。20世纪60年代夏桂成教授即对月经周期及调周法有所认识，70年代中期开始用中药周期治疗，80～90年代通过对调周法的运用和探讨不断深入，将月经周期分为行经、经后、经间、经前4期，直至后来的经后初期、经后中期、经后末期、经间排卵期、经前前半期、经前后半期、行经期，形成卓有特色的见解。张晓甦老师从事妇科临床30余年，在治疗卵巢功能异常不孕症方面积累了丰富经验，并形成注重心肝脾肾、用药归经、用药平和及根据患者体质用药等独到的调周用药特点。现将张老师的用药经验介绍如下。
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中药干预对长期力竭运动大鼠卵巢细胞 ER 、PR 的影响
目的：观察中药对长期力竭运动大鼠卵巢 ER、PR的影响。方法将动情周期正常的36只3月龄SD雌性大鼠随机分为安静对照组、运动组、中药干预组（各12只）。运动组、中药干预组每日进行一次力竭游泳运动训练，同时中药干预组每日灌喂中药，安静对照组、运动组每日灌喂蒸馏水。运动训练5周后取大鼠卵巢组织，用免疫组织化学法和图像分析仪定量分析卵巢细胞 ER、PR表达情况。结果与安静对照组相比，运动组大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞上 ER、PR表达都明显降低（ P＜0.01/P＜0.05）；中药干预组大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞上 ER、PR则比运动组明显升高（P＜0.05），与安静对照组大鼠无统计学差异（P＞0.05）。结论中药能防止长期力竭运动对卵巢 ER、PR的表达的抑制作用。
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养肝和血方对初老雌性大鼠卵巢Bcl-2和Bax表达的影响
目的 探讨养肝和血方对初老雌性大鼠卵巢Bcl-2和Bax表达的影响,并以此论证在围绝经前期从肝论治的思想.方法 通过阴道细胞学观察,选择10～11个月龄自然衰老雌性大鼠30只,随机分为模型对照组、六味地黄汤组、养肝和血方组,另选4个月龄的雌性大鼠10只为青年对照组.灌胃3周后,采用免疫印迹法(Western-blot法)检测各组大鼠卵巢细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 与模型对照组、六味地黄汤组比较,养肝和血方组卵巢细胞Bcl-2蛋白表达明显增高,Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2/Bax比值增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 养肝和血方有抑制初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡作用,可能是养肝和血方延缓卵巢衰老的机制之一.
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柴胡疏肝散对围绝经期综合征肝郁大鼠卵巢雌激素受体基因表达的影响
目的：探讨柴胡疏肝散对围绝经期肝郁大鼠卵巢雌激素受体（estrogen receptor，ER）基因 ERα和 ERβ表达的影响，探讨柴胡疏肝散治疗围绝经期综合征的作用机制。方法24只13月龄雌性自然衰老的围绝经期 SD 大鼠被随机分为围绝经期对照组（n =8）、围绝经期模型组（n =8）、柴胡疏肝散干预组（n =8），另取3月龄青年雌性大鼠做青年对照组（n =8）。利用慢性束缚法造围绝期综合征肝郁证模型，造模期间药物干预组给予柴胡疏肝散，其余各组大鼠给予生理盐水，连续灌胃共21 d。采用实时荧光定量 PCR 法检测卵巢雌激素受体 ERα和 ERβ的表达。结果 ERα和 ERβ mRNA在各组大鼠的卵巢组织中均有表达，但 ERα的表达略高于 ERβ。与青年对照组比较，围绝经期对照组的 ERα、ERβ mRNA 表达差异无统计学意义（P ﹥0.05）。与围绝经期对照组比较，围绝经期模型组的 ERα、ERβ mRNA 表达显著下调（P ﹤0.05），而柴胡疏肝散干预组显著提高（P ﹤0.01）。结论柴胡疏肝散可能通过使雌激素受体基因表达上调，增强雌激素受体效应，而对围绝经期肝郁起改善作用，可能是其治疗围绝经期肝郁的作用机制之一。
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韩氏妇科诊治卵巢早衰之经验刍议
龙江韩氏妇科流派是传统的师承教育与院校教育相结合的典型代表，韩氏传人在中医妇科领域苦心孤诣钻研多年，形成了自己独树一帜的诊治思路。卵巢早衰是以雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病，中医学中无卵巢早衰病名，韩氏据其临床表现将其归于“血枯”“闭经”“不孕”等范畴。韩氏认为卵巢早衰的发生与肾气-天癸-冲任-胞宫轴作用失衡密切相关，就脏腑而言，肾虚是导致卵巢早衰的根本，脏腑之间功能失调、气虚血瘀则是导致卵巢早衰的重要因素。因此在卵巢早衰诸多复杂多变的证型之中，肾虚血瘀者为常见，针对此证型，应施以补肾填精、活血调经之法治之，自拟经验方补肾活血调冲汤。韩氏又经潜心研究发现，膏方的运用实乃治疗本病之良策，故开北方之先河，在北方大力普及膏方的应用，收效甚好。
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养精种玉汤对胰岛素抵抗卵泡影响的实验研究
目的 观察养精种玉汤复方水溶液对过多雄激素诱导的胰岛素抵抗(IR)卵泡胰岛素受体底物-1(IRS-1)和葡萄糖转运体-4(GLUT4)蛋白的影响,从而初步探讨其改善卵泡IR的机制.方法 收集新鲜猪卵泡,经250 μM丙酸睾酮(TP)作用48 h后,检测培养液上清残糖量,评估构建IR卵泡模型是否成功.采用蛋白印迹(Western Blot)检测IRS-1和GLUT4蛋白在正常组、抵抗组和复方组中的变化.结果 250 μM的TP刺激48 h后,卵泡培养液上清残糖较正常组升高了29%(P＜0.05).当卵泡产生IR后,其IRS-1与GLUT4蛋白表达量较正常组分别降低了74%与95%(P＜0.05).然而加入养精种玉汤复方作用后,复方组IRS-1与GLUT4蛋白表达量较抵抗组分别升高了2倍与5倍(P＜0.05).结论 过多雄激素可以使卵泡产生IR,而养精种玉汤能够上调产生胰岛素抵抗卵泡IRS-1与GLUT4蛋白的表达,这可能是其改善IR的机制.
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针刺对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗大鼠生殖内分泌及磷酸化蛋白激酶B蛋白表达的影响
目的:研究针刺对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR)大鼠生殖内分泌激素及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的影响,探讨针刺改善PCOS-IR的作用机制.方法:雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、二甲双胍组、针刺组,每组8只.采用背部皮下注射脱氢表雄酮建立PCOS-IR模型.针刺组针刺双侧"肾俞""胰俞""子宫""三阴交""丰隆"及"关元"穴,提插捻转5 min;二甲双胍组给予二甲双胍溶液(100 mg/kg)灌胃,两组均每日治疗1次,连续治疗28 d.采用HE染色观察卵巢组织变化;ELISA法检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)水平及空腹胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);Western blot法检测卵巢组织Akt和p-Akt蛋白表达情况.结果:与正常组比较,模型组卵巢呈多囊样改变,闭锁卵泡增多,未见黄体分布,且模型组血清FSH、E2明显降低(P<0.01),血清LH和T水平明显升高(P<0.01),FINS水平和HOMA-IR值升高(P<0.01),卵巢组织Akt和p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05).与模型组比较,针刺组和二甲双胍组可见不同发育阶段的卵泡及少量黄体,血清FSH、E2水平明显升高(P<0.01),血清LH、T水平明显降低(P<0.05,P<0.01),FINS水平及HOMA-IR值降低(P<0.01),卵巢组织Akt和p-Akt蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01).针刺组和二甲双胍组各指标的差异无统计学意义(P>0.05).结论:根据中医生殖轴选取的穴位针刺可以改善PCOS-IR大鼠生殖内分泌水平以及IR情况,这可能与针刺对卵巢组织p-Akt蛋白表达的调控有关.
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去卵巢致肾虚的腰椎间盘退变模型的实验研究
目的:观察去前肢卵巢对大鼠腰椎间盘和椎体骨密度的影响,建立大鼠肾虚型腰椎间盘退变模型,探讨椎间盘退变的内在机制、椎间盘退变和骨质疏松之间的关系.方法:选择1月龄雌性SD大鼠30只,随机分为正常对照组、腰椎间盘退变组、肾虚型腰椎间盘退变组(复合模型组),每组10只.腰椎间盘退变组大鼠去除双前肢,肾虚型腰椎间盘退变组大鼠在去除双前肢3个月后,再去除双卵巢.8个月后,通过Micro-CT扫描观察椎体骨密度,藏红O-快绿染色法观测椎间盘组织形态学改变,免疫组织化学法观察Ⅱ、X胶原在椎间盘中的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞外基质相关基因的表达,以评价去除双前肢和双卵巢对椎间盘退变和椎体骨密度的影响.结果:Micro-CT扫描发现,肾虚型腰椎间盘退变组动物椎体骨质疏松明显;藏红O-快绿染色法显示椎间隙变窄,肾虚型腰椎间盘退变组椎间盘组织退变明显,软骨板发育不全;免疫组织化学染色显示肾虚型腰椎间盘退变组相对于正常对照组,椎间盘内X型胶原表达增加,Ⅱ型胶原表达降低;RT-PCR分析发现,腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)基因的表达较正常对照组低,3组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组聚集蛋白聚糖(aggrecan-1,Agc1)基因的表达较正常对照组低,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组X型胶原(typeX collagen,Col10al)基因的表达较正常对照组高,差异无统计学意义;肾虚型腰椎间盘退变组基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的表达较正常对照组和腰椎间盘退变组高,3组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组聚集蛋白聚糖降解酶2(aggrecanase-2,ADAMTS-5)基因的表达较正常对照组高,差异有统计学意义(P=-0.006,P=0.008).结论:采用去双前肢和去卵巢的方式建立的大鼠腰椎间盘退变模型,出现了肾虚“骨象”——骨质疏松,并在组织形态学、分子细胞生物学等方面的表现与临床肾虚型腰椎间盘退变更加相似.
关键词： 腰椎 椎间盘 卵巢 大鼠 Sprague-Dawley -
养精种玉汤对过多雄激素诱导卵泡胰岛素抵抗的影响
目的:通过观察养精种玉汤对过多雄激素诱导卵泡胰岛素抵抗的影响,初步探讨其促卵泡发育的机制.方法:体外培养猪卵泡,经过多雄激素作用48 h后,检测猪卵泡对葡萄糖的摄取量和卵泡培养液上清残糖量.分别检测正常组、抵抗组和复方组卵泡胰岛素受体底物-1(IRS-1)和葡萄糖转运体4(GLUT4)蛋白表达水平以及卵泡培养液上清残糖量.结果:过多雄激素作用48 h后,卵泡对葡萄糖的摄取量较正常组下降39.56％ (P＜0.01),卵泡培养液上清残糖较正常组升高29.08％ (P ＜0.01).当卵泡胰岛素抵抗时,IRS-1与GLUT4蛋白表达量较正常组分别降低74％与94.56％ (P ＜0.01)；加入养精种玉汤复方改善胰岛素抵抗后,复方组IRS-1与GLUT4蛋白表达量较抵抗组分别升高2倍与5倍(P＜0.01),卵泡培养液上清残糖较抵抗组降低33.6％(P＜0.001).结论:过多雄激素能诱发卵泡胰岛素抵抗,养精种玉汤能改善卵泡胰岛素抵抗,其机制与IRS-1与GLUT4表达量有关.
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大黄水提物对成年大鼠子宫及卵巢的影响
目的:观察长期灌胃大黄对雌性大鼠子宫及卵巢的影响.方法:8周龄180 ～ 220 g雌性Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组、大黄水提取物1.0,2.0 g·kg-1组、各剂量组再分为灌胃30,40,50,60 d组,每组10只,计算大鼠子宫、卵巢指数,观察子宫和卵巢的组织形态学变化.结果:大黄水提取物1.0 g·kg-1给药60 d组子宫和卵巢指数分别为(0.21 ±0.058),(0.07 ±0.001),均显著低于正常对照组(0.26±0.038),(0.07±0.007)(P＜0.05);大黄水提物2.0 g·kg-1给药40,50,60 d组子宫指数分别为(0.20 ±0.045),(0.19±0.054),(0.19±0.041),显著低于正常对照组(0.26±0.038)(P＜0.05或P＜0.01),大黄水提物2.0 g·kg-1给药30,40,50,60 d组卵巢指数分别为(0.068±0.008),(0.065±0.007),(0.065±0.005),(0.061±0.006),均显著低于正常对照组(0.07±0.007)(P＜0.05或P＜0.01);组织形态学显示,2.0 g·kg-150,60 d组大鼠子宫内膜水肿,腺体减少;卵巢萎缩,卵泡数减少,卵泡内细胞排列不规则.结论:长期应用大黄可影响成年雌性大鼠的生殖功能,并有明显的剂量/时间依赖关系.
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中药益坤宁对围绝经期大鼠卵巢血管内皮生长因子表达的影响
目的:观察中药益坤宁对围绝经期大鼠卵巢血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:采用自然老化法建立围绝经期大鼠模型.选择处于围绝经期的雌性Wistar大鼠(12～14月龄)30只,随机分为老年对照组、西药对照组和中药实验组,分别以生理盐水、利维爱和益坤宁灌胃4周;另取5月龄大鼠10只作为青年对照组,生理盐水灌胃4周.通过免疫组化观察大鼠卵巢VEGF蛋白质的表达确切部位;Western Blot定量检测大鼠卵巢VEGF蛋白质的表达;RT-PCR检测各组大鼠卵巢VEGF mRNA的表达.结果:VEGF蛋白主要表达于卵巢的黄体细胞中,老年对照组大鼠卵巢的VEGF表达明显高于青年组,中药实验组大鼠卵巢VEGF表达明显下降;青年对照组、中药实验组和西药对照组VEGFl64和VEGF120的mRNA表达量均低于老年对照组(P<0.05),此结果与VEGF蛋白表达的结果相一致.结论:益坤宁能够下调围绝经期大鼠卵巢VEGF mRNA及蛋白的表达,这可能是其治疗围绝经期综合征的机制之一.
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抗生素、超短波联合血府逐瘀胶囊治疗慢性盆腔炎
慢性盆腔炎是临床妇科多发病,由于急性盆腔炎未能彻底治疗或因患者体质较差、病程迁延则容易转为慢性盆腔炎,常累及子宫、输卵管、卵巢等,并可波及腹膜.临床主要表现为月经紊乱、白带增多、腰腹疼痛及不孕等,如已形成慢性附件炎,则可触及肿块[1-2].该病严重影响着妇女的身心健康.本文应用抗生素、超短波联合血府逐瘀胶囊治疗慢性盆腔炎,取得了不错的疗效.
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加味保阴煎治疗功能性子宫出血62例
功能失调性子宫出血,简称"功血",是妇科常见病,多发于青春期和更年期妇女,是由下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴功能失调所致,中医属"崩漏"范畴,也可见于"月经过多"、"经期延长"病证中.轻者阴道出血淋漓月余难净,重者势如注下,迅即造成失血性贫血,给妇女带来难以启齿的痛苦.笔者近年来采用自拟加味保阴煎,滋阴清热,益气摄血为主治疗功血62例,疗效满意,现报告如下:
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子宫发育不良动物模型制备规范(草案)
子宫发育不良是妇科常见疾病,多因发育过程相关激素低下导致,主要表现为经迟、月经稀少、痛经、甚至发展为闭经,婚后常表现为不孕等.现子宫发育不良模型为病理性模型,以西医指标为主.在基于对子宫发育不良中西医临床病证特点分析及大量动物实验研究基础上,形成了子宫发育不良模型制备规范(草案).
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加味三才饮对老年雌性大鼠性激素水平及GSH-PX活性、SOD活性、MDA含量的影响
加味三才饮是河北省人民医院中医科刘秀芬主任医师多年临床的经验方,具有益肾填精、补气养血、调理阴阳之功效,用于治疗肾精渐衰、冲任亏虚、阴阳失调所致绝经前后诸证疗效颇佳.实验研究表明,加味三才饮可明显升高老年雌性大鼠血清雌二醇(E2)、催乳素(PRL)含量,降低孕酮(P)、卵泡刺激素(FSH)含量,改善老年雌性大鼠内分泌状况;可明显升高老年雌性大鼠血清谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低血清丙二醛(MDA)含量,提高老年雌性大鼠抗氧化能力,有效延缓衰老,现报道如下.
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补肾调经方对雄激素致不孕大鼠卵巢组织抗氧化的实验研究
无排卵是不孕症、闭经、功血、多囊卵巢综合征等多种妇科疾病共同的病理现象,其发病机制不明.虽有众多学者从多方面进行了研究,但目前尚未查见无排卵与氧化损伤、抗氧化能力方面的研究报道.本实验旨在通过研究雄激素致不孕大鼠(ASR)、正常大鼠及应用补肾调经方后ASR卵巢组织丙二醛(MDA)水平、总抗氧化能力(T-AOC)的变化情况,探讨排卵障碍时卵巢氧化损伤、抗氧化损伤能力情况及补肾调经方对其的影响.
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电针干预对卵巢低反应患者体外受精胚胎移植的影响
目的:观察卵巢低反应或储备下降患者体外受精(IVF)过程中进行电针干预对卵细胞质量及妊娠结局的影响.方法:将接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的60例卵巢低反应或储备下降患者随机分为观察组和对照组,每组30例.两组均给予拮抗剂方案促排卵,观察组加用电针干预,穴取关元、太溪、三阴交等,比较两组疗效.结果:两组患者治疗前各项指标无明显差异.治疗后观察组肾虚症状改善明显,绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日血清雌二醇(E2)水平、受精率、卵母细胞成熟率、优质胚胎率、种植率均优于对照组(均P＜0.05);观察组卵泡液和血清中干细胞因子(SCF)水平均明显高于对照组(均P＜0.05);观察组与对照组相比,临床妊娠率高而流产率低,但组间差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论:电针干预对卵巢储备下降的IVF患者有良好的临床效果,可提高卵细胞质量及妊娠结局.
