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不同粒径的人参总皂苷脂质体的制备
目的 制备不同粒径的人参总皂苷脂质体(TSPG).方法 以薄膜分散法为主,采用超声法、加入吐温-80、泊洛沙姆、PEG-4000、PEG-6000等方法制备不同粒径的人参总皂苷脂质体.结果 超声法、加入吐温-80、泊洛沙姆、PEG-4000、PEG-6000等能获得不同粒径的脂质体.结论 脂质体粒径的意义必须结合包封率和载药量同时判断才有意义.
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人参总皂苷脂质体的制备及质量评价
目的 制备人参总皂苷(TSPG)脂质体,并进行质量评价.方法 采用薄膜分散法、逆相蒸发法、乙醇注入法制备TSPG脂质体,以形态、包封率、载药量为指标筛选制备方法.结果 薄膜分散法制备的TSPG脂质体外形规则、光滑、不黏连,包封率、载药量分别为38.70%、3.14%,较其他方法好.结论 薄膜分散法制备的TSPG脂质体达到预期目标.
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人参总皂苷调控NK细胞活性促进5-氟尿嘧啶抗肿瘤的作用
目的 探讨人参总皂苷(TSPG)调控NK细胞活性促进5-氟尿嘧啶抗肿瘤的作用机制.方法 建立小鼠肝脏原位移植瘤模型,随机分为模型组、TSPG组、5-Fu组及TSPG+5-Fu组,给药观察14d.实验结束分离肝脏并剥离肿瘤,计算肿瘤体积、肿瘤质量、抑瘤率;应用HE染色观察肿瘤组织病理变化;采用免疫组化检测NK细胞在肿瘤组织中的浸润情况;通过流式细胞技术检测肝脏、脾脏中NK细胞含量;应用实时定量PCR检测肿瘤组织中穿孔素、颗粒酶B的mRNA表达水平.结果 与模型组比较,各给药组肿瘤体积及质量均显著降低(P＜0.05),肿瘤组织出现明显坏死;TSPG组NK细胞在肿瘤组织浸润增加(P＜0.05);TSPG组与TSPG+ 5-Fu组肝脏、脾脏中NK细胞的含量均升高(P＜0.05),肿瘤组织中穿孔素、颗粒酶B的mRNA表达水平亦升高(P＜0.05).结论 TSPG可以增强5-Fu抗肿瘤的作用疗效,其机制可能与TSPG提高荷瘤小鼠体内NK细胞的数量及杀伤活性有关.
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人参总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经血管单元的保护作用
目的：研究人参总皂苷对缺血再灌注大鼠脑组织高迁移率族1（HMGB1）表达的影响，探讨人参总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经血管单元的保护作用。方法96只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和高、低剂量治疗组，正常组只暴露一侧颈总动脉后缝合，不予任何处理；模型组和人参总皂苷高、低剂量治疗组应用改良线栓法制备成功后立刻分别应用相应药物腹腔注射，在1d，3d，5d，7d时间点分别取脑组织，通过HE染色观察神经损伤程度，免疫组化的方法检测HMGB1的表达变化。结果人参总皂苷高、低剂量组HMGB1蛋白表达较模型组明显减少（P均＜0．05），人参总皂苷高、低剂量组HMGB1蛋白表达比较有显著性差异（P均＜0．05）。结论人参总皂苷通过抑制HMGB1/RAGE/ICAM-1途径缓解缺血再灌注造成的血脑屏障的损害，在一定范围内抑制HMGB1的表达，随剂量的加大抑制幅度增加，从而降低炎症反应，抑制脑缺血再灌注周围神经细胞凋亡，促进细胞代谢，对脑缺血再灌注大鼠大脑起保护作用。
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脉脂康胶囊制备工艺研究
目的:确定脉脂康胶囊的佳提取工艺.方法与结果:采用水蒸气蒸馏法对当归、川芎进行挥发油提取.通过正交试验考察山楂、人参的乙醇提取条件及药渣与制何首乌的水煎煮提取条件,以人参总皂苷含量为指标,对乙醇提取工艺参数进行优选,得到佳提取工艺为:山楂、人参使用5倍量750 g/L乙醇,加热回流提取0.Sh.制何首乌与剩余药渣加水,以二苯乙烯苷含量为指标,对水煎煮工艺参数进行优选,得到佳煎煮工艺为:何首乌等加水煎煮2次,每次2h.佳浓缩方式为水煎煮提取液和乙醇提取液后,分别单独浓缩、烘干.结论:确定了合理、可行的脉脂康胶囊制备工艺.
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石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠乙酰胆碱转移酶、胶质纤维酸性蛋白和海马组织病理形态学的影响
目的:观察石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠乙酰胆碱转移酶(choline acetyl transferase,CHAT)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和海马组织病理形态学的影响.方法:60只APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠随机分为6组(n=10),即模型组(蒸馏水),人参总皂苷组(75mg· kg-),石菖蒲挥发油组(15 mg· kg-1),联合低剂量组(15 mg·kg-1石菖蒲挥发油联合75 mg·kg-1人参总皂苷),联合中剂量组(30 mg·kg-石菖蒲挥发油联合150 mg· kg-1人参总皂苷),联合高剂量组(60mg·kg-1石菖蒲挥发油联合300 mg·kg-1人参总皂苷).另取10只C57 BL/6小鼠为正常组.正常组和模型组灌胃等体积的蒸馏水,各组连续给药30 d.末次给药结束1h后,麻醉各组小鼠,其中3只灌注固定后的全脑用于HE染色和尼氏体染色,其余小鼠在冰上迅速取出海马用于酶联免疫吸附法(ELISA)检测ChAT及Western blot检测GFAP.结果:与正常组比较,模型组的ChAT水平显著减少(P＜0.01),GFAP表达显著增加(P＜0.01).与模型组、人参总皂苷组和石菖蒲挥发油组比较,联合用药各剂量组的ChAT水平显著增加(P＜0.05),GFAP表达显著减少(P＜0.05).与模型组比较,各给药组的海马CA1区神经元结构清晰和核染较浅,尼氏体有一定程度的染色加深,尼氏体数目有一定程度的增加.结论:石菖蒲挥发油与人参总皂苷联合用药对APP/PS1双转基因AD模型小鼠具有一定的增加ChAT水平、降低GFAP表达和保护海马组织神经元的作用.
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人参总皂苷拮抗C57BL/6N小鼠PTSD样行为作用及机制研究
目的 观察人参总皂苷对小鼠创伤性应激障碍(PTSD)样行为的预防作用并探讨其作用机制.方法 应用不可回避足底电击(IFS)联合情景再现(SR)制备PTSD动物模型,造模前给予人参总皂苷(高剂量50mg/kg、中剂量25 mg/kg、低剂量12.5 mg/kg)7天.造模成功后检测小鼠PTSD样行为(高架十字迷宫、旷场实验);ELISA检测各组小鼠血清皮质酮浓度;分离各组小鼠前额叶皮质(PFC)采用聚合酶链式反应(PCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)在mRNA和蛋白质的水平.结果 行为学结果显示,模型组小鼠与对照组比较呈现显著焦虑和恐惧行为(P＜0.05),人参总皂苷中剂量能够显著改善此种行为变化.同时,模型小鼠前额叶皮质SGK1在mRNA和蛋白质水平较对照组均显著下调(P＜0.05),人参总皂苷中剂量组能够上调其表达.阳性药物安定能够逆转模型小鼠行为学改变,而对SGK1表达无影响.结论 人参总皂苷可以逆转小鼠由IFS联合SR所导致的PTSD样行为学改变,其机制可能通过上调大脑前额叶皮质SGK1表达实现.
关键词： 创伤性应激障碍 人参总皂苷 前额叶皮质 血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1 -
人参总皂苷多克隆抗体的制备和鉴定
目的 进行人参总皂苷(ginseng total saponins,GTS)多克隆抗体的制备,并用不同方法进行验证.方法 首先在D101大孔吸附树脂纯化的基础上,采用阴阳离子交换树脂的方法进行人参皂苷高纯提取物的制备,香草醛-硫酸比色法估测人参总皂苷的含量;然后通过过碘酸钠法构建人参总皂苷和牛血清白蛋白(BSA)的偶联物作为抗原制备得到人参总皂苷多抗;使用ProteinA/G琼脂糖纯化和抗原柱双纯化抗体;后用免疫细胞化学和生物膜层干涉(biological membrane layer interference,BLI)技术验证抗体.结果 得到高纯度的人参总皂苷;SDS-PAGE表明抗原GTS-BSA偶联物制备成功;ELISA法检测受试组效价为(29.52 ±4.31),亲和树脂纯化后得到较纯多抗;生物膜层干涉技术表明人参总皂苷多抗与人参总皂苷、人参皂苷Re、Rg1、Rh1、Rh2、原人参二醇、F1、化合物K、原人参三醇的亲和力分别为3.99×10-7、4.69×10-9、2.59×10-9、2.40×10-6、1.62×10-4、2.64×10-7、1.66×10-10、1.08×10-7和1.32×10-6;免疫细胞化学(ICC)从细胞学水平上验证了抗体的有效性.结论 人参总皂苷多抗的效价和特异性较高,可为下一步研究人参总皂苷在脑中的分布做好铺垫.
关键词： 人参总皂苷 人参总皂苷多抗 酶联免疫吸附测定试验 生物膜层干涉技术 免疫细胞化学 -
化胃舒颗粒中黄芪甲苷和人参总皂苷的测定
目的 分别采用HPLC和紫外分光光度法建立化胃舒颗粒中黄芪甲苷和人参总皂苷的测定方法.方法 黄芪甲苷的测定条件为Kromasil C18色谱柱(4.6×200 mm,5μm)；流动相∶乙腈∶水(37∶ 63)；ELSD条件为漂移管温度105℃,气体流速为3.0L/min；流速:1.0 ml/min;柱温:室温.人参总皂苷采用紫外可见分光光度计在548 nm波长处测定.结果 黄芪甲苷在0.51 ～2.55μg范围内线性关系良好,平均回收率为95.7％,RSD为1.04％.人参总皂苷在27.9～251.1μg范围内线性关系良好,平均回收率为94.5％,RSD为2.72％.结论 该方法重现性好,灵敏度高,可用于化胃舒颗粒的质量控制.
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一年生栽植黄芪中黄芪多糖对人外周血T细胞增殖的影响
目的 观察1年生栽植黄芪中黄芪多糖(APS1)及其与人参总皂苷(TG)联用时对人外周T细胞(hPBTCs)的增殖的影响.方法 采用MTT比色法检测hPBTCs的增殖.结果 APS1在25～100 μg/ml范围内,TG在5～20 μg/ml范围内均促进hPBTCs的增殖,增殖百分率分别为127.8%～144.6%和113.9%～163.1%,APS1与TG在上述浓度范围内联用时,增殖百分率为309.5%～529.5%.结论 APS1明显促进体外培养的hPBTCs增殖,APS1与TG联用可能增加免疫功能,并具有一定的协同作用.
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正交试验法优选人参总皂苷的提取工艺
目的:优选人参的提取工艺.方法:采用正交设计对人参总皂苷提取工艺优化,利用大孔吸附树脂分离方法,以比色法测定了不同工艺提取物中人参总皂苷的含量及浸膏得率.结果:人参总皂苷的佳提取工艺为:60%乙醇,8倍量,提取3次,4 h/次.结论:此法简单、易行,方法重现性好,适用于工业化生产.
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人参总皂苷在高丽参注射液制备过程中的动态变化
目的:测定人参总皂苷在高丽参注射液制备过程中的动态变化,以观察制备工艺的合理性.方法:以人参皂苷Rg1为对照;用比色法测定高丽参注射液在制备过程中人参总皂苷的含量变化.结果:人参总皂苷的提取率为93.58%,成品的人参总皂苷转移率为78.21%.结论:高丽参注射液的制备工艺合理.
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人参总皂苷联合淫羊藿苷对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡的影响研究
目的：研究人参总皂苷联合淫羊藿苷对血管性痴呆大鼠学习记忆、氧自由基及海马CA1区神经细胞凋亡的影响。方法：采用反复夹闭双侧颈总动脉再灌注同时腹腔注射硝普钠方法建立血管性痴呆大鼠模型，连续给药21d后，用八臂电迷宫法判断给药前后大鼠的学习和记忆能力，再进行脑组织SOD、MDA的测定和海马CA1区神经细胞凋亡检测。结果：与假手术组大鼠相比，模型大鼠电迷宫学习和记忆错误次数明显增加(P<0.05)，大鼠造模前后连续灌胃给药21 d后，大鼠上述行为学指标得到明显改善(P<0.05)，脑组织SOD活性提高(P<0.05)和MDA含量降低(P<0.01)，海马CA1区神经细胞凋亡数减少(P<
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强腰健骨膏提取工艺研究
目的 优选强腰健骨膏佳提取工艺.方法 采用正交试验L9(34)法,以D101大孔吸附树脂-比色法对正交试验回流液中人参总皂苷进行含量测定,以浸膏得率和人参总皂苷含量为指标,优选强腰健骨膏中药材提取的佳条件.结果 优选出强腰健骨膏佳提取工艺为:加生药的16倍量85%乙醇,回流2次,每次2h.结论 该提取工艺合理,具有实际应用价值.
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探究人参总皂苷联合氟西汀在心肌梗死大鼠合并抑郁模型中的治疗效果
目的 探讨人参总皂苷(GFS)联合五羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)氟西汀使用对心肌梗死(MI)合并抑郁模型大鼠的治疗效果.方法 SD大鼠左侧开胸永久性结扎左心耳下1～2 mm处冠状动脉左前降支或回旋支制作MI模型;慢性不可控温和应激方法制作抑郁模型. SD大鼠随机均分为对照组、心肌梗死后抑郁组(MI+D组)(2 mL生理盐水灌胃)、氟西汀组(F组)(0.2% 氟西汀按10 mg/kg灌胃)和人参总皂苷+氟西汀组(GFS+ F组)(人参总皂苷按20 mL/kg灌胃+0. 2% 氟西汀按10 mg/kg灌胃) ,每组15只.干预28 d后分别评估大鼠抑郁状态、生存率、心功能、心电生理指标和心肌组织学改变.结果 与对照组比较,M I+D组大鼠的糖水消耗量明显下降,且攀爬次数、爬行距离和爬行速度明显低于对照组;氟西汀与GFS+氟西汀都能明显增加糖水消耗量,增加攀爬次数及爬行距离,GSF+氟西汀的治疗效果优于氟西汀,且GSF+氟西汀同时可提高模型鼠的爬行速度. MI+D组、F组和GFS+F组大鼠之间生存率差异没有统计学意义(P＝ 0.24).与对照组比较,MI+ D组显著增加左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD) 、左心室壁厚度(LVWT ) ,明显降低左心室射血分数(LVEF) 、缩短分数(FS);氟西汀与GFS+氟西汀明显降低模型鼠的LVEDD并提高LVEF ,GFS+氟西汀的效果优于单独使用氟西汀,且GSF+氟西汀同时可降低 LVESD和LVWT .与对照组比较,MI+D组的心室有效不应期(VERP)、动作电位复极90% 时程(APD90)明显延长,心室颤动阈值(VFT)明显降低;氟西汀与GFS+氟西汀明显提高模型大鼠的VFT ,且GFS+氟西汀的效果优于氟西汀,同时GSF+氟西汀可缩短VERP 、APD90 . MI+D组、F组和GFS+F组之间的心梗面积比差异无统计学意义(P＝0.076);氟西汀干预不能改善心梗区心肌厚度及胶原蛋白含量,但GFS+氟西汀明显改善心梗区心肌厚度并提高心梗区的胶原蛋白含量.结论 氟西汀与GFS联合氟西汀都能改善心肌梗死合并抑郁大鼠的抑郁状态、心功能和电生理指标,但GFS联合氟西汀的治疗效果优于单独使用氟西汀,同时GFS联合氟西汀对心肌梗死区心肌厚度和胶原蛋白表达等心脏重构指标也有改善作用.
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九蒸九晒人参质量标准研究
目的:建立九蒸九晒人参的质量标准.方法:采用经验、显微鉴别法对该饮片性状、粉末显微特征进行描述;采用薄层色谱法,分别以人参皂苷Rh4、20S-人参皂苷Rg3及20R-人参皂苷Rg3作为对照,对该饮片进行定性鉴别,检查了水分和总灰分;参考《中国药典》(2015年版)人参总皂苷的方法建立了特征图谱,HPLC条件为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm),乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱,0min(30％A),80min(80％A),检测波长203nm,柱温25℃,流速0.8mL/min,进样量20μL,以20S-人参皂苷Rg3、20R-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rk1和人参皂苷Rg5色谱峰保留时间与人参皂苷Rh4保留时间的比值,确定该饮片特征图谱;采用紫外分光光度法,对该饮片的人参总皂苷含量进行测定.结果:该饮片性状、粉末显微鉴别、薄层鉴别方法具有较好的专属性,水分为6.88％～10.22％,总灰分为3.18％～3.51％,特征图谱方法可靠,人参总皂苷含量为2.4854％～3.0964％.结论:根据实验结果建立了九蒸九晒人参的质量标准,其定性定量方法可靠,结果准确科学,所建标准可以用于九蒸九晒人参的质量控制.
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人参花环纹污白耙齿菌发酵菌质化学成分及抗胃溃疡作用研究
目的:研究环纹污白耙齿菌与人参花共发酵菌质的化学成分变化以及对小鼠胃溃疡的治疗作用.方法:将环纹污白耙齿菌接种于人参花固体培养基中共发酵,获得人参花环纹污白耙齿菌菌质.利用紫外可见分光光度法测定发酵前后人参花菌质多糖和人参总皂苷的含量变化.建立无水乙醇致小鼠胃溃疡模型,观察人参花环纹污白耙齿菌共发酵前后对小鼠胃溃疡的面积以及溃疡抑制率的影响.结果:人参花环纹污白耙齿菌菌质多糖含量＞人参花高压灭菌后多糖含量＞人参花多糖含量;人参花高压灭菌后总皂苷含量＞人参花环纹污白耙齿菌菌质总皂苷含量＞人参花总皂苷含量.人参花、高压灭菌人参花、人参花环纹污白耙齿菌发酵菌质的70％乙醇提取物及人参花环纹污白耙齿菌发酵菌质的水提取物对抑制小鼠胃溃疡有一定疗效.结论:人参花在高压灭菌的过程中增加了多糖和总皂苷的含量,和人参花环纹污白耙齿菌共发酵会使多糖含量增加,但人参总皂苷含量没有显著变化.人参花环纹污白耙齿菌发酵菌质比单独使用人参花治疗胃溃疡的疗效更为显著.
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不同产地西洋参人参总皂苷含量比较
目的:建立西洋参药材中人参总皂苷的含量测定方法,比较不同产地西洋参中人参总皂苷的含量.方法:采用Waters Xbridge TM C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,二元梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为203nm,柱温为25℃.结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1分别在0.3046～1.8276μg、1.222～7.332μg、3.1038～18.6228μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为100.60%.结论:该方法简便、可行、重现性好、结果准确,不同产地西洋参药材中人参总皂苷含量差异较大,其中吉林、辽宁及黑龙江产地的西洋参药材中的人参总皂苷含量相对较高.
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人参叶中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re含量测定
目的:研究人参叶中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re的含量测定方法.方法:采用紫外分光光度法,以人参皂苷Re为对照品,香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色剂,测定人参叶总皂苷的含量;采用HPLC法测定人参皂苷Rg1、Re的含量.结果:人参叶中总皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re分别在25.2~151.2μg、0.510~5.10μg、1.020~10.20μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.53%(RSD=2.00%,n=6),99.02%(RSD=2.07%,n=6)和100.16%(RSD=2.67%,n=6).结论:该方法重复性好,结果准确、可靠,为人参叶的质量控制提供了一定的参考.
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三才降糖颗粒中人参提取工艺研究
目的:建立三才降糖颗粒中人参的佳提取工艺方法.方法:以人参总皂苷含量及干膏率为评价指标,运用正交试验法优选提取工艺条件.结果:通过正交试验,得出三才降糖颗粒中人参的佳提取工艺为70％乙醇,8倍量,提取2次,每次1h.结论:该工艺方法简便实用,适合工业化生产.
