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利用麸皮发酵生产L-乳酸的研究
利用多种酶类将麸皮水解成能被乳杆菌利用的单糖，然后由乳杆菌发酵获取L-乳酸。通过单因素和正交试验得出麸皮酶解佳工艺为：α-淀粉酶用量30U/g、糖化酶90U/g、酸性蛋白酶3U/g、纤维素酶8U/g。
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可吸收椎体内支撑器体内降解研究
目的 探讨三种材料(6%β-TCP/PDLLA,12%β-TCP/PDLLA,纯PDLLA)的可吸收椎体内支撑器(CASP)植入体内的组织相容性及影像学变化,为进一步临床应用提供动物实验的基础.方法 选择60只新西兰大白兔,用三种材料制成CASP分别植入臀大肌内.术后4、8、12、16及24周取出材料,行肉眼观察、组织切片,HE染色.术后4周、8周、12周、24周各时间点摄X线片.结果 三种可吸收材料组织相容性良好,对组织无不良反应;组织学观察结果基本符合正常骨愈合过程,X线显示随时间推移(6%β-TCP/PDLLA,12%β-TCP/PDLLA)出现明显降解,其降解过程与骨折的愈合过程基本符合.结论 三种不同配方的可吸收椎体内支撑器中6%TCP/PDLLA复合材料的组织相容性优于其余两组,12%TCP/PDLLA降解速度快于其余两组.
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新型输尿管支架材料的生物相容性
背景：有研究表明，聚乙烯高分子合成的输尿管支架在体内实验中具有良好的生物相容性，但实验发现其毒副作用，诱导机体产生的炎症、热原、过敏反应均较明显，故对于新研发的L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成的新型输尿管支架在生物相容性、毒副作用、机体炎症反应等方面的探索是实验研究的重点内容。目的：通过对临床上使用的聚乙烯高分子合成输尿管支架和L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成的新型输尿管支架在细胞毒性试验、动物体植入后引起的炎症反应以及过敏反应、热原反应、致死率等生物相容性方面的比较，为临床上引入新型输尿管支架材料提供一定的参考依据。方法：实验分为3组，空白对照组不作任何处理，使用正常培养基培养；新型材料组细胞采用L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成材料浸提液进行培养；聚乙烯组细胞采用聚乙烯浸提液进行培养。结果与结论：活细胞数目检测结果显示，在尿道上皮细胞培养皿中加入两种输尿管支架浸提液后，与空白对照组相比，毒性反应均明显增强(P <0.05)，但两组毒性差异无显著性意义。苏木精-伊红染色结果显示，将两种材料植入大鼠体内2，6周后，肌肉组织均有明显的炎性浸润、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞增加，但植入新型材料组的炎性浸润和组织损伤明显少于植入聚乙烯组(P<0.05)。酶联免疫吸附试验结果显示，植入两种材料6周后，大鼠血清中炎性因子白细胞介素10，23的含量均明显增高(P<0.05)，但植入新型材料组的炎性因子表达量明显低于植入聚乙烯组(P<0.05)。支架植入6周后，新型材料组的大鼠在实验过程中出现过敏反应和热原反应的数量均少于聚乙烯组。结果证实，L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成的新型输尿管支架材料能减少组织对于材料的炎症反应、过敏反应、热原反应，具有比聚乙烯合成材料更好的生物相容性。
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盲襻综合征大鼠D-,L-乳酸和短链脂肪酸的代谢
目的:研究盲襻综合征大鼠血浆D-,L-乳酸和短链脂肪酸代谢的变化. 方法:建立大鼠盲襻综合征模型,将大鼠分为对照组(假手术组)和实验组(盲襻组).于术后第1、2、3和4周分批处死大鼠,取肠液行细菌培养计数,取静脉血进行血常规和生化以及D-,L-乳酸和短链脂肪酸检测. 结果:与对照组比较,实验组大鼠体质量明显减轻,术后4周出现血红蛋白水平下降(P＜0.05),平均红细胞体积增加(P＜0.01),血清总蛋白水平降低(P＜0.01),清蛋白水平降低(P＜0.05).实验组血浆D-,L-乳酸和短链脂肪酸水平随着时间的延长而显著上升,在第4周时均显著高于对照组;肠液菌落数2周后＞1.0×106/mL,4周后达1.1×109 /mL. 结论:盲襻综合征大鼠血浆D-,L-乳酸和短链脂肪酸水平明显升高,能较好地反映肠液菌群的增殖程度.
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3种复合材料的体内相容性比较
目的 观察3种可吸收柱状材料植入动物体内的组织相容性,为临床应用提供依据.方法 选择60只新西兰大白兔,按随机数字表法分成3组,每组20只,雌雄各半,分别将6％β-磷酸三钙(β-TCP)/聚-D,L-乳酸(PDLLA)、12％β-TCP/PDLLA和纯PDLLA 3种可吸收柱状材料植入兔右侧股骨髁及臀外侧肌肉内;左侧为对照组.术后4、8、12、16及24周取出材料进行大体观察和光镜观察.6％β-TCP/PDLLA复合材料行植入前及术后8、16、24周电镜观察.结果 所有动物术后一般情况良好.术后伤口无红肿,均一期愈合,2周内缝线自行脱落.实验周期内无感染、化脓及组织液化.24周时6％β-TCP/PDLLA组柱状材料,部分被新生骨组织吸收替代,骨小梁排列较整齐,可见哈弗管及致密骨形成;12％ β-TCP/PDLLA组柱状材料见大量新生骨组织替代,也可见致密骨形成,但其降解吸收相对较快;纯PDLLA组柱状材料骨组织形成相比另2组成骨量较少.6％ β-TCWPDLLA材料24周时电镜下材料内层水解明显,因被降解吸收,多部位出现塌陷而结构紊乱破损,内部见大量无裂隙的扭曲样改变.对照组24周时骨小梁进行改建,可见致密的板层骨,但仍有较多腔隙.结论 3种可吸收柱状材料的组织相容性良好,6％ β-TCP/PDLLA材料降解过程较另2组材料平稳,可能是较为理想的椎体重建可吸收复合材料.
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R-(+)-2-氯丙酸的合成
以L-乳酸为起始原料,经乙酯化、氯代、水解得到R-(+)-2-氯丙酸产品,总收率达52.6%.
关键词： L-乳酸 R-(+)-2-氯丙酸 合成 -
PDLLA/NGF复合导管促进周围神经缺损再生的形态学研究
目的探究聚d,L-乳酸/神经生长因子(PDLLA/NGF)可吸收性复合导管桥接对大鼠坐骨神经缺损再生修复的促进作用,为临床上周围神经损伤再生修复提供实验依据.方法60只SD大鼠随机均分4组:自体神经移植(A组),单纯PDLLA导管(B组),PDLLA加一次性给NGF(C组),复合导管(D组).制作坐骨神经10 mm缺损,按上述分组桥接,手术后1、2、3月每组各取5只修复处组织,行大体观察、三头肌湿重、光镜观察与图像处理、电镜超微结构观察.结果同时间段组间比较,三头肌恢复率A组高,D组次之,C组较差,B组差(P＜0.05).组织学观察及图像分析显示,D组再生神经的数、质量都显著优于B、C组(P＜0.05),接近A组.电镜观察显示A、D组中段神经纤维密度大、直径大、髓鞘厚,内有发育良好的神经丝和微管.B、C组神经稀、直径小、髓鞘薄、无髓神经相对多.结论PDLLA/NGF复合导管具有良好的组织相容性.用该管桥接修复大鼠受损的坐骨神经,能有效地促进其再生.
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生物传感分析仪测定葡萄糖和L-乳酸的影响因素研究
生物传感分析仪广泛应用于食品发酵工业和实验室研究中,为了使其更好地应用于发酵工业和实验室检测,本研究考察了pH、无机盐的种类和浓度对SBA-40C型生物传感分析仪测定葡萄糖和L-乳酸准确性的影响,同时还考察了葡萄糖和乳酸测定的重复性及二者对测定是否存在相互干扰.结果表明:pH条件会严重影响测定结果,特别是影响L-乳酸测定的准确性;另外,当样品中的NaCl和NH4Cl浓度≥0.06mol/L时会使葡萄糖和L-乳酸测定值明显偏低.
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HPLC鉴别乳酸左氧氟沙星中的乳酸
目的 采用HPLC法鉴别乳酸左氧氟沙星中的乳酸.方法 采用Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸溶液(pH2.5)-乙腈(95∶5),流速1.0 mL· min-1,检测波长210 nm,柱温30℃.结果 乳酸中D-乳酸和L-乳酸主峰的分离良好,分离度度＞1.5;供试品色谱图中乳酸主峰的保留时间与D,L-乳酸对照品主峰的保留时间一致.结论 HPLC法鉴别乳酸左氧氟沙星中乳酸的专属性强、重复性良好,可用于鉴别乳酸左氧氟沙星中的乳酸.
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PDLLA-β-TCP膜引导牙周组织再生的实验研究
目的:对新研制的聚D,L-乳酸-β-磷酸三钙(PDLLA-β-TCP)膜的降解性及其生物相容性,以及引导牙周组织再生(GTR)的效果进行研究. 方法:①将膜植入小鼠皮下,光镜下观察植入2、4、8、12、16周后膜的降解情况及周围组织反应.②将膜植入狗牙周骨缺损处,设空白对照组,16周后普通光镜和偏振光显微镜观察牙周组织再生情况.结果:①该膜可发生降解,膜的维持时间为4周,且生物相容性好.②实验组形成的新附着占暴露根面的70.2%,而对照组的新附着仅占30.2%.实验组获得的新牙骨质与新牙槽骨均显著高于对照组(P＜0.05).结论: PDLLA-β-TCP膜是一种可降解的、生物相容性好的GTR膜,具有良好的应用前景.
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聚D,L-乳酸多孔支架的体外相容性研究
目的 评估聚D,L-乳酸(PDLLA)三维多孔支架的体外细胞相容性,探讨其作为骨组织工程支架类材料的可行性,为进一步进行体内试验提供依据.方法 将分离、获取的第3代骨髓间充质干细胞(BMSCs)按随机数字表法分成5组(0,3,6,9,12周组),分别用含体积分数20％降解液(0,3,6,9,12周时的PDLLA降解液)的细胞培养液和成骨诱导分化培养液进行细胞培养(以不含有降解液的细胞培养液或者成骨诱导分化培养液培养组为对照组,即0周组),从BMSCs的毒性、活力、成骨分化能力等方面定量评估PDLLA支架材料的细胞相容性;将分离、获取的第3代BMSCs种植于PDLLA支架材料上,定期进行扫描电子显微镜观察,从不同时相点细胞在PDLLA材料表面的生长情况定性评估PDLLA支架材料的细胞相容性. 结果 各组与对照组比较均未发现对细胞具有明显的毒性作用;各组均未发现对细胞的活力具有明显的负面影响(t3=-0.441,P=0.671;t6=1.596,P=0.154;t9=-0.492,P=0.636;t12=-1.135,P=0.283);各组细胞ALP染色和钙结节染色结果均表现为阳性,ALP活性定量检测和Ⅰ型胶原蛋白表达的定量检测与对照组之间差异均无统计学意义.扫描电镜结果显示,BMSCs在PDLLA三维多孔支架材料上呈现较好的贴壁生长.结论 PDLLA支架材料对BMSCs具有较好的体外相容性,可以作为一种骨组织工程支架类材料进行后续的体内试验.
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高效液相色谱法测定乳酸菌素制剂中乳酸对映体的含量与比例
目的:建立HPLC法对乳酸菌素制剂中L-乳酸和D-乳酸对映体进行拆分,并测定两者在乳酸菌素制剂中的含量与比例,运用L-乳酸和D-乳酸比值对搜集到的样本进行可能的工艺稳定性评价.方法:采用手性柱Chirex 3126(D青霉胺)-Phenomenex(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以2 mmol·L-1硫酸铜溶液-异丙醇(95:5)为流动相,流速1.0 mL·min-1,紫外检测波长254 nm,柱温为30℃.结果:L-乳酸与D-乳酸质量浓度在0.10～1.04 mg·mL-1范围内均呈良好线性(r =0.999 9);平均回收率(n=9)分别为97.5％和98.3％;检测限分别为0.094 4和0.124 6μg ·mL-1;供试品溶液在48 h内稳定性良好;总体样本L-乳酸和D-乳酸比值在0.93～1.68之间.结论:该方法简单快捷,适合于乳酸菌素制剂中乳酸对映体的含量测定研究,用L-乳酸和D-乳酸比值经统计可以观察样本间离散程度,能反映出各厂间工艺稳定性水平.
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HPLC法测定醋酸奥曲肽注射剂中乳酸对映异构体含量
目的:建立HPLC法和手性分离柱对醋酸奥曲肽注射剂中乳酸2种对映异构体进行拆分,并测定其含量,以评价产品的安全性.方法:采用手性柱Phenomenex Chirex 3126 (D)-penicillami (4.6 mm×250mm),流动相为2 mmol· L-1硫酸铜溶液(溶剂为2％异丙醇溶液),流速为1.0 mL·min-1,柱温35℃,紫外检测波长为230 nm.结果:L-乳酸与D-乳酸峰分离良好;L-乳酸浓度在0.51 ～3.05 mg·mL-1范围内线性关系良好(r=1.000),平均回收率为100.9％(n=9);D-乳酸浓度在4.19～41.90μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为99.8％(n=9);70批醋酸奥曲肽注射液的L-乳酸含量在0.7～2.4 mg·mL-1,D-乳酸含量在6.8～35.9μg·mL-1;21批注射用醋酸奥曲肽的L-乳酸含量在0.8～3.0 mg· mL-,D-乳酸含量在4.3～40.6 μg·mL-1;诺华公司的1批醋酸奥曲肽注射液仅检出L-乳酸,含量为2.4 mg· mL-1.结论:该方法操作简便、准确度高、灵敏度好,可用于醋酸奥曲肽注射剂中乳酸2种对映异构体的含量测定与质量控制.
