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贯叶连翘不同部位黄酮类成分差异与抗炎活性相关性分析
目的 超高效液相色谱(UPLC)法结合模式识别方法分析贯叶连翘不同生长部位成分和抗炎活性的差异,建立同时定量测定贯叶连翘5个不同生长部位中6种黄酮类活性成分的方法.方法 采用ACQUITY UPLC(R) BEH C18(50 mm×2.1mm,1.7 μm)色谱柱,0.2％甲酸-水-乙腈作为梯度洗脱系统.采集贯叶连翘花、果、叶、茎、根5个不同部位样品的色谱信息,对积分数据进行中心化、归一化等预处理,采用偏小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)及PLS-tree聚类分析方法,以NO活性的半数抑制浓度(IC50)作为抗炎活性的监督因子,评价贯叶连翘不同部位在黄酮成分、抗炎活性方面的相似性和差异性.结果 方法学验证结果显示,5种化合物线性关系良好,r＞0.999,精密度、重复性和稳定性良好,平均加样回收率为97.28％～102.84％.根据不同部位的黄酮类成分含量和抗炎活性PLS分析情况,显示贯叶连翘不同部位的质量为叶＞花＞茎＞果＞根.结论 说明贯叶连翘采收部位应以地面上茎干部分开始采收为宜.
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槲皮素及异槲皮素、芦丁抗自由基活性的比较研究
目的 评价3种黄酮类同系化合物槲皮素及其单糖苷异槲皮素和双糖苷芦丁的体外抗自由基作用,进一步研究其构效关系.方法 采用H2O2/Fe2+体系,通过Fenton反应生成羟自由基(·OH);采用邻苯三酚自氧化法产生超氧阴离子(O2-).利用·OH造成肝细胞脂质过氧化以及红细胞膜破裂,观察受试化合物的保护作用,并计算IC50.结果 在以上4种体外模型中,3种药物均表现出极强的清除自由基能力.在·OH以及O2-清除实验中,抗氧化活性顺序为芦丁＞异槲皮素＞槲皮素;在抑制肝匀浆脂质过氧化及红细胞膜破裂实验中,抗氧化活性顺序为槲皮素＞异槲皮素＞芦丁.结论 3种受试黄酮类化合物均具有十分强大的自由基清除作用,且呈现明显的剂量依赖性和糖基结构依赖性,在不同的实验体系中其抗自由基活性强弱顺序不同.
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林下仿生态种植金线莲的质量标准研究
目的 对林下仿生态种植金线莲的质量标准进行研究.方法 建立林下仿生态种植金线莲的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法,并按《中国药典》2015年版有关规定对水分、灰分和酸不溶性灰分等项目进行了测定.结果 林下仿生态种植金线莲在性状、显微特征和薄层色谱方面均具有专属性特征,经测定5个基地的金线莲水分平均为8.69％,总灰分平均为11.93％,酸不溶性成分平均为3.27％;含量测定结果槲皮素平均质量分数为0.021 0％,异鼠李素平均质量分数为0.024 7％,山柰素平均质量分数为0.027 3％.结论 上述方法简便、专属性好,重现性好,可为林下仿生态种植金线莲质量标准的制定提供依据.
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棉花花总黄酮片中黄酮类化合物的测定
目的 建立棉花花总黄酮片中总黄酮、金丝桃苷、异槲皮素的测定方法.方法 利用紫外分光光度计,以芦丁为对照品测定总黄酮,HPLC同时测定黄酮类化合物金丝桃苷和异槲皮素.结果 3批棉花花总黄酮片中总黄酮分别为71.6、73.5、75.2 mg/片,金丝桃苷分别为4.28、4.35、4.23 mg/片,异槲皮素分别为18.55、18.73、18.31 mg/片.结论 该方法专属性强,灵敏度高、重现性好,可用于棉花花总黄酮片中黄酮类化合物的测定.
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高速逆流色谱法从棉花花提取物中分离制备异槲皮素
目的 应用高速逆流色谱法分离制备异槲皮素.方法 对棉花花提取物用高速逆流色谱法一步分离纯化,以醋酸乙酯-水(1∶1)为两相溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速为800 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长254 nm,采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,薄层色谱、高效液相色谱法测定产品的纯度.结果 在该条件下经一步分离可得到质量分数为99％的异槲皮素对照品.结论 该方法操作简便,适合于从棉花花提取物中分离制备异槲皮素对照品.
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HPLC法同时测定5个采收期蛇莓中5种黄酮成分
目的 建立HPLC法同时测定5个采收期(4、5、6、7、8月)蛇莓Duchesnea indica (Andr.) Focke中5种黄酮成分的含有量.方法 蛇莓甲醇提取液的分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长350 nm;柱温25℃.结果 芦丁、金丝桃苷、异槲皮素、洋芹素和山柰酚在各自范围内均呈良好的线性关系(R2≥0.998 6),平均加样回收率97.1％～101.5％,RSD 1.37％ ～2.37％.不同采收期样品中5种成分含有量差异明显,其中芦丁和金丝桃苷在6月份高,异槲皮素在7月份高,洋芹素和山柰酚在8月份高.结论 蛇莓适宜采收期为6月和7月.
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木贼中三种黄酮苷的含量测定
目的测定木贼中三种黄酮苷的含量.方法采用双波长薄层扫描法测定木贼中三种黄酮苷含量.结果异槲皮素,山柰酚-3-芸香糖-7-葡萄糖苷,山柰酚-3,7-双葡萄糖苷分别在0.5～2.5μg,0.2～1.0μg,0.2～1.0μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为97.96%,98.06%,97.43%,RSD分别为2.08%,2.31%,2.46%.结论用薄层扫描法测定木贼中三种黄酮苷的含量是可行的,为木贼的合理利用和质量控制提供了一定的科学依据.
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罗布麻花中异槲皮素的蜗牛酶提取工艺研究
目的 研究罗布麻花中异槲皮素的提取工艺.方法 以蜗牛酶提取作为提取方法,高效液相色谱法测定异槲皮素含量为指标,通过正交实验,考察蜗牛酶用量、酶解温度、酶解时间和酶解pH值等对提取效果的影响.结果 罗布麻花中异槲皮素的佳提取工艺为酶解温度为60℃,酶用量为0.2 mg/ml,酶解时间为1 h,酶解pH值为5.0,测得异槲皮素含量为4.0585%.结论 酶法提取具有反应温和.设备简单的特点,提取过程节能环保,并且减少对提取物的氧化,适合中药材的大量提取.
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高效液相色谱法同时测定葡萄籽中芦丁、槲皮素与异槲皮素的含量
目的 建立高效液相色谱法测定葡萄籽中的芦丁、槲皮素与异槲皮素的含量.方法 葡萄籽经提取处理得到黄酮苷元,通过高效液相色谱法测定芦丁、槲皮素、异槲皮素的含量来计算总黄酮的含量.在Agilent 1200系统中,室温条件下使用Symmetry C18柱(4.6 mm×250 mm,5.0 μm),以乙腈-0.4％磷酸溶液(40∶60)为流动相；流速1.0mL· min-1；检测波长501 nm.结果 芦丁、槲皮素、异槲皮素在0.2～1.6 μg线性关系均良好,相关系数r分别为0.999 1、0.999 4、0.999 0,平均回收率分别为101.0％、98.2％、99.7％,RSD分别为1.3％、2.7％、1.6％(n=6).结论 该法灵敏度高、专属性强,可以通过测定葡萄籽中的芦丁、槲皮素、异槲皮素来推算其总黄酮含量,对葡萄籽的药用成分价值作出评估.
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人肠内菌转化模型的稳定性研究
目的:以异槲皮素为转化对象对肠内菌体外转化模型的转化稳定性进行考察.方法:按照先前建立的《人肠内细菌生物转化模型和标准操作规程》,采用人源不同及人源相同但培养代数不同的肠内菌建立体外转化模型,对异槲皮素进行生物转化.结果:在24 h内,采用不同人源的肠内菌建立的转化模型均可将异槲皮素转化为槲皮素,但是转化所需的时间存在差异;而随着培养代数的增加,肠内菌表现出转化效率增强的趋势.结论:本研究证明,按照《标准操作规程》建立的肠内菌体外转化模型比较稳定,所得实验结果具有重现性,可用于中药化学成分的肠内菌转化研究.
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RP-HPLC法测定山楂中黄酮类成分的含量
目的:建立RP-HPLC测定山楂中金丝桃苷和异槲皮素含量的方法.方法:以YMC-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱,0.5%醋酸溶液-乙腈-甲醇(82:12:6)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长360nm,柱温30℃.结果:金丝桃苷和异槲皮素的线性范围分别为0.0684～0.684及0.0324～0.162μg;平均回收率分别为100.7%(RSD=1.5%)和101.4%(RSD=2.9%).结论:所建立的HPLC法可用于同时测定山楂属植物中金丝桃苷和异槲皮素的含量.
